专利摘要

本发明公开了一种从木质纤维素碱性氧化预处理液中分离木质素联产低聚木糖的方法，采用低成本的梯度pH调整和绿色环保的酶水解结合方式，无需用乙醇等有机溶剂，且酸用量少，实现了木质纤维素碱性氧化预处理液中木质素的分离以及木聚糖酶水解转化为低聚木糖，成本低，绿色环保，解决了现有技术酸析出法分离纯化木质素需要消耗大量的酸采用乙醇沉淀分离木聚糖存在乙醇消耗大、成本高的问题。

权利要求

1.从木质纤维素碱性氧化预处理液中分离木质素联产低聚木糖的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）采用离心的方法对木质纤维素碱性氧化预处理液进行固液分离，得到上清液1；将粉碎烘干后的木质纤维素类生物质置于玻璃反应器中，加入质量分数为0 .5％～5％的碱液和质量分数为0 .5％～5％的双氧水，控制固液质量比为1:10～35，反应温度为30℃～90℃，反应时间为1h～24h，反应结束后固液分离，并用水洗涤固体残渣至中性；固液分离后得到的液相和用水洗涤固体残渣得到的洗涤液的混合物统称为木质纤维素碱性氧化预处理液；

（2）调节上清液1的pH至5~6，并真空旋转蒸发浓缩并固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH为4~5缓冲液分散沉淀1并加入50~500 IU/g内切木聚糖酶，45~60℃，水解9~24h得到低聚木糖溶液1；

（3）步骤（2）得到的上清液2继续调节pH至4~5，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH为4~5缓冲液分散沉淀2并加入50~500 IU/g内切木聚糖酶，45~60℃，水解9~24h，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1；

（4）步骤（3）得到的上清液3中加入50~500 IU/mL内切木聚糖酶，45~60℃，水解9~24h，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液3，用水洗涤沉淀3得到木质素2。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述木质纤维素碱性氧化预处理液来自甘蔗渣、小麦秸秆、玉米秸秆或玉米芯碱性氧化预处理液中的一种。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）用酸调节上清液的pH为5~6；所述酸选自硫酸、盐酸、乙酸和柠檬酸中的任一种。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）用酸调节上清液的pH为4~5，所述的酸选自硫酸、盐酸、乙酸和柠檬酸中的任一种。

说明书

技术领域：

本发明涉及一种从木质纤维素碱性氧化预处理液中分离木质素联产低聚木糖的方法。

背景技术：

木质纤维素碱性氧化预处理液是一种黄色的液体，是由甘蔗渣、秸秆、玉米芯等农林生物质经过碱性氧化预处理后固液分离得到的液相和固体残渣洗涤过程产生的洗涤废液(参见CN108588144A)组成的混合物。木质纤维素碱性氧化预处理液呈碱性，其pH值为9～10，且成分较为复杂，富含木聚糖和木质素等大分子，此外，还包括残碱、氧化剂、糖类、和乙酸等小分子溶出物。木质纤维素碱性氧化预处理液的可生化性能较差，如不经过处理而直接排放，容易造成环境污染。将木质纤维素碱性氧化预处理液中的木质素和木聚糖进行回收并利用，不仅能提高木质纤维素生物炼制的经济效益，而且能降低其废水处理难度。酸析出法和乙醇沉淀法是从碱浸提的木质纤维素预处理液中分离木质素和木聚糖的常用方法。酸析出法分离纯化木质素通常要将碱预处理液pH调至2左右，需要消耗大量的酸，特别是对于浓碱抽提预处理液，而采用乙醇沉淀分离木聚糖存在乙醇消耗大、成本高等问题，不利于实际的工业化生产应用。

发明内容：

本发明的目的是提供一种从木质纤维素碱性氧化预处理液中分离木质素联产低聚木糖的方法，采用低成本的梯度pH调整和绿色环保的酶水解结合方式，无需用乙醇等有机溶剂，且酸用量少，实现了木质纤维素碱性氧化预处理液中木质素的分离以及木聚糖酶水解转化为低聚木糖，不仅成本低而且绿色环保，解决了现有技术酸析出法分离纯化木质素需要消耗大量的酸和采用乙醇沉淀分离木聚糖存在乙醇消耗大、成本高的问题。

本发明是通过以下技术方案予以实现的：

从木质纤维素碱性氧化预处理液中分离木质素联产低聚木糖的方法，该方法包括以下步骤：

(1)采用离心的方法对木质纤维素碱性氧化预处理液进行固液分离，得到上清液1；

(2)水不溶性木聚糖分离与低聚木糖生产：调节上清液1的pH至5～6，并真空旋转蒸发浓缩并固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH4～5缓冲液分散沉淀1并加入50～500IU/g内切木聚糖酶，在45～60℃，水解9～24h得到低聚木糖溶液1；

(3)木质素分离与低聚木糖生产：步骤(2)得到的上清液2继续调节pH至4～5，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH4～5缓冲液分散沉淀2并加入50～500IU/g内切木聚糖酶，45～60℃，水解9～24h，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1；

(4)步骤(3)得到的上清液3中加入50～500IU/mL内切木聚糖酶，在45～60℃，水解9～24h，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液3，用水洗涤沉淀3得到木质素2。

参见CN108588144A，将粉碎烘干后的木质纤维素类生物质置于玻璃反应器中，加入质量分数为0.5％～5％的碱液和质量分数为0.5％～5％的双氧水，控制固液质量比为1:10～35，反应温度为30℃～90℃，反应时间为1h～24h，反应结束后固液分离，并用水洗涤固体残渣至中性；固液分离后得到的液相和用水洗涤固体残渣得到的洗涤液的混合物统称为木质纤维素碱性氧化预处理液。

优选地，所述木质纤维素碱性氧化预处理液来自甘蔗渣、小麦秸秆、玉米秸秆或玉米芯碱性氧化预处理液中的一种。

优选地，所述步骤(2)用酸调节上清液的pH为5～6。所述酸选自硫酸、盐酸、乙酸和柠檬酸中的任一种。

优选地，所述步骤(3)用酸调节上清液的的pH为4～5，所述的酸选自硫酸、盐酸、乙酸和柠檬酸中的任一种。

本发明与现有技术相比具有如下有益效果：

(1)本发明利用木质纤维素碱性氧化预处理液中的木质素、水不溶性木聚糖和水溶性木聚糖在不同pH溶液中溶解度差异，采用梯度调整预处理液pH和酶水解方式处理木质纤维素碱性氧化预处理废液，省去了有机溶剂消耗大、成本高的木质素和木聚糖分离纯化过程，具有处理成本低、工艺绿色环保等优点。

(2)本发明采用梯度调整预处理液pH和酶水解方式处理木质纤维素碱性氧化预处理废液，回收了木质素组分联产得到了低聚木糖，具有良好的工业化应用前景。

具体实施方式：

以下是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：

采用离心的方法对甘蔗渣碱性氧化预处理液进行固液分离，以除去固体杂质得到上清液1；用硫酸溶液调节上清液1pH至5，采用真空旋转蒸发对预处理液进行浓缩并进行固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH4缓冲液分散沉淀并加入50IU/g内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为24h条件下进行水解得到低聚木糖溶液。上清液2继续用酸调节pH4，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH4缓冲液分散沉淀2并加入50IU/g内切木聚糖酶在反应温度为45℃，反应时间为24h条件下进行水解，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1。在上清液3中加入500IU/mL内切木聚糖酶在反应温度为45℃，反应时间为24h条件下进行水解，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液3，用水洗涤沉淀3得到木质素2。本实施例制备得到的低聚木糖总得率为37.57％，木质素总得率为70％。

实施例2：

采用离心的方法对玉米秸秆碱性氧化预处理液进行固液分离，以除去固体杂质得到上清液1；用盐酸溶液调节上清液1pH至5.5，采用真空旋转蒸发对预处理液进行浓缩并进行固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH5缓冲液分散沉淀并加入500IU/g内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为9h条件下进行水解得到低聚木糖溶液。上清液2继续用酸调节pH4，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH5缓冲液分散沉淀2并加入500IU/g内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为9h条件下进行水解，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1。在上清液3中加入50IU/mL内切木聚糖酶在反应温度为45℃，反应时间为24h条件下进行水解，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液3，用水洗涤沉淀3得到木质素2。本实施例制备得到的低聚木糖总得率为35.26％，木质素总得率为65％。

实施例3：

采用离心的方法对小麦秸秆碱性氧化预处理液进行固液分离，以除去固体杂质得到上清液1；用乙酸溶液调节上清液1pH至6，采用真空旋转蒸发对预处理液进行浓缩并进行固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH5缓冲液分散沉淀并加入200IU/g内切木聚糖酶在反应温度为45℃，反应时间为24h条件下进行水解得到低聚木糖溶液。上清液2继续用酸调节pH5，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH5缓冲液分散沉淀2并加入400IU/g内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为24h条件下进行水解，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1。在上清液3中加入400IU/mL内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为9h条件下进行水解，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液3，用水洗涤沉淀3得到木质素2。本实施例制备得到的低聚木糖总得率为35.25％，木质素得率为70％。

实施例4：

采用离心的方法对玉米芯碱性氧化预处理液进行固液分离，以除去固体杂质得到上清液1；用柠檬酸溶液调节上清液1pH至5，采用真空旋转蒸发对预处理液进行浓缩并进行固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH5缓冲液分散沉淀并加入400IU/g内切木聚糖酶在反应温度为55℃，反应时间为12h条件下进行水解得到低聚木糖溶液。上清液2继续用酸调节pH4，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH5缓冲液分散沉淀2并加入400IU/g内切木聚糖酶在反应温度为50℃，反应时间为12h条件下进行水解，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1。在上清液3中加400IU/mL内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为9h条件下进行水解，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液1，用水洗涤沉淀3得到木质素2。本实施例制备得到的低聚木糖总得率为38.45％，木质素得率为75.22％。

实施例5：

采用离心的方法对甘蔗渣碱性氧化预处理液进行固液分离，以除去固体杂质得到上清液1；用硫酸溶液调节上清液1pH至6，采用真空旋转蒸发对预处理液进行浓缩并进行固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH5缓冲液分散沉淀并加入300IU/g内切木聚糖酶在反应温度为45℃，反应时间为24h条件下进行水解得到低聚木糖溶液。上清液2继续用酸调节pH5，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH4缓冲液分散沉淀2并加入300IU/g内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为18h条件下进行水解，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1。在上清液3中加入300IU/mL内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为9h条件下进行水解，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液1，用水洗涤沉淀3得到木质素2。本实施例制备得到的低聚木糖总得率为31.92％，木质素得率为58.44％。

实施例6：

采用离心的方法对小麦秸秆碱性氧化预处理液进行固液分离，以除去固体杂质得到上清液1；用硫酸溶液调节上清液1pH至5.5，采用真空旋转蒸发对预处理液进行浓缩并进行固液分离，得到沉淀1和上清液2，用pH5缓冲液分散沉淀并加入500IU/g内切木聚糖酶在反应温度为50℃，反应时间为9h条件下进行水解得到低聚木糖溶液。上清液2继续用酸调节pH4.5，经过固液分离得到沉淀2和上清液3，用pH5缓冲液分散沉淀2并加入500IU/g内切木聚糖酶在反应温度为50℃，反应时间为9h条件下进行水解，固液分离分别得到低聚木糖溶液2和木质素1。在上清液3中加入50IU/mL内切木聚糖酶在反应温度为60℃，反应时间为24h条件下进行水解，经过固液分离得到沉淀3和低聚木糖溶液1，用水洗涤沉淀3得到木质素2。本实施例制备得到的低聚木糖总得率为36.55％，木质素总得率为68.22％。

上列详细说明是针对本发明可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本案的专利保护范围中。

从木质纤维素碱性氧化预处理液中分离木质素联产低聚木糖的方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。