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一种双巢式PCR检测伪狂犬病毒野毒株和基因缺失疫苗毒株的方法及其应用

一种双巢式PCR检测伪狂犬病毒野毒株和基因缺失疫苗毒株的方法及其应用

IPC分类号 : C12Q1/70,C12Q1/68,C12N15/11

申请号
CN201710682619.9
可选规格
  • 专利类型: 发明专利
  • 法律状态: 有权
  • 申请日: 2017-08-10
  • 公开号: CN107488741A
  • 公开日: 2017-12-19
  • 主分类号: C12Q1/70
  • 专利权人: 长江大学

专利摘要

一种双巢式PCR检测伪狂犬病毒野毒株和基因缺失疫苗毒株方法,其特征在于:步骤包括: S1、将待测样本提取DNA得到样本DNA; S2、将样本DNA采用外侧引物gH-O-F、gH-O-R、gE-O-F、gE-O-R进行第一次PCR扩增,扩增条件为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,58℃退火30 s,72℃延伸45 s;72℃再延伸5 min,4℃ 10 min,对扩增产物进行伪狂犬病毒检测; S3、将步骤S2所得扩增产物作为模板,采用内侧引物gH-I-F、gH-I-R、gE-I-F、 gE-I-R进行第二次PCR扩增,扩增条件为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸45 s;72℃再延伸5 min,4℃ 10 min,对扩增产物进行伪狂犬病毒检测; 所述gH-O-F序列如SEQ ID NO:1所示,gH-O-R序列如SEQ ID NO:2所示,gE-O-F序列如SEQ ID NO:3所示,gE-O-R序列如SEQ ID NO:4所示,gH-I-F序列如SEQ ID NO:5所示,gH-I-R序列如SEQ ID NO:6 所示,gE-I-F序列如SEQ ID NO:7所示,gE-I-R序列如SEQ ID NO:8所示; S2所述第一次PCR扩增的扩增体系为:总体积25 μL,其中Taq MIX 12.5 μL,gH-O-F、gH-O-R、gE-O-F、gE-O-R各1 μL,DNA模板1 μL,ddH2O余量; S3所述第二次PCR扩增的扩增体系为:总体积25 μL,其中Taq MIX 12.5 μL, gH-I-F、gH-I-R、gE-I-F、gE-I-R各1μL,DNA 模板1μL,ddH2O余量; 上述方法不用于疾病的诊断和治疗。 2.如权利要求1所述的双巢式PCR检测伪狂犬病毒野毒株和基因缺失疫苗毒株方法,其特征在于:步骤S2、S3所述伪狂犬病毒检测均为用质量百分比0.6-1%琼脂糖胶进行琼脂糖凝胶电泳检测。

一种双巢式PCR检测伪狂犬病毒野毒株和基因缺失疫苗毒株的方法及其应用专利购买费用说明

专利买卖交易资料

Q:办理专利转让的流程及所需资料

A:专利权人变更需要办理著录项目变更手续,有代理机构的,变更手续应当由代理机构办理。

1:专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2:按规定缴纳著录项目变更手续费。

3:同时提交相关证明文件原件。

4:专利权转移的,变更后的专利权人委托新专利代理机构的,应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A:(1)直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,(2)通过代办处缴纳,(3)通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q:专利转让变更,多久能出结果

A:著录项目变更请求书递交后,一般1-2个月左右就会收到通知,国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。

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