专利摘要

本发明公开一种异羟肟酸衍生物及其制备方法和应用，本发明的异羟肟酸衍生物的结构如式I所示，其中R1、m、n、X和R2的定义如说明书和权利要求书所述。本发明的异羟肟酸衍生物，能够抑制LpxC脱乙酰酶的活性，具有抑菌活性，尤其是能够抑制革兰氏阴性菌，特别适用于制备预防和/或治疗革兰氏阴性菌引起的相关疾病的药物。

权利要求

1.一种式I化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或药学上可接受的盐，

式中，R1为取代的C1-C6烷基，所述取代是指具有选自下组的取代基：羟基、氨基；

m为1；

n为1；

X为-O-；

R2为-SO2(C1-C3烷基)取代的C1-C6烷基。

2.如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于，式I化合物中各手性碳原子的构型独立地为R型或S型。

3.如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于，R1为羟基或氨基取代的C1-C4烷基。

4.如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于，R2为-SO2CH3取代的C1-C6烷基。

5.如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于，R2为-SO2CH3取代的C1-C4烷基。

6.如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于，所述式I化合物为：

或

7.如权利要求1所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(a)式I-1化合物与式I-2化合物缩合得到式I-3化合物；

(b)式I-3化合物与式I-4化合物反应得到式I-5化合物；

(c)式I-5化合物与羟胺反应得到式I化合物，

其中，X的定义如权利要求1所述，

各式中，R1为被保护或未被保护的、取代的C1-C6烷基，所述取代是指具有选自下组的取代基：羟基、氨基；

R2为被保护或未被保护的-SO2(C1-C3烷基)取代的C1-C6烷基；

Y为乙炔基或卤素；

且当R1为被保护的、取代的C1-C6烷基和/或R2为被保护的-SO2(C1-C3烷基)取代的C1-C6烷基时，所述方法还包括去除保护基的步骤，所述保护基选自：叔丁氧羰基、对甲氧基苄基、二苯甲基、苄基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、烯丙基、甲氧基甲基、甲硫基甲基、甲氧基乙氧基甲基、苄氧基甲基。

8.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含：

权利要求1所述的式I化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或药学上可接受的盐；以及

药学上可接受的载体。

9.如权利要求1所述的式I化合物或权利要求8所述的药物组合物的用途，其特征在于，用于：

(1)制备抑制LpxC脱乙酰酶的药物；

(2)制备预防和/或治疗细菌感染的药物；

(3)制备抑制细菌生长的药物。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述细菌感染是革兰氏阴性菌感染。

11.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述革兰氏阴性菌选自：大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。

12.一种体外非治疗目的的降低细菌致病性或毒性的方法，其特征在于，包括步骤：

将细菌与权利要求1所述的式I化合物或权利要求8所述的药物组合物进行接触，从而降低细菌致病性或毒性。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述细菌是革兰氏阴性菌。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述革兰氏阴性菌选自：大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。

15.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述的接触导致细菌中LpxC脱乙酰酶的含量增加或减少。

16.一种体外非治疗目的的抑制LpxC脱乙酰酶的方法，向所需要的对象或向环境中施用权利要求1所述的式I化合物或权利要求8所述的药物组合物。

17.一种体外非治疗目的的抗菌方法，向所需要的对象或向环境中施用权利要求1所述的式I化合物或权利要求8所述的药物组合物。

说明书

技术领域

本发明属于药物化合物领域。具体地，本发明涉及一类新型的异羟肟酸衍生物，或其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，及其药学上可接受的盐，以及上述化合物的制备方法和上述化合物作为生物活性物质用于制备药物的用途。

背景技术

伴随着抗菌药物的广泛使用，临床上出现了大量的耐药菌，细菌耐药性问题已成为威胁人类公共健康的重要问题。对于革兰氏阴性菌感染，特别是由大肠杆菌(E.coli)、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)和鲍曼不动杆菌(A.baumannii)引发的疾病，治疗药物十分有限。

革兰氏阴性菌细胞膜的外层由脂多糖(LPS)构成，可以作为一个渗透屏障防止抗生素进入细菌内部。生物学研究表明，脂多糖对细菌细胞生长至关重要，在膜蛋白的折叠过程中发挥着重要作用[The Journal of Biological Chemistry,274(8),1999,5114-5119]。每个脂多糖分子主要由三个主要部分组成:O-型抗原，核心多糖和类质A。其中类脂A是连接脂多糖与外膜的纽带，是维持细胞膜稳定的关键结构[J Lipid Res,46(5),2005,839-861]。类质A是在九种专一的高度保守的生物酶的催化下，在内膜的内表面上于细胞质中合成的。第一步是对UDP-葡萄糖脂肪酸酰基化，是一步可逆反应。第二步则是由LpxC[UDP-3-O-(R-3-羟基肉豆蔻酰基)-N-乙酰葡萄糖胺脱乙酰基酶]催化的脱乙酰基，是生物合成类脂A的速控步骤。如果能抑制LpxC脱乙酰酶的活性，可以阻断类脂A的合成，从而破坏细菌脂多糖的完整性，导致细菌死亡。

LpxC脱乙酰酶是一种锌离子蛋白酶，增加或减少其含量对细菌来说都是致命的，并且广泛存在于革兰氏阴性菌中，与哺乳动物的蛋白质成分没有共同的序列，不易产生副作用。这些优点使它成为了新型抗革兰氏阴性菌药物的重要靶点。

文献已报道了多种LpxC抑制剂[Current Medicinal Chemistry,2012,19,2038-2050]，大部分虽然体外抗菌活性较好，但因成药性差，很少有化合物进入临床研究。仅Achaogen公司的ACHN-975于2012年进入一期临床，但在2013年因注射给药时注射部位出现问题而终止了研究[Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 24(2014)3683–3689]。

发明内容

本发明的目的在于提供一种LpxC抑制剂。

本发明的第一方面，提供一种式I化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或药学上可接受的盐，

式中，R1为未取代或取代的C1-C6烷基，所述取代是指具有选自下组的取代基：羟基、氨基、卤素、硝基、氰基、巯基；

m为0～2的整数，为0、1或2；

n为0～1的整数；

X为-O-、-S-、-NH-、-NHCO-或-CONH-；

R2为取代的C1-C6烷基，所述取代是指具有选自下组的取代基：羟基、巯基、硝基、氰基、-SO2(卤代C1-C3烷基)、-SO2(C1-C3烷基)、-CONHOH、

条件是，式I化合物不为以下化合物：

4,4'-(1,3-丁二炔-1,4-二基)双[N-[(1S,2R)-2-羟基-1-[(羟基氨基)酰基]丙基]苯甲酰胺；

N-[(1S,2R)-2-羟基-1-[(羟基氨基)酰基]丙基]-N'-[(1R,2R)-2-羟基-1-[(羟基氨基)酰基]丙基]-[1,1'-联苯]-4,4'-二甲酰胺；

N-[(1S)-1-(氨基甲基)-2-(羟基氨基)-2-氧代乙基]-4-[2-[4-[2-(羟基氨基)-2-氧代乙氧基]苯基]乙炔基]-苯甲酰胺。

在另一优选例中，R1、m、n、X和R2的定义如前所述，条件是X为-CONH-或-NHCO-时，R2上具有两个取代基时，取代基不为羟基和-CONHOH；X为-O-时，R2上的取代基不为-CONHOH。

在另一优选例中，所述取代为单取代或多取代。在另一优选例中，所述取代为单取代、二取代、三取代或四取代。在另一优选例中，所述多取代、二取代、三取代或四取代指具有相同或不同的取代基。

在另一优选例中，C1-C6烷基上具有1、2、3或4个取代基。

在另一优选例中，式I化合物中各手性碳原子的构型独立地为R型或S型。

在另一优选例中，R1为羟基或氨基取代的C1-C4烷基。

在另一优选例中，R2为取代的C1-C6烷基，所述取代是指具有选自下组的取代基：羟基、-SO2CH3、-SO2CF3、-CONHOH、

在另一优选例中，R2为取代的C1-C4烷基，其中C1-C4烷基上的取代基选自：羟基、-SO2CH3、-SO2CF3、-CONHOH、

在另一优选例中，所述式I化合物为实施例中制备的化合物1-20中的任何一个。

在另一优选例中，所述药学上可接受的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、三氟乙酸盐、乙酸盐、草酸盐、丁二酸盐、苹果酸盐、甲苯磺酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、谷氨酸盐、葡糖醛酸盐、乳酸盐、戊二酸盐、精氨酸盐或马来酸盐。

本发明的第二方面，提供第一方面所述的式I化合物的制备方法，m为1或2；n为1时，所述方法包括以下步骤：

(a)式I-1化合物与式I-2化合物缩合得到式I-3化合物；

(b)式I-3化合物与式I-4化合物反应得到式I-5化合物；

(c)式I-5化合物与羟胺反应得到式I化合物，

各式中，X的定义如前所述，

m为0；n为0或1，X为-O-或-S-时，所述方法包括以下步骤：

(i)式II-1化合物与式II-2化合物缩合得到式II-3化合物，q为1或2；

(ii)式II-3化合物与R2OH反应得到式II-4化合物；

(iii)式II-4化合物与羟胺反应得到式I化合物，

各式中，R1为被保护或未被保护的、未取代或取代的C1-C6烷基；

R2为被保护或未被保护的取代的C1-C6烷基；

Y为乙炔基或卤素；

各所述取代独立地指被选自下组的基团取代：羟基、氨基、卤素、硝基、氰基、-SO2CH3、-CONHOH、

且当R1为被保护的、未取代或取代的C1-C6烷基和/或R2为被保护的取代的C1-C6烷基时，所述方法还包括去除保护基的步骤，所述保护基选自：叔丁氧羰基、对甲氧基苄基、二苯甲基、苄基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、烯丙基、甲氧基甲基、甲硫基甲基、甲氧基乙氧基甲基、苄氧基甲基。

在另一优选例中，R1为被保护的、未取代或取代的C1-C6烷基时，式II-4化合物脱除保护基团后与羟胺反应得到式I化合物。

在另一优选例中，R2为被保护的取代的C1-C6烷基时，式II-4化合物与羟胺反应后脱除保护基团得到式I化合物。

本发明的第三方面，提供一种药物组合物，包含：

第一方面所述的式I化合物，其对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物，或药学上可接受的盐；以及

药学上可接受的载体。

本发明的第四方面，提供第一方面所述的式I化合物或第三方面所述的药物组合物的用途，用于：

(1)制备抑制LpxC脱乙酰酶的药物；

(2)制备预防和/或治疗细菌感染的药物；

(3)制备抑制细菌生长的药物；

(4)LpxC脱乙酰酶抑制剂。

在另一优选例中，所述细菌是革兰氏阴性菌。

在另一优选例中，所述革兰氏阴性菌选自：大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。

本发明的第五方面，提供一种降低细菌致病性或毒性的方法，包括步骤：

将细菌与第一方面1所述的式I化合物或第三方面所述的药物组合物进行接触，从而降低细菌致病性或毒性。

在另一优选例中，所述细菌是革兰氏阴性菌。

在另一优选例中，所述革兰氏阴性菌选自：大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。

在另一优选例中，所述的方法是非治疗性的方法。

在另一优选例中，所述的方法是治疗性的方法。

在另一优选例中，所述的接触导致细菌中LpxC脱乙酰酶的含量增加或减少。

本发明的第六方面，提供一种抑制LpxC脱乙酰酶的方法，向所需要的对象或向环境中施用安全有效量的式I化合物或第三方面所述的药物组合物。

本发明的第七方面，提供一种抗菌方法，向所需要的对象或向环境中施用安全有效量的式I化合物或第三方面所述的药物组合物。

本发明的第八方面，提供一种用于治疗细菌感染的方法，包括以下步骤：向被细菌感染的对象施与安全有效量的的式I化合物或第三方面所述的药物组合物。

在另一优选例中，式I化合物或第三方面所述的药物组合物与细菌接触并作用一段时间，从而降低细菌的致病性和/或毒性。

本发明中，所述需要的对象包括人或非人哺乳动物，较佳地，为人、小鼠或大鼠。

本发明中，向所述对象施与的方式没有特别的限制，包括但不限于口服，注射，吸入，局部使用。

本发明中，“安全有效量”指的是：活性成分(式I化合物)的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。

本发明的异羟肟酸衍生物，能够抑制LpxC脱乙酰酶的活性，具有抑菌活性，尤其是能够抑制革兰氏阴性菌，特别适用于制备预防和/或治疗细菌尤其是革兰氏阴性菌引起的相关疾病的药物。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一赘述。

具体实施方式

本申请的发明人经过广泛而深入地研究，首次研发出一种结构新颖的LpxC脱乙酰酶抑制剂，为异羟肟酸衍生物。本发明的异羟肟酸衍生物，具有抑菌活性，尤其是能够抑制革兰氏阴性菌。在此基础上，完成了本发明。

异羟肟酸衍生物

本发明中，异羟肟酸衍生物、式I化合物、式I所示的化合物具有相同的含义，均是指具有如下结构的化合物：

其中，R1、m、n、X和R2的定义如前所述。

在本发明中，术语“C1-C6烷基”是指具有1至6个碳原子的直链或支链烷基，非限制性地包括甲基、乙基、丙基、异丙基和丁基等。本发明中，术语“卤素”是指氟、氯、溴、碘。

制备方法

本发明化合物可通过如下的方法制得，然而该方法的条件，例如反应物、溶剂、酸、碱、所用化合物的量、反应温度、反应时间等不限于以下的描述。还可以任选将在本说明书中描述的或本领域技术人员已知的各种合成方法的组合来方便地制得本发明的化合物，本发明所属领域的技术人员可以容易地进行上述组合。

路线一：m为1或2；n为1时，所述方法包括以下步骤：

路线二：m为0；n为0或1时，所述方法包括以下步骤：

各式中，X、R1、R2、Y、m、n的定义如前所述。

在一优选实施方式中，式I-1化合物在极性溶剂中与式I-2化合物在缩合剂和有机碱存在下，于室温条件下反应4-16小时，得到式I-3化合物。所述的缩合剂可以为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和1-羟基苯并三唑(HOBT)。所述的有机碱可以为三乙胺、二异丙基乙基胺；极性溶剂可以为二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺。

在一优选实施方式中，式I-3化合物与式I-4化合物(Y为乙炔基)在含金属铜催化剂的催化下，在碱性条件的混合溶剂中，在惰性气体保护下于室温至40℃条件下反应12-24小时，得到式I-4化合物。所述含金属铜催化剂可以为醋酸铜，碱性条件的混合溶剂可以为吡啶与甲醇的混合溶剂。

在一优选实施方式中，式I-3化合物与式I-4化合物(Y为卤素)在含金属钯催化剂的催化下，在碱性条件和极性非质子性溶剂中，在惰性气体保护下于室温至40℃条件下反应2-12小时，得到式I-5化合物。所述含金属钯催化剂可以是二(三苯基膦)二氯化钯和碘化亚铜。所述的碱性条件使用的碱可以为：三乙胺、二异丙基乙基胺，吡啶。所述极性非质子性溶剂可以是：1，4-二氧六环、二甲基甲酰胺、四氢呋喃。所述惰性气体可以是氮气或氩气。

在一优选实施方式中，式II-1化合物在极性溶剂中与式II-2化合物在缩合剂和有机碱存在下，于室温条件下反应4-16小时，得到式II-3化合物。所述的缩合剂可以为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和1-羟基苯并三唑(HOBT)。所述的有机碱可以为三乙胺、二异丙基乙基胺；极性溶剂可以为二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺。

在一优选实施方式中，式II-3化合物在极性溶剂中与R2OH在偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、三苯基膦的存在下，于室温条件下反应0.5-2小时，得到式II-4化合物。极性溶剂可以为四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺。

在一优选实施方式中，式I-5化合物或式II-4化合物和羟胺水溶液(如50％)在极性溶剂中，于室温至40℃反应3-18小时，得到式I化合物。所述的极性溶剂可以为甲醇与二氯甲烷的混合溶液。在一优选实施方式中，部分化合物不存在脱保护过程，羟胺取代甲酯后直接为终产物。

在一优选实施方式中，R2具有保护基团的式I-5化合物或R2具有保护基团的式II-4化合物与羟胺反应后的产物在酸性溶剂中，于室温反应3-12小时，脱除保护基，得到式I化合物。所述酸性溶剂可以为三氟乙酸与二氯甲烷的混合溶液。

在一优选实施方式中，R1具有保护基团(如叔丁氧羰基)的式I-5化合物或R1具有保护基团(如叔丁氧羰基)的式II-4化合物在酸性溶剂中脱除保护后，再与羟胺水溶液(如50％)在极性溶剂中，于室温至40℃反应3-18小时，得到式I化合物。所述酸性溶剂可以为氯化氢的1,4-二氧六环溶液或乙酸乙酯溶液。所述的极性溶剂可以为甲醇与二氯甲烷的混合溶液。

药物组合物

本发明的式I化合物，能够抑制LpxC脱乙酰酶的活性，具有抑菌活性，尤其是能够抑制革兰氏阴性菌。

本发明提供的药物组合物，包含式I化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分；以及药学上可接受的载体。

通常，药物组合物含有1-2000mg活性成分/剂，更佳地，含有10-200mg活性成分/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个药片。

“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分以及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温 )、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

本发明的活性成分或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)等。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。

在这些固体剂型中，活性成分与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

所述的固体剂型还可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性成分外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性成分外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

本发明化合物可以单独给药，或者与其他治疗药物联合给药。

使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明式I化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选20～500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的有益之处在于：

(1)本发明提供了具有新型结构的异羟肟酸衍生物。

(2)本发明提供了异羟肟酸衍生物的制备方法，工艺简单高效。

(3)本发明首次发现了异羟肟酸衍生物的新用途，可以用于制备抗菌药物，特别是用于制备抑制革兰氏阴性菌的药物。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

所有实施例中，1H-NMR用Varian Mercury 300或AVANCEIII 400核磁共振仪记录，化学位移以δ(ppm)表示；分离用硅胶，未说明均为200-300目，洗脱液的配比均为体积比。

制备实施例

实施例1：N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺基)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)1,3-丁二炔基-)苯胺(化合物1)的制备

(a)1-碘-4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯

氩气保护下，将3-甲砜基丙醇(200mg，1.447mmol)和4-碘苯酚(382mg，1.737mmol)溶于10ml无水的四氢呋喃中，0℃搅拌下依次加入三苯基膦(569mg，2.171mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(378mg，2.171mmol)，反应1h，TLC(PE/EA＝2/1)检测原料反应完毕，旋干溶液，柱层析(PE/EA＝5/1-2/1)，得到白色固体400mg，收率81.3％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.56(d,J＝9.1Hz,2H),6.66(d,J＝9.0Hz,2H),4.08(t,J＝5.8Hz,2H),3.28-3.18(m,2H),2.95(s,3H),2.40–2.28(m,2H).

MS(ESI)m/z:[(M+Na)+,263.0].

(b)三甲基((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)硅烷

氩气保护下，将上述(a)制备的化合物1-碘-4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯(400mg，1.176mmol)和三甲硅基乙炔(173mg，1.765mmol)溶于10ml无水的四氢呋喃中，加入Ph(PPh3)2Cl2(42mg，0.059mmol)和CuI(12mg，0.059mmol)，Et3N(238mg，2.352mmol)，室温搅拌12h。TLC(PE/EA＝2/1)检测原料消失，将溶剂旋干，用乙酸乙酯重新溶解后，再依次用饱和氯化铵水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(PE/EA＝5/1-2/1)，得黄色固体330mg，收率90.5％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.40(d,J＝8.7Hz,2H),6.80(d,J＝8.8Hz,2H),4.11(t,J＝5.8Hz,2H),3.31-3.16(m,2H),2.95(s,3H),2.35(dq,J＝11.4,6.0Hz,2H),0.23(s,9H).

MS(ESI)m/z:[(M+Cl)-,344.8].

(c)1-乙炔基-4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯

将上述(b)制备的化合物三甲基((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)硅烷(330mg，1.063mmol)溶于10ml无水四氢呋喃中，冷却至0℃，缓慢加入四正丁基氟化胺(1M,1.3ml)，升至室温，反应1h，TLC(PE/EA＝2/1)监测反应，待反应完成后，加入10ml水和30ml乙酸乙酯，分液取乙酸乙酯层，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(PE/EA＝5/1-2/1)，得白色固体228mg，收率90.0％。

1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43(d,J＝8.9Hz,2H),6.82(d,J＝8.9Hz,2H),4.12(t,J＝5.8Hz,2H),3.25(dd,J＝8.7,6.7Hz,2H),3.01(s,1H),2.96(s,3H),2.36(ddt,J＝11.6,7.6,5.7Hz,2H).MS(ESI)m/z:[(M+Na)+,263.0].

MS(ESI)m/z:[(M+Na)+,261.1].

(d)(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)-1,3-丁二炔-1-基)苯甲酰氨基)丁酸甲酯

将上述(c)制备的化合物1-乙炔基-4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯(228mg，0.957mmol)与(2S,3R)-2-(4-乙炔基苯甲酰氨基)-3-羟基丁酸甲酯[Bioorganic&MedicinalChemistry 19(2011)852–860](500mg，1.914mmol)，溶于8ml无水甲醇与8ml吡啶的混合溶剂中，氩气保护下加入醋酸铜(348mg，1.914mmol)，室温搅拌，反应24h，TLC(PE/EA＝2/1)监测反应，待反应完成后，加入40ml乙酸乙酯溶解，用稀盐酸(1M)洗去溶剂中的吡啶，再用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(PE/EA＝5/1-2/1)，得白色固体195mg，收率40.1％。

1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.62(d,J＝8.4Hz,2H),7.51(d,J＝8.8Hz,2H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.87(d,J＝8.8Hz,2H),4.84(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),4.50(s,1H),4.16(t,J＝5.8Hz,2H),3.83(s,3H),3.38–3.22(m,2H),2.99(s,3H),2.39(dt,J＝15.5,5.9Hz,2H),1.32(d,J＝6.4Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+Na)+,520.1].

(e)N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺基)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)1,3-丁二炔基-)苯胺

将上述(d)制备的化合物(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)-1,3-丁二炔-1-基)苯甲酰氨基)丁酸甲酯(195mg，0.392mmol)溶于5ml二氯甲烷与10ml甲醇的混合溶液中，0℃下滴加50％的羟胺水溶液(1ml)，室温搅拌12h，TLC(CH2Cl2/MeOH＝20/1)检测原料消失。将溶液旋干，二氯甲烷打浆三次得纯品，为类白色固体98mg，收率50.1％。

1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.70(s,1H),8.88(s,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.71(d,J＝8.4Hz,2H),7.59(d,J＝8.8Hz,2H),7.02(d,J＝8.8Hz,2H),4.91(d,J＝6.4Hz,1H),4.25(dd,J＝8.4,5.6Hz,1H),4.15(t,J＝6.3Hz,2H),4.08–3.97(m,1H),3.31–3.26(m,2H),3.03(s,3H),2.20–2.11(m,2H),1.09(d,J＝6.3Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M-H)-,497.0].

实施例2：N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(((S)-3羟基-1-(羟胺)-1-丙氧基-2-基)氨基甲酰)苯基)-1,3-丁二炔-1-基)苯甲酰胺(化合物2)的制备

(a)(S)-3-羟基-2-氨基-丙酸甲酯盐酸盐

将L-苏氨酸(1.0g，9.443mmol)悬浮于20ml甲醇中，0℃下加入二氯亚砜(1.3g，10.86mmol)，室温搅拌24h，旋干得胶状物1.47g，收率100％。

1H NMR(400MHz,Deuterium Oxide)δ4.17(t,J＝3.7Hz,1H),4.00(dd,J＝12.6,4.2Hz,1H),3.89(dd,J＝12.3,3.2Hz,1H),3.75(s,3H).

(b)(S)-2-(4-乙炔基苯甲酰基)-3-羟基丁酸甲酯

将上述(a)制备的化合物(S)-3-羟基-2-氨基-丙酸甲酯盐酸盐(256mg，1.642mmol)与4-乙炔基苯甲酸(200mg，1.369mmol)溶于10ml N,N-二甲基甲酰胺中，氩气保护，0℃下依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(315mg，1.642mmol)、1-羟基苯并三唑(222mg，1.642mmol)、二异丙基乙基胺(708mg，5.476mmol)。室温搅拌20h，TLC检测反应完毕(CH2Cl2/MeOH＝20/1)，加入40ml乙酸乙酯，再依次用饱和氯化铵水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(CH2Cl2/MeOH＝100/1-80/1)，得黄色固体165mg，收率44.0％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.82(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(d,J＝7.2Hz,1H),4.89(dt,J＝7.1,3.3Hz,1H),4.10(qd,J＝11.3,5.5Hz,2H),3.85(s,3H),3.24(s,1H),2.63(t,J＝5.8Hz,1H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,248.0].

(c)(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(((S)-3-羟基-1-甲氧基-1-丙氧基-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1,3-丁二炔-1-基)苯甲酰氨基)丁酸甲酯

将上述(b)制备的化合物(S)-2-(4-乙炔基苯甲酰基)-3-羟基丁酸甲酯(160mg，0.647mmol)与(2S,3R)-2-(4-乙炔基苯甲酰氨基)-3-羟基丁酸甲酯(254mg，0.971mmol)，溶于8ml无水甲醇与8ml吡啶的混合溶剂中，氩气保护下加入醋酸铜(348mg，1.914mmol)，室温搅拌，反应24h，TLC(CH2Cl2/MeOH＝20/1)监测反应，待反应完成后，加入40ml乙酸乙酯溶解，用稀盐酸(1M)洗去溶剂中的吡啶，再用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(CH2Cl2/MeOH＝80/1-20/1)，得白色固体110mg，收率33.6％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(d,J＝7.4Hz,1H),8.47(d,J＝8.2Hz,1H),7.96(d,J＝8.0Hz,4H),7.76(d,J＝7.4Hz,4H),5.08(t,J＝6.2Hz,1H),4.99(d,J＝7.3Hz,1H),4.58–4.48(m,2H),4.19(h,J＝6.8Hz,1H),3.80(t,J＝5.8Hz,2H),3.67(s,3H),3.66(s,3H),1.15(d,J＝6.4Hz,3H).

MS(EI)m/z:(M+,506).

(d)N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-丙氧基-2-基)-4-((4-(((S)-3羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)氨基甲酰)苯基)-1,3-丁二炔-1-基)苯甲酰胺

将上述(c)制备的化合物(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(((S)-3-羟基-1-甲氧基-1-含氧丁烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1,3-丁二炔-1-基)苯甲酰氨基)丁酸甲酯(110mg，0.216mmol)溶于5ml二氯甲烷与10ml甲醇的混合溶液中，0℃下滴加50％的羟胺水溶液(1ml)，室温搅拌12h，TLC(CH2Cl2/MeOH＝20/1)检测原料消失。将溶液旋干，二氯甲烷打浆三次得纯品，为类白色固体100mg，收率91.0％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.72(s,1H),10.71(s,1H),8.89(s,1H),8.87(s,1H),8.49(d,J＝7.9Hz,1H),8.24(d,J＝8.4Hz,1H),8.02–7.91(m,4H),7.81–7.70(m,4H),4.99(t,J＝5.8Hz,1H),4.91(d,J＝6.3Hz,1H),4.42(q,J＝6.6Hz,1H),4.26(dd,J＝8.4,5.6Hz,1H),4.09–3.97(m,1H),3.69(hept,J＝5.3Hz,2H),1.10(d,J＝6.3Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,508.9].

实施例3：4,4'-(1,2-乙炔基)二(N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)苯甲酰胺)(化合物3)的制备

(a)(2S,3R)-3-羟基-2-(4-碘代苯甲酰基)丁酸甲酯

将苏氨酸甲酯的盐酸盐(168mg，0.991mmol)与4-碘苯甲酸(205mg，0.826mmol)溶于10ml N,N-二甲基甲酰胺中，氩气保护，0℃下依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(190mg，0.991mmol)、1-羟基苯并三唑(134mg，0.991mmol)、二异丙基乙基胺(427mg，3.304mmol)。室温搅拌20h，TLC检测反应完毕(CH2Cl2/MeOH＝20/1)，加入40ml乙酸乙酯，再依次用饱和氯化铵水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(CH2Cl2/MeOH＝100/1-80/1)，得黄色固体140mg，收率38.9％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(d,J＝8.5Hz,2H),6.88(d,J＝8.8Hz,2H),4.80(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.47(ddd,J＝6.7,4.5,2.4Hz,1H),3.81(s,3H),2.14(d,J＝4.7Hz,1H),1.29(d,J＝6.4Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,386.0].

(b)(2S,2'S,3R,3'R)-2,2'-((4,4'-(1,2-乙炔基)二(苯甲酰))二(3-羟基丁酸甲酯)

将上述(a)制备的化合物(2S,3R)-3-羟基-2-(4-碘代苯甲酰基)丁酸甲酯(140mg，0.386mmol)和(2S,3R)-2-(4-乙炔基苯甲酰氨基)-3-羟基丁酸甲酯(121mg，0.463mmol)溶于15ml无水的四氢呋喃溶液中，在氩气保护下，依次加入三乙胺(78mg，0.772mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(14mg，0.019mmol)和碘化亚铜(4mg，0.019mmol)，40℃条件下反应12h，TLC检测反应完毕(CH2Cl2/MeOH＝20/1)，加入40ml乙酸乙酯，再依次用饱和氯化铵水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤除无水硫酸钠，再将溶液旋干柱层析(CH2Cl2/MeOH＝100/1-80/1)，得黄色固体90mg，收率47.0％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(d,J＝8.1Hz,2H),7.98(d,J＝8.1Hz,4H),7.73(d,J＝8.1Hz,4H),4.99(d,J＝7.5Hz,2H),4.52(dd,J＝8.2,4.2Hz,2H),4.20(td,J＝6.9,4.4Hz,2H),3.67(s,6H),1.14(s,3H)1.18(s,3H).

MS(EI)m/z:(M+,496).

(c)4,4'-(1,2-乙炔基)二(N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)苯甲酰胺)

将上述(b)制备的化合物(2S,2'S,3R,3'R)-2,2'-((4,4'-(1,2-乙炔基)二(苯甲酰))二(3-羟基丁酸甲酯)(90mg，0.216mmol)溶于5ml二氯甲烷与10ml甲醇的混合溶液中，0℃下滴加50％的羟胺水溶液(1ml)，室温搅拌12h，TLC(CH2Cl2/MeOH＝20/1)检测原料消失。将溶液旋干，二氯甲烷打浆三次得纯品，为类白色固体80mg，收率88.5％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.69(s,2H),8.87(s,2H),8.19(d,J＝8.5Hz,2H),7.97(d,J＝8.0Hz,4H),7.70(d,J＝8.0Hz,4H),4.92(d,J＝6.3Hz,2H),4.27(dd,J＝8.4,5.5Hz,2H),4.03(q,J＝6.0Hz,2H),1.10(d,J＝6.3Hz,6H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,521.1].

实施例4：N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺(化合物4)的制备

(a)(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰基)丁酸甲酯

以化合物1-碘-4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯(实施例1步骤(a)的产物)(237mg，0.498mmol)、(2S,3R)-2-(4-乙炔基苯甲酰氨基)-3-羟基丁酸甲酯(130mg，0.696mmol)、三乙胺(126mg，1.245mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(17mg，0.025mmol)和碘化亚铜(5mg，0.025mmol)，无水四氢呋喃作为溶剂，按照实施例3中(b)所述方法，得黄色固体200mg，收率84.9％。

1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(d,J＝8.6Hz,2H),7.58(d,J＝8.6Hz,2H),7.49(d,J＝8.9Hz,2H),6.94–6.80(m,3H),4.83(d,J＝11.1Hz,1H),4.56–4.41(m,1H),4.15(t,J＝5.8Hz,2H),3.80(s,3H),3.27(dd,J＝9.2,6.1Hz,2H),2.97(s,3H),2.42–2.33(m,2H),2.10(d,J＝4.4Hz,1H),1.31(d,J＝6.4Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,496.2].

(b)N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺

以上述(a)制备的化合物(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰基)丁酸甲酯(80mg，0.169mmol)为原料，二氯甲烷与甲醇为溶剂，按照实施例1中(e)所述的方法，得白色固体30mg，收率37.4％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.70(s,1H),8.88(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.63(d,J＝8.4Hz,2H),7.54(d,J＝8.7Hz,2H),7.02(d,J＝8.8Hz,2H),4.92(d,J＝6.4Hz,1H),4.26(dd,J＝8.5,5.5Hz,1H),4.14(t,J＝6.2Hz,2H),4.03(q,J＝6.2Hz,1H),3.33–3.26(m,2H),3.03(s,3H),2.21–2.11(m,2H),1.10(d,J＝6.3Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,475.0].

实施例5：N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺(化合物5)的制备

(a)1-碘-4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯

以化合物3-甲砜基乙醇(200mg，1.610mmol)和4-碘苯酚(425mg，1.932mmol)、三苯基膦(633mg，2.415mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(420mg，2.415mmol)为原料，以无水的四氢呋喃为溶剂，按照实施例1中(a)所述的方法，得到白色固体411mg，收率78.3％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.60(d,J＝9.0Hz,2H),6.69(d,J＝9.0Hz,2H),4.41(t,2H),3.44(t,J＝5.3Hz,2H),3.05(s,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+Cl)-,360.5].

(b)(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰基)丁酸甲酯

以上述(a)制备的化合物1-碘-4-(3-(甲砜基)乙氧基)苯(411mg，0.984mmol)、(2S,3R)-2-(4-乙炔基苯甲酰氨基)-3-羟基丁酸甲酯(280mg，1.073mmol)、三乙胺(298mg，2.952mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(35mg，0.049mmol)和碘化亚铜(10mg，0.049mmol)，无水四氢呋喃作为溶剂，按照实施例3中(b)所述方法，得黄色固体328mg，收率72.5％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.85(d,J＝8.3Hz,2H),7.61(d,J＝8.2Hz,2H),7.54(d,J＝8.7Hz,2H),6.93(d,J＝8.8Hz,2H),4.86(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),4.65–4.36(m,3H),3.84(s,3H),3.49(t,J＝5.3Hz,2H),3.11(s,1H),1.33(d,J＝6.4Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,459.9].

(c)N-((2S,3R)-3-羟基-1-(羟胺)-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺

以上述(b)制备的化合物(2S,3R)-3-羟基-2-(4-((4-(3-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰基)丁酸甲酯(100mg，0.217mmol)为原料，二氯甲烷与甲醇为溶剂，按照实施例1中(e)所述的方法，得白色固体30mg，收率30.0％。

1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.69(s,1H),8.87(s,1H),8.15(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.63(d,J＝8.4Hz,2H),7.55(d,J＝8.8Hz,2H),7.07(d,J＝8.9Hz,2H),4.92(d,J＝6.4Hz,1H),4.40(t,J＝5.7Hz,2H),4.26(dd,J＝8.4,5.6Hz,1H),4.03(dd,J＝12.2,6.1Hz,1H),3.65(t,J＝5.6Hz,2H),3.09(s,3H),1.09(d,J＝6.3Hz,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,460.8].

实施例6：(S)-N-(3-氨基-1-(羟胺)-3-甲基-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺(化合物6)的制备

(a)(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯

以化合物1-碘-4-(3-(甲砜基)乙氧基)苯(实施例5步骤(a)的产物)(209mg，0.641mmol)、(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(4-乙炔基苯甲酰胺)-3-甲基丁酸甲酯(WO2013170030A1)(200mg，0.534mmol)、三乙胺(162mg，1.602mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(37mg，0.053mmol)和碘化亚铜(10mg，0.053mmol)，无水四氢呋喃作为溶剂，按照实施例3中(b)所述方法，得黄色固体280mg，收率91.6％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.13(s,1H),7.98–7.87(m,2H),7.65–7.55(m,2H),7.54–7.47(m,2H),6.90(d,J＝8.8Hz,2H),4.74(d,J＝8.0Hz,1H),4.70(s,1H),4.48(dd,J＝5.8,4.9Hz,2H),3.75(s,3H),3.49–3.42(m,2H),3.08(d,J＝0.8Hz,3H),1.53(s,3H),1.49(s,3H),1.46(s,9H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,572.7].

(b)(S)-3-氨基-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯

将上述(a)制备的化合物(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯(280mg，0.489mmol)溶于10ml的1,4-二氧六环溶液中，滴加5ml的1，4-二氧六环氯化氢溶液，室温搅拌5h，TLC(PE/EA＝2/1)检测反应完毕，旋干溶剂后加入40ml乙酸乙酯溶解，饱和碳酸氢钠水溶液洗去残余的酸，再用饱和氯化钠水溶液洗，乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥。过滤旋干得固体185mg，收率80.1％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),7.91(d,J＝8.1Hz,2H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.07(d,J＝8.5Hz,2H),4.42(s,1H),4.40(d,J＝5.2Hz,2H),3.66(s,3H),3.64(d,2H),3.09(s,3H),1.15(s,3H),1.13(s,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,473.1]

(c)(S)-N-(3-氨基-1-(羟胺)-3-甲基-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺

以上述(b)制备的化合物(S)-3-氨基-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)乙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯(185mg，0.391mmol)为原料，二氯甲烷与甲醇为溶剂，按照实施例1中(e)所述的方法，得白色固体60mg，收率32.4％。

1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),9.26(s,1H),8.63(d,J＝9.3Hz,1H),7.99(d,J＝8.2Hz,2H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(d,J＝8.7Hz,2H),7.07(d,J＝8.8Hz,2H),4.70(d,J＝9.3Hz,1H),4.40(t,J＝5.6Hz,2H),3.65(s,2H),3.09(s,3H),1.35(s,3H),1.31(s,3H).

MS(ESI)m/z:[(M+H)+,474.1]

实施例7：(S)-N-(3-氨基-1-(羟胺)-3-甲基-1-含氧丁烷-2-基)-4-((4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺(化合物7)的制备

(a)(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯

以1-碘-4-(3-(甲砜基)丙氧基)苯(实施例5步骤(a)的产物)(218mg，0.641mmol)、(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(4-乙炔基苯甲酰胺)-3-甲基丁酸甲酯(200mg，0.534mmol)、三乙胺(162mg，1.602mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(37mg，0.053mmol)和碘化亚铜(10mg，0.053mmol)，无水四氢呋喃作为溶剂，按照实施例3中(b)所述方法，得黄色固体260mg，收率82.9％。

1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.13(s,1H),7.94(d,J＝8.1Hz,2H),7.61(d,J＝8.1Hz,2H),7.51(d,J＝8.4Hz,2H),6.89(d,J＝8.4Hz,2H),4.82–4.67(m,2H),4.17(t,J＝5.8Hz,2H),3.77(s,3H),3.42–3.15(m,2H),2.99(s,3H),2.44–2.34(m,2H),1.55(s,3H),1.51(s,3H),1.48(s,9H).

MS(ESI)m/z:[(M+Na)+,609.2].

(b)(S)-3-氨基-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯

将上述(a)制备的(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基-2-(4-((4-(2-(甲砜基)丙氧基)苯基)乙炔基)苯甲酰胺)丁酸甲酯(260mg，0.443mmol)溶于10ml的1,4-二氧六环溶液中，滴加5ml的1，4-二氧六环氯化氢溶液，室温搅拌5h，TLC(PE/EA＝2/1)检测反应完毕，旋干溶剂后加入40ml乙酸乙酯溶解，饱和碳酸氢钠水溶液洗去残余的酸，再用饱和氯化钠水溶液洗，乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥。过滤旋干得固体170mg，收率78.9％。

1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.54(s,1H),7.93(d,J＝

异羟肟酸衍生物及其制备方法和应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。