IPC分类号 : C12N15/81,C12N15/12,C07K14/46,A23K50/80,A23K20/147
专利摘要
一种黄鳝抗菌肽的制备方法，包括以下步骤： 1)将黄鳝抗菌肽基因与载体连接构建重组载体； 2)将步骤1)中获得的重组载体转入到毕赤酵母中获得重组菌株； 3)将重组菌株以0.9～1％接种体积接种到BMGY培养基中诱导培养47～49h获得培养 液；步骤3)中接种的重组菌的OD为0.8～2； 4)收集培养液中的菌体细胞进行破碎，获得细胞破碎液，镍柱收集和纯化所述细胞破 碎液获得黄鳝抗菌肽；所述黄鳝抗菌肽基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述菌体细 胞采用蜗牛酶孵育后与TritonX‑100、PMSF混合在超声作用下实现破碎； 所述载体为pPIC9K载体，所述黄鳝抗菌肽基因连接在载体中EcoRI和NotI酶切位点之 间； 步骤4)中所述蜗牛酶与菌体细胞的质量比为(6～8)：200；所述蜗牛酶孵育的温度为35 ～40℃，所述蜗牛酶孵育的时间为50～70min。 2.根据权利要求1所述的黄鳝抗菌肽的制备方法，其特征在于，步骤3)中诱导培养过程 中添加甲醇。 3.根据权利要求1所述的黄鳝抗菌肽的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述连接的体 系包括以下组分：10×T4 DNA Ligase Buffer 1μL，黄鳝抗菌肽基因3μL，载体1μL，T4DNA Ligase 1μL和ddH2O 4μL；步骤1)中所述连接的温度为3～5℃，所述连接的时间为10～14h。 4.根据权利要求1～3任意一项所述的制备方法制备获得的黄鳝抗菌肽在制备鱼类饲 料中的应用。
一种黄鳝抗菌肽的制备方法专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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