专利摘要

本发明公开了一种细菌纤维素纯化分离的方法，首先将培养出的细菌纤维素浸于去离子水中去除细菌纤维素内部的培养基，将细菌纤维素浸泡溶菌酶溶液中；通过加入乙二胺四乙酸或胰蛋白酶加快溶菌酶破坏细菌细胞壁；随后通过表面活性剂和超声处理加速细菌细胞膜破裂易于分离去除细菌残体；最后进行反复清洗得到纯化的细菌纤维素。本发明通过使用溶菌酶，制备出纯化的细菌纤维素，避免使用氢氧化钠或者碳酸钠等碱性物质带来的环境污染以及对细菌纤维素原位复合物中高分子材料结构和性能的影响，纯化后的细菌纤维素维持原有的三维形貌。本发明具有操作简便、成本低廉、缩短了纯化时间、绿色无污染和易实现规模化生产等优点。

权利要求

1.一种细菌纤维素纯化分离的方法，该方法在未使用碱性溶剂的前提下对细菌纤维素进行纯化分离处理，通过溶菌酶作用使其细菌的细胞壁分解、破裂，再经表面活性剂辅以超声处理加速细菌细胞膜破裂易于分离去除细菌残体，最后，经反复清洗除去菌体获得无细菌及内毒素的细菌纤维素；其特征在于，该方法的步骤如下：

步骤1)：以pH为6.5的三羟甲基氨基甲烷溶液为溶剂，配制溶菌酶溶液，并与乙二胺四乙酸或胰蛋白酶溶液等体积均匀混合配制成溶菌酶混合溶液，备用；其中，溶菌酶溶液的质量体积浓度为0.5g/L，乙二胺四乙酸溶液的质量体积浓度为1.0g/L，或是胰蛋白酶质量浓度为2.5％；

步骤2)：将培养3-5天的细菌纤维素水凝胶取出，浸泡在去离子水中10-12h，更换去离子水，反复多次，直至细菌纤维素内部培养基和杂质被去离子水 置换出来；

步骤3)：将步骤2)处理后的细菌纤维素水凝胶浸泡在步骤1)制得的溶菌酶混合溶液中，其中，细菌纤维素与溶菌酶混合溶液的质量体积浓度为0.05-0.25g/mL；置于摇床进行振荡，摇床转速范围为100-200r/min，温度为30-40℃，浸泡振荡时间为3-12h；

步骤4)：将步骤3)获得的细菌纤维素水凝胶浸泡在表面活性剂中进行超声使细菌细胞膜破解充分，超声时间为3-6h，超声功率为100-300W；

步骤5)：将步骤4)获得的细菌纤维素水凝胶多次清洗，去除细菌纤维素内部残留的表面活性剂，制备出纯化的细菌纤维素水凝胶。

2.根据权利要求1所述细菌纤维素纯化分离的方法，其特征在于，所述表面活性剂包括Triton X-100、TWEEN-20、Span-80及烷基糖苷中的一种。

一种细菌纤维素提纯分离的方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。