专利摘要

本发明公开了一种四步法合成28‑高芸苔素内酯的制备方法，它是以(2,22)‑二烯‑24S‑乙基‑5α‑胆甾‑6‑酮为原料，经环氧化、酯化、Baeyer‑Villiger氧化和水解反应得28‑高芸苔素内酯。本发明具有绿色环保、无污染、环境友好、原料易得、来源广泛、成本低廉、方法简单、适合于工业化生产的优点，该制备方法解决了现有技术中制备成本高和难于工业化生产的问题。

权利要求

1.一种四步法合成28-高芸苔素内酯的制备方法，特征在于：

A、制备(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α -胆甾 - 6 - 酮：以(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮为原料，在第一种氧化剂、手性催化剂和第一种溶剂的作用下生成二环氧化合物(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮；其中：所用的第一种氧化剂为过氧化氢、过硫酸氢钾、过硫酸氢钠、叔丁基过氧化氢、二叔丁基过氧化物、过氧化异丙苯、过氧乙酸、过氧三氟乙酸、过氧苯甲酸或间氯过氧苯甲酸中的一种；所用的手性催化剂为手性果糖酮或手性奎尼丁酮中的一种；所用的第一种溶剂为水、乙腈、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯、氯苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙醚、正丙醚、异丙醚、正丁基醚、叔丁基醚、新戊基醚、苯甲醚、二苯醚、α-萘甲醚、β-萘甲醚、环氧乙烷、四氢呋喃或1, 4 - 二氧六环中的一种；

B、制备(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5α - 胆甾 - 6 - 酮：以步骤A中制备的(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮为原料，经催化剂、二氧化碳和第二种溶剂的作用下生成(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5α - 胆甾 - 6 - 酮；其中：所用的催化剂为四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、四丁基硫酸氢铵、苄基三甲基溴化铵、苄基三甲基氯化铵、苄基三乙基氯化铵、苄基三乙基溴化铵、苯基三甲基溴化铵、苯基三甲基氯化铵、甲基三辛基溴化铵、甲基三辛基氯化铵、三甲基十二烷基溴化铵、三甲基十二烷基氯化铵、三甲基十四烷基溴化铵、三甲基十四烷基氯化铵；所用的第二种溶剂为水、乙腈、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯、氯苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙醚、正丙醚、异丙醚、正丁基醚、叔丁基醚、新戊基醚、苯甲醚、二苯醚、α-萘甲醚、β-萘甲醚、环氧乙烷、四氢呋喃或1, 4 - 二氧六环中的一种；

C、制备(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯：以步骤B中制备的(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基- 5 α - 胆甾 - 6 - 酮为原料，经第二种氧化剂和第三种溶剂的作用下生成(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯；其中：所用的第二种氧化剂为过氧化氢、过硫酸氢钾、过硫酸氢钠、叔丁基过氧化氢、二叔丁基过氧化物、过氧化异丙苯、过氧乙酸、过氧三氟乙酸、过氧苯甲酸或间氯过氧苯甲酸中的一种；所用的第三种溶剂为水、乙腈、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯、氯苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙醚、正丙醚、异丙醚、正丁基醚、叔丁基醚、新戊基醚、苯甲醚、二苯醚、α-萘甲醚、β-萘甲醚、环氧乙烷、四氢呋喃或1, 4 - 二氧六环中的一种；

D、制备28-高芸苔素内酯：以步骤C中制备的(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22,23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯为原料，碱性试剂或酸性试剂作用下水解后，制得成品：28-高芸苔素内酯。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤A中，所用的第一种氧化剂优选为过硫酸氢钾；所用的手性催化剂优选为手性果糖酮；所用的第一种溶剂优选为水。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤B中，所用的催化剂优选为四丁基溴化铵；所用的第二种溶剂优选为水。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤C中，所用的第二种氧化剂优选为间氯过氧苯甲酸；所用的第三种溶剂优选为水。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤D中，所用的碱性试剂为碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡；所用的酸性试剂为：盐酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、软脂酸、硬脂酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、棕榈酸、丙烯酸、苯甲酸、苯环上取代的苯甲酸、苯乙酸、苯环上取代的苯乙酸、苯磺酸、苯环上取代的苯磺酸或邻苯二甲酸中的一种。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：在步骤D中，所用的碱性试剂优选为碳酸钾；所用的酸性试剂优选为稀硫酸。

说明书

技术领域

本发明涉及有机化学领域，尤其是涉及一种四步法合成28-高芸苔素内酯的制备方法。

背景技术

芸苔素内酯是一种对人畜无害、无毒的新型绿色环保植物生长激素。1979年，美国科学家Grove（Grove M.D.et al. Nature (London, United Kingdom), 1979, 281(5728): 216 - 217）从油菜花粉中分离出的一种激素，并通过对其结晶物进行鉴定，确认其结构为甾醇类化合物，称之为芸苔素内酯。芸苔素内酯是自然界最新发现的植物生长调节剂，被称为第六类植物生长调节剂，其生物活性远远超过现有五大激素（生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯）。目前已发现的芸苔素内酯类似物有40多种，但生物活性高且有实用价值的很少，其主要有：24 - 混表芸苔素内酯、24 - 表芸苔素内酯、28-高表芸苔素内酯和28-高芸苔素内酯（其化学结构分别如图1）。其中，28-高芸苔素内酯的生物活性较高，是目前唯一对单、双子叶和木本科植物均高活性的植物激素。因此，研究28-高芸苔素内酯的合成与生产具有重要的理论和现实意义。

在众多关于28-高芸苔素内酯合成的文献报道中，其最具工业前景的合成路线是：以豆甾醇为原料，经羟基的磺酰化、环化、仲醇氧化、重排、烯烃的不对称氧化和Baeyer-Villiger氧化反应，共六步反应得目标产物：28-高芸苔素内酯。但在该合成路线的关键步骤中，其第五步烯烃的双羟基化成（2 α, 3 α, 22 R, 23 R）-四羟基- 24 S - 乙基 - β -高 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮：使用了昂贵且剧毒的四氧化锇（OsO₄）作为氧化剂，且烯烃的双羟基化反应的立体选择性不高，增加了成本，污染了环境。

因此，优化28-高芸苔素内酯的合成工艺，是降低28-高芸苔素内酯的制备成本和实现工业化生产的关键技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种绿色环保、无污染、环境友好、原料易得、来源广泛、成本低廉、方法简单、适合于工业化生产的四步法合成28-高芸苔素内酯的制备方法，该制备方法解决了现有技术中制备成本高、环境污染大和难于工业化生产的问题。

本发明的目的是这样实现的：

一种四步法合成28-高芸苔素内酯的制备方法，特征是：

A、制备(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α -胆甾 - 6 - 酮（1）：以(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮为原料，在第一种氧化剂、手性催化剂和第一种溶剂的作用下生成二环氧化合物(2 α, 3 α, 22 R,23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（1）；

B、制备(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5α - 胆甾 - 6 - 酮（2）：以步骤A中制备的(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（1）为原料，经催化剂、二氧化碳和第二种溶剂的作用下生成(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基- 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（2）；

C、制备(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯（3）：以步骤B中制备的(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S -乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（2）为原料，经第二种氧化剂和第三种溶剂的作用下生成(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯（3）；

D、制备28-高芸苔素内酯（4）：以步骤C中制备的(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3,22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯（3）为原料，碱性试剂或酸性试剂作用下水解后，制得成品：28-高芸苔素内酯（4）。

在步骤A中，所用的第一种氧化剂为过氧化氢、过氧化钠、过氧化钾、过氧化钙、过氧化钡、过硫酸氢钾、过硫酸氢钠、2, 2 - 过氧化二氢丙烷、2, 5 - 二甲基 - 2, 5 - 过氧化二氢己烷、2, 2 - 双(过氧化叔丁基)丙烷、2, 2 - 双(过氧化叔丁基)丁烷、2, 5 -二甲基 - 2, 5 - 双(过氧化叔丁基)己烷、叔丁基过氧化氢、二叔丁基过氧化物、过氧化异丙苯、过氧乙酸、过氧三氟乙酸、过氧苯甲酸、间氯过氧苯甲酸、过氧化苯甲酰、甲乙酮过氧化物、过氧新庚酸1, 1 - 二甲基 - 3 - 羟丁酯、过氧化新癸酸酯、过氧化异丙苯酯、过氧化新癸酸叔戊酯、过氧新戊酸叔丁酯、过辛酸叔戊酯、过辛酸叔丁酯、过苯甲酸叔戊酯、过苯甲酸叔丁酯、异丙苯基过氧酯、叔辛基过氧酯、叔戊基过氧酯、叔丁基过氧酯、2 - 乙基己基过氧二碳酸酯、叔丁基过氧缩酮、叔戊基过氧缩酮或青蒿素中的一种；所用的手性催化剂为手性果糖酮或手性奎尼丁酮中的一种；所用的第一种溶剂为水、乙腈、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、甲酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯、苯、氯苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙醚、正丙醚、异丙醚、正丁基醚、叔丁基醚、新戊基醚、苯甲醚、二苯醚、α-萘甲醚、β-萘甲醚、环氧乙烷、四氢呋喃或1, 4 - 二氧六环中的一种。

在步骤A中，所用的第一种氧化剂优选为过硫酸氢钾；所用的手性催化剂优选为手性果糖酮；所用的第一种溶剂优选为水。

在步骤B中，所用的催化剂为四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、四丁基硫酸氢铵、苄基三甲基溴化铵、苄基三甲基氯化铵、苄基三乙基氯化铵、苄基三乙基溴化铵、苯基三甲基溴化铵、苯基三甲基氯化铵、甲基三辛基溴化铵、甲基三辛基氯化铵、三甲基十二烷基溴化铵、三甲基十二烷基氯化铵、三甲基十四烷基溴化铵或三甲基十四烷基氯化铵中的一种；所用的第二种溶剂为水、乙腈、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、甲酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯、苯、氯苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙醚、正丙醚、异丙醚、正丁基醚、叔丁基醚、新戊基醚、苯甲醚、二苯醚、α-萘甲醚、β-萘甲醚、环氧乙烷、四氢呋喃或1, 4 - 二氧六环中的一种。

在步骤B中，所用的催化剂优选四丁基溴化铵；所用的第二种溶剂优选水。

在步骤C中，所用的第二种氧化剂为过氧化氢、过氧化钠、过氧化钾、过氧化钙、过氧化钡、过硫酸氢钾、过硫酸氢钠、2, 2 - 过氧化二氢丙烷、2, 5 - 二甲基 - 2, 5 - 过氧化二氢己烷、2, 2 - 双(过氧化叔丁基)丙烷、2, 2 - 双(过氧化叔丁基)丁烷、2, 5 -二甲基 - 2, 5 - 双(过氧化叔丁基)己烷、叔丁基过氧化氢、二叔丁基过氧化物、过氧化异丙苯、过氧乙酸、过氧三氟乙酸、过氧苯甲酸、间氯过氧苯甲酸、过氧化苯甲酰、甲乙酮过氧化物、过氧新庚酸1, 1 - 二甲基 - 3 - 羟丁酯、过氧化新癸酸酯、过氧化异丙苯酯、过氧化新癸酸叔戊酯、过氧新戊酸叔丁酯、过辛酸叔戊酯、过辛酸叔丁酯、过苯甲酸叔戊酯、过苯甲酸叔丁酯、异丙苯基过氧酯、叔辛基过氧酯、叔戊基过氧酯、叔丁基过氧酯、2 - 乙基己基过氧二碳酸酯、叔丁基过氧缩酮、叔戊基过氧缩酮或青蒿素中的一种；所用的第三种溶剂为水、乙腈、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、甲酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯、苯、氯苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、乙醚、正丙醚、异丙醚、正丁基醚、叔丁基醚、新戊基醚、苯甲醚、二苯醚、α-萘甲醚、β-萘甲醚、环氧乙烷、四氢呋喃或1, 4 - 二氧六环中的一种。

在步骤C中，所用的氧化剂优选间氯过氧苯甲酸；所用的第三种溶剂优选水。

在步骤D中，所用的碱性试剂为碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢钾、磷酸二氢钾、磷酸钙、磷酸氢钙、磷酸二氢钙、磷酸钡、磷酸氢钡、磷酸二氢钡、氧化钾、氧化钠、氧化钙、氧化钡、氧化镁、氧化铝、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙或氢氧化钡中的一种；所用的酸性试剂为：盐酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、软脂酸、硬脂酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、棕榈酸、丙烯酸、苯甲酸、苯环上取代的苯甲酸、苯乙酸、苯环上取代的苯乙酸、苯磺酸、苯环上取代的苯磺酸、邻苯二甲酸、α-萘甲酸、β-萘甲酸、α-萘乙酸、β-萘乙酸、萘环上取代的α-萘甲酸、萘环上取代的β-萘甲酸、萘环上取代的α-萘乙酸或萘环上取代的β-萘乙酸中的一种。

在步骤D中，所用的碱性试剂优选碳酸钾；所用的酸性试剂优选稀硫酸。

本发明具有绿色环保、无污染、环境友好、原料易得、来源广泛、成本低廉、方法简单、适合于工业化生产的优点，该制备方法解决了现有技术中制备成本高和难于工业化生产的问题。

附图说明

图1为活性较高的四种芸苔素内酯的化学结构图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行进一步的说明。

一种四步法合成28-高芸苔素内酯的制备方法的合成路线如下式所示：

具体实施例如下:

实施例1：

将(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（410.67 g，1.00 mol)、过硫酸氢钾(152.00 g, 1.00 mol)、果糖酮 (254.32 g, 1.00 mol)、水 (2 L)置于三口瓶中，于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物1：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 -酮转移到三口瓶中，并加入四丁基溴化铵（32.24 g, 0.10 mol）和水（2 L），于25 ℃下通入二氧化碳至反应完全。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物2：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 -6 - 酮转移到三口瓶中，并加入间氯过氧苯甲酸（172.57 g, 1.00 mol）和水（2 L），于25℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物3：(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2,3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯转移到三口瓶中，并加入碳酸钾（276.00 g,2.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h，加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得目标产物4：28-高芸苔素内酯（282.94 g，总收率57.2 %）。

实施例2：

将(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（410.67 g，1.00 mol)、50 %的双氧水（68.00 g, 1.00 mol）、果糖酮 (254.32 g, 1.00 mol)、水 (2 L)置于三口瓶中，于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物1：(2 α, 3α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6- 酮转移到三口瓶中，并加入四丁基溴化铵（32.24 g, 0.10 mol）和水（2 L），于25 ℃下通入二氧化碳至反应完全。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物2：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 -6 - 酮转移到三口瓶中，并加入间氯过氧苯甲酸（172.57 g, 1.00 mol）和水（2 L），于25℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物3：(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2,3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯转移到三口瓶中，并加入碳酸钾（276.00 g,2.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h，加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得目标产物4：28-高芸苔素内酯（237.43 g，总收率48.0 %）。

实施例3：

将(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（410.67 g，1.00 mol)、过硫酸氢钾(152.00 g, 1.00 mol)、奎尼丁酮（324.42 g, 1.00 mol）、水 (2 L)置于三口瓶中，于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物1：(2 α, 3α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6- 酮转移到三口瓶中，并加入四丁基溴化铵（32.24 g, 0.10 mol）和水（2 L），于25 ℃下通入二氧化碳至反应完全。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物2：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 -6 - 酮转移到三口瓶中，并加入间氯过氧苯甲酸（172.57 g, 1.00 mol）和水（2 L），于25℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物3：(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2,3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯转移到三口瓶中，并加入碳酸钾（276.00 g,2.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h，加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得目标产物4：28-高芸苔素内酯（240.40 g，总收率48.6 %）。

实施例4：

将(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（410.67 g，1.00 mol)、过硫酸氢钾(152.00 g, 1.00 mol)、果糖酮 (254.32 g, 1.00 mol)、水 (2 L)置于三口瓶中，于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物1：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 -酮转移到三口瓶中，并加入四丁基氯化铵（27.79 g, 0.10 mol）和水（2 L），于25 ℃下通入二氧化碳至反应完全。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物2：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 -6 - 酮转移到三口瓶中，并加入间氯过氧苯甲酸（172.57 g, 1.00 mol）和水（2 L），于25℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物3：(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2,3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯转移到三口瓶中，并加入碳酸钾（276.00 g,2.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h，加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得目标产物4：28-高芸苔素内酯（275.52 g，总收率55.7 %）。

实施例5：

将(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（410.67 g，1.00 mol)、过硫酸氢钾(152.00 g, 1.00 mol)、果糖酮 (254.32 g, 1.00 mol)、水 (2 L)置于三口瓶中，于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物1：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 -酮转移到三口瓶中，并加入四丁基溴化铵（32.24 g, 0.10 mol）和水（2 L），于25 ℃下通入二氧化碳至反应完全。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物2：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 -6 - 酮转移到三口瓶中，并加入过氧三氟乙酸（130.00 g, 1.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物3：(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2,3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯转移到三口瓶中，并加入碳酸钾（276.00 g,2.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h，加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得目标产物4：28-高芸苔素内酯（238.42 g，总收率48.2 %）。

实施例5：

将(2, 22) - 二烯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮（410.67 g，1.00 mol)、过硫酸氢钾(152.00 g, 1.00 mol)、果糖酮 (254.32 g, 1.00 mol)、水 (2 L)置于三口瓶中，于25 ℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物1：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二环氧 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 -酮转移到三口瓶中，并加入四丁基溴化铵（32.24 g, 0.10 mol）和水（2 L），于25 ℃下通入二氧化碳至反应完全。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物2：(2 α, 3 α,22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 - 6 - 酮。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 24 S - 乙基 - 5 α - 胆甾 -6 - 酮转移到三口瓶中，并加入间氯过氧苯甲酸（172.57 g, 1.00 mol）和水（2 L），于25℃下搅拌5 h。加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得产物3：(2 α, 3 α, 22 R, 23R) - 2, 3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯。把(2 α, 3 α, 22 R, 23 R) - 2,3, 22, 23 - 二碳酸酯 - 28-高芸苔素内酯转移到三口瓶中，并加入浓硫酸（98.00 g,1.00 mol）和水（2 L），于25 ℃下搅拌5 h，加入乙酸乙酯，水洗涤，干燥，回收乙酸乙酯，得目标产物4：28-高芸苔素内酯（241.39 g，总收率48.8 %）。

一种四步法合成28-高芸苔素内酯的制备方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。