专利摘要
本发明涉及中药提取技术领域，具体而言，涉及一种桦木酸的提取方法。本发明中桦木酸的提取方法，包括以下步骤：将梧桐树科树皮与水的混合物进行超声波处理，采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，将得到的浸提液依次进行过滤、浓缩和干燥处理；所述梧桐树科树皮与水的混合物中，所述水的温度为10～30℃；所述复合溶剂包括有机溶剂和水；所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮中至少一种；所述复合溶剂中水的体积百分比为10％～20％。本发明通过将梧桐树科树皮与特定温度的水混合进行超声波处理，再利用特定的复合溶剂进行浸提，得到的桦木酸具有更高的产率和纯度。
权利要求
1.一种桦木酸的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
将梧桐树科树皮与水的混合物进行超声波处理，采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，将得到的浸提液依次进行过滤、浓缩和干燥处理；
所述梧桐树科树皮与水的混合物中，所述水的温度为10～30℃；
所述复合溶剂包括有机溶剂和水；
所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮中至少一种；
所述复合溶剂中水的体积百分比为10％～20％。
2.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，将梧桐树科树皮与水的混合物进行超声波处理的步骤具体为：将水加入梧桐树科树皮中，每24h加入所述水的次数为1～3次，每次的加水量为10～15mL/g梧桐树科树皮；
优选地，每24h加入所述水的次数为3次，每次的加水量为12mL/g梧桐树科树皮。
3.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮中至少两种。
4.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮；
所述甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为(3～5):(2～4)：(1～2)：1。
5.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述超声波的功率为1100-3500W，频率为20-40kHz，所述超声波每24h处理的次数为1～3次，每次处理的时间为4～8min。
6.根据权利要求5所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述超声波的功率为1600-3000W，频率为30-40kHz，所述超声波每24h处理的次数为3次，每次处理的时间为7min。
7.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为1～2.5mL。
8.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述浸提的温度为21～26℃；
优选地，所述浸提的次数为1～4次，每次浸提的时间为10～30h。
9.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述浓缩包括减压浓缩，所述减压浓缩温度为25～50℃，压力为280～450KPa。
10.根据权利要求1所述的桦木酸的提取方法，其特征在于，所述干燥的温度为5～45℃，压力为3.5～9mmHg。
说明书
技术领域
本发明涉及中药提取技术领域，具体而言，涉及一种桦木酸的提取方法。
背景技术
桦木酸可以从蒲桃树叶、白桦树皮、酸枣仁中提取，也可以用白桦脂醇为原料通过化学合成得到。经研究发现，白桦脂酸可以选择性地杀死人类黑色素瘤细胞而不杀伤健康细胞；白桦脂酸对HIV-1型感染有抑制作用，另外近期的研究表明白桦脂酸对脑瘤、神经外胚层瘤、白血病等恶性肿瘤细胞也有抑制作用。
目前，桦木酸从天然植物中提取分离得到的方式具有如下缺点：需消耗大量溶剂，得率低，杂质不易分离，纯度低等问题。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
根据本发明的一个方面，本发明涉及一种桦木酸的提取方法，包括以下步骤：
将梧桐树科树皮与水的混合物进行超声波处理，采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，将得到的浸提液依次进行过滤、浓缩和干燥处理；
所述梧桐树科树皮与水的混合物中，所述水的温度为10～30℃；
所述复合溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮中至少两种的混合液；
所述复合溶剂中水的体积百分比为5％～10％。
本发明通过将梧桐树科树皮与特定温度的水混合进行超声波处理，再利用特定的复合溶剂进行抽提，得到的桦木酸具有更高的产率和纯度。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明通过将梧桐树科树皮与特定温度的水混合进行超声波处理，再利用特定的复合溶剂进行抽提，得到的桦木酸具有更高的产率和纯度，纯度高于96.9％，产率高于6.11％(相对于绝干树皮的质量百分比)，相对于树皮中的桦木酸的量已经接近100％。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
根据本发明的一个方面，本发明涉及一种桦木酸的提取方法，包括以下步骤：
将梧桐树科树皮与水的混合物进行超声波处理，采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，将得到的浸提液依次进行过滤、浓缩和干燥处理；
所述梧桐树科树皮与水的混合物中，所述水的温度为10～30℃；
所述复合溶剂包括有机溶剂和水；
所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮中至少一种；
所述复合溶剂中水的体积百分比为10％～20％。
本发明中所述的梧桐树科包括法国梧桐(Platanus Orientalis)、美国梧桐(Platanus occidentalis)、英国梧桐(Platanus acerifolia)。
本发明所使用的梧桐树科树皮的长度为2～5cm，厚度2～6mm。
优选地，所使用的梧桐树科树皮的长度为3～4cm，厚度2～4mm。
热水抽提在工业处理上能耗高，尤其是在冬季室外温度比较低的情况下。冷水(温度为10～30℃)加超声处理，在短时间内能实现对被抽提的梧桐树科树皮的植物细胞壁变输送的作用，为复合溶剂抽提提高效率做了最简单有效的预处理。
超声处理有两个作用：一个作用是促进树皮中水溶性其他抽提物的溶出，考虑工业规模产生时，冷水比热水能耗低，超声虽然也耗能，但加短时间超声处理，时效性高，能够替代热水煮沸所起的预处理作用；第二个作用是通过超声处理，树皮细胞壁结构变松散了，孔隙变大了，更有利于后面用溶剂处理时溶剂的渗透、提高桦木酸整体的抽提效率。
本发明通过将梧桐树科树皮与特定温度的水混合进行超声波处理，再利用特定的复合溶剂进行抽提，得到的桦木酸具有更高的产率和纯度。
在一种实施方式中，所述水的温度为10～30℃，还可以选择11℃、12℃、13℃、14℃、15℃、16℃、17℃、18℃、19℃、20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃或29℃。
在一种实施方式中，所述复合溶剂中水的体积百分比为10％～20％，还可以选择11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％或19％。
更优选地，所述复合溶剂中水的体积百分比为13～18％。
更优选地，所述复合溶剂中水的体积百分比为15％。
优选地，将梧桐树科树皮与水的混合物进行超声波处理的步骤具体为：将水加入梧桐树科树皮中，
每24h加入所述水的次数为1～3次，每次的加水量为10～15mL/g梧桐树科树皮；
优选地，每24h加入所述水的次数为3次，每次的加水量为12mL/g梧桐树科树皮。
本发明采用特定用量的水浸泡梧桐树科树皮，即每24h加入所述水的次数为1～3次，每克所述梧桐树科树皮的加水量为10～15mL，在超声波作用下，更有利于树皮细胞壁结构变松散，孔隙变大，更有利于后面用溶剂处理时溶剂的渗透、提高桦木酸整体的抽提效率。
优选地，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮中至少两种。
优选地，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮；
所述甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为(3～5)：(2～4)：(1～2)：1。
更优选地，所述甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为(4)：(3)：(2)：1。
在一种实施方式中，所述甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为(3～5)：(2～4)：(1～2)：1，还可以选择3:2:1:1、3:4:2:1、5:2:1:1、5:4:2:1或4:3:2:1。
优选地，所述超声波的功率为1100-3500W，频率为20-40kHz，所述超声波每24h处理的次数为1～3次，每次处理的时间为4～8min。
在一种实施方式中，所述超声波的功率为1100-3500W，还可以选择1200W、1300W、1400W、1500W、1600W、1700W、1800W、1900W、2000W、2100W、2200W、2300W、2400W、2500W、2600W、2700W、2800W、2900W、3000W、3100W、3200W、3300W或3400W。
在一种实施方式中，所述超声波的频率为20-40kHz，还可以选择21kHz、22kHz、23kHz、24kHz、25kHz、26kHz、27kHz、28kHz、29kHz、30kHz、31kHz、32kHz、33kHz、34kHz、35kHz、36kHz、37kHz、38kHz、39kHz。
在一种实施方式中，所述超声波每24h处理的次数为1～3次，还可以选择2次。
在一种实施方式中，所述超声波每次处理的时间为4～8min，还可以选择4.5min、5min、5.5min、6min、6.5min、7min或7.5min。
超声波处理及浸泡处理时间对提取效率有很大的影响，若时间过长，树皮组织内的粘液质等会扩散出来，并附着于树皮的表面而阻碍溶剂的进入，从而影响提出效率。若时间过短，又不能达到很好的处理效果，本发明通过大量的实验得到适宜的超声波处理时间及浸泡时间。
本申请针对梧桐树科树皮及桦木酸的特点，采用特定的超声波频率及功率，更有利于提高后期桦木酸浸提的产率及纯度。
优选地，所述超声波的功率为1600-3000W，频率为30-40kHz，所述超声波每24h处理的次数为3次，每次处理的时间为7min。
本发明通过进一步优化超声波冷水处理条件，超声波的功率为1600-3000W，频率为30-40kHz，超声波每24h处理的次数为3次，每次处理的时间为7min，可进一步提高桦木酸浸提的产率及纯度。
优选地，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为1～2.5mL。
在一种实施方式中，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为1.1mL、1.2mL、1.3mL、1.4mL、1.5mL、1.6mL、1.7mL、1.8mL、1.9mL、2.0mL、2.1mL、2.2mL、2.3mL或2.4mL。
优选地，所述浸提的温度为21～26℃；
优选地，所述浸提的次数为1～4次，每次浸提的时间为10～30h。
在一种实施方式中，所述浸提的次数为1～4次，还可以选择2或3次。
在一种实施方式中，所述浸提的温度为21～26℃，还可以选择21.5℃、22℃、22.5℃、23℃、23.5℃、24℃、24.5℃、25℃或25.5℃。
在一种实施方式中，每次浸提的时间为10～30h，还可以选择11h、12h、13h、14h、15h、16h、17h、18h、19h、20h、21h、22h、23h、24h、25h、26h、27h、28h或29h。
优选地，所述浓缩包括减压浓缩，所述减压浓缩温度为25～50℃，压力为280～450KPa。
通过采用减压浓缩温度为25～50℃，压力为280～450Kpa，可保证在蒸发掉复合溶剂的同时，不破坏桦木酸，进一步提高纯度。
在一种实施方式中，所述减压浓缩温度为25～50℃，还可以选择26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃、46℃、47℃、48℃或49℃。
更优选地，所述减压浓缩温度为41～45℃，压力为360～400KPa。
通过进一步控制减压浓缩温度为41～45℃，压力为360～400Kpa可更有利于挥发掉复合溶剂。
优选地，所述干燥的温度为5～45℃，压力为3.5～9mmHg。
在一种实施方式中，所述干燥的温度为5～45℃，还可以选择6℃、8℃、10℃、12℃、15℃、18℃、21℃、25℃、28℃、31℃、35℃、37℃、39℃、41℃、43℃或44℃。
在一种实施方式中，所述干燥的压力为3.5～9mmHg，还可以选择4mmHg、4.5mmHg、5mmHg、5.5mmHg、6.5mmHg、7mmHg、7.5mmHg、8mmHg或8.5mmHg。
在一种优选的实施方式中，所述桦木酸的提取方法，包括以下步骤：
将水加入梧桐树科树皮中进行超声波处理，每24h加入所述水的次数为1～3次，每次的加水量为10～15mL/g梧桐树科树皮；采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，所述复合溶剂包括甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的混合溶液，所述复合溶剂中甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为(3～5)：(2～4)：(1～2)：1，所述复合溶剂中水的体积百分比为10％～20％，将浸提液依次进行过滤、浓缩和干燥处理；所述梧桐树科树皮与水的混合物中，所述水的温度为10～30℃；所述超声波的功率为1100-3500W，频率为20-40kHz，所述超声波每24h处理的次数为1～3次，每次处理的时间为4～8min；所述浸提的温度为21～26℃；所述浸提的次数为1～4次，每次浸提的时间为10～30h，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为1～2.5mL；所述浓缩包括减压浓缩，所述减压浓缩温度为25～50℃，压力为280～450Kpa；所述干燥的温度为5～45℃，压力为3.5～9mmHg。
本发明上述特定的提取方法进一步提高桦木酸的产率及纯度。
下面将结合具体的实施例和对比例对本发明作进一步的解释说明。
实施例1
一种桦木酸的提取方法，包括以下步骤：
将水加入500g梧桐树科树皮中进行超声波处理，每24h加入所述水的次数为3次，每次加水量为12mL/g梧桐树科树皮，水的温度为22℃，所述超声波的功率为2500W，频率为35kHz，所述超声波每24h处理的次数为3次，每次处理的时间为7min；采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为1～2.5mL，所述复合溶剂为甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的混合溶液，所述复合溶剂中甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为4：3：2：1，所述浸提的温度为23℃，所述浸提的次数为4次，每次浸提的时间为25h，所述复合溶剂中水的体积百分比为15％，再将浸提液进行过滤并收集滤液，进一步对滤液进行减压浓缩及干燥处理，减压浓缩温度为42℃，压力为400KPa，干燥的温度为28℃，压力为5mmHg。
实施例2
一种桦木酸的提取方法，包括以下步骤：
将水加入420g梧桐树科树皮中进行超声波处理，每24h加入所述水的次数为1次，每次加水量为10mL/g梧桐树科树皮，水的温度为10℃，所述超声波的功率为1100W，频率为40kHz，所述超声波每24h处理的次数为1次，每次处理的时间为8min；采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，所述复合溶剂为甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的混合溶液，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为2.5mL，所述复合溶剂中甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为4：4：1：1，所述浸提的温度为21℃，所述浸提的次数为3次，每次浸提的时间为10h，所述复合溶剂中水的体积百分比为10％，再将浸提液进行过滤并收集滤液，进一步对滤液进行减压浓缩及干燥处理，减压浓缩温度为25℃，压力为280Kpa，干燥的温度为5℃，压力为9mmHg。
实施例3
一种桦木酸的提取方法，包括以下步骤：
将水加入470g梧桐树科树皮中进行超声波处理，每24h加入所述水的次数为2次，每次加水量为15mL/g梧桐树科树皮，水的温度为30℃，所述超声波的功率为3500W，频率为20kHz，所述超声波每24h处理的次数为2次，每次处理的时间为4min；采用复合溶剂对超声波处理后的树皮进行浸提，所述复合溶剂为甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的混合溶液，每克所述树皮中加入所述复合溶剂的体积为1mL，所述复合溶剂中甲醇、乙醇、丁醇和丙酮的质量比为3：4：1：2，所述浸提的温度为26℃，所述浸提的次数为1次，每次浸提的时间为30h，所述复合溶剂中水的体积百分比为20％，再将浸提液进行过滤并收集滤液，进一步对滤液进行减压浓缩及干燥处理，减压浓缩温度为50℃，压力为450Kpa，干燥的温度为45℃，压力为3.5mmHg。
实施例4
一种桦木酸的提取方法，除有机溶剂为甲醇溶液以外，其他操作条件同实施例1。
实施例5
一种桦木酸的提取方法，除复合溶剂为甲醇和丙酮的混合溶液，质量比为4:1，其他操作步骤同实施例1。
实施例6
一种桦木酸的提取方法，除复合溶剂为甲醇，乙醇、丙酮的混合溶液，质量比为2：2：1之外，其他操作步骤同实施例1。
实施例7
一种桦木酸的提取方法，除所述超声波的功率为1200W，频率为38kHz，每次超声波处理的时间为8min，其他操作步骤同实施例1。
实施例8
一种桦木酸的提取方法，除所述超声波的功率为3400W，频率为22kHz，每次超声波处理的时间为5min，其他操作步骤同实施例1。
对比例1
一种桦木酸的提取方法，除所述超声波的功率为900W，频率为18kHz，每次处理的时间为2min以外，其他操作条件同实施例1。
对比例2
一种桦木酸的提取方法，除超声处理过程中水的温度为8℃，其他操作条件同实施例1。
对比例3
一种桦木酸的提取方法，除所述复合溶剂中水的体积百分比为1％，其他操作条件同实施例1。
对比例4
一种桦木酸的提取方法，梧桐树科树皮与实施例1取自同一棵树，采用专利申请号为CN201110083158.6(一种从梧桐树科树皮中提取桦木酸的方法)的实施例1的方法提取桦木酸。
实验例
将本发明和实施例和对比例得到的桦木酸进行产率计算及纯度检测，桦木酸产率结果如表1所示，桦木酸纯度检测如表2所示。
表1桦木酸的产率
表2桦木酸纯度
由表1和表2可知，本发明通过特定的提纯方法得到的得到的桦木酸具有更高的产率和纯度，纯度高于96.9％，产率高于6.11％(相对于绝干树皮的质量百分比)。
对比例1超声波处理条件不在本发明保护的范围内，对比例2超声波处理过程的温度不在本发明要保护的范围之内，对比例3中复合溶剂中水的体积百分比不在本发明要保护的范围之内，对比例1、对比例2、对比例3得到的桦木酸在纯度及产率方面均差于本申请特定的提纯方法得到的桦木酸。
对比例4为梧桐树科树皮与实施例1取自同一棵树，采用专利申请号为CN201110083158.6(一种从梧桐树科树皮中提取桦木酸的方法)的实施例1的方法提取桦木酸。桦木酸的产率为5.71％(相对于绝干树皮的质量百分比)，纯度为95.2％，远差于本申请定的提纯方法得到的桦木酸。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
一种桦木酸的提取方法专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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