专利摘要
一种重组蛋白swHO1在制备病原细菌诱导的黄鳝氧化应激调控药物中的应用，所述重组蛋白swHO1如SEQ ID NO:8所示。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述重组蛋白swHO1按如下方法制备： 提取黄鳝肝脏组织总RNA，通过反转录和PCR扩增，将黄鳝血红素氧化酶1的编码基因克隆到表达载体上，获得重组表达载体pET‑HO1；将所述重组表达载体pET‑HO1转化到大肠杆菌BL21(DE3)细胞中进行表达，纯化，得到重组蛋白swHO1。 3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述黄鳝血红素氧化酶1的编码基因的PCR扩增步骤如下： （1）根据已知鱼类的HO1基因序列，设计了一对简并引物用来扩增反转录得到的黄鳝HO1基因的cDNA片段；所述扩增产物进行纯化后与pEASY‑T1载体连接，转化至DH5a感受态细胞中，鉴定得到阳性克隆片段； （2）根据所得cDNA片段设计基因特异性引物分别用于cDNA片段的5’和3’末端进行RACE扩增，得到cDNA末端序列； （3）将所述阳性克隆片段与所述cDNA末端序列进行拼接后即得到黄鳝HO1基因全长cDNA序列。 4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述重组表达载体pET‑HO1的构建步骤如下： （1）以所述黄鳝HO1基因全长cDNA序列为模板，设计正向引物和反向引物，进行PCR扩增，得到PCR产物；其中所述正向引物和反向引物中分别添加了Bam HⅠ和XhoⅠ酶切位点； （2）将PCR产物和pET‑28a(+)表达载体进行双酶切，回收纯化，连接后转化至大肠杆菌DH5α，筛选，提取质粒进行测序验证，获得重组表达载体pET‑HO1。 5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述表达步骤为： 将所述重组表达载体pET‑HO1转化至所述宿主细胞E.coli BL21（DE3）细菌中，得到表达菌株； 将所述表达菌株接种至含有50 mg/L卡那霉素的LB培养液中培养至OD值约为0.6时，加入IPTG进行诱导，培养3h。 6.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述纯化步骤为：离心收集诱导后的所述表达菌株菌液，超声破碎，离心，悬浮，过滤，上清上样至Ni‑NTA His Bind Resin纯化柱，用含有咪唑的PBS溶液洗脱，后即得所述重组蛋白swHO1的溶液。
一种重组蛋白swHO1的制备方法及应用专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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