专利摘要

本发明公开了一类基于8‑羟基喹啉衍生物和1‑苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物及其合成方法和应用。这类铱配合物的合成方法为：取1‑苯基吡唑铱二聚体和8‑羟基喹啉衍生物置于有机溶剂中，于加热或不加热条件下反应，得到相应的目标配合物。申请人的试验结果表明，本发明所述配合物对宫颈癌和卵巢癌细胞具有显著的生物活性(活性显著高于其配体和顺铂)，同时它们对人正常肝细胞毒性极小(IC50＞80μM)；另一方面，本发明所述配合物还能够在肿瘤细胞进行荧光定位，可以开发成荧光定位靶向于线粒体的靶向抗癌药物。

权利要求

1.具有下述式1-5所示结构的配合物及其药效学上可接受的盐：

2.权利要求1所述配合物的合成方法，其特征在于：取1-苯基吡唑铱二聚体和下述式(I)所示化合物置于有机溶剂中，于加热或不加热条件下反应，得到相应的目标配合物；

其中：

R1为氢原子或甲基，R2和R3同时为氯原子或溴原子；或者是R1和R3同时为氢原子，R2为氯原子；

所述的有机溶剂为乙醇，或者是乙醇与选自水、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷、二甲基亚砜和N,N-二甲基甲酰胺中的一种或两种以上的组合。

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：当有机溶剂为乙醇与其它选择的组合时，乙醇在有机溶剂中所占的体积比≥5％。

4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：反应在≥30℃的条件下进行。

5.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：反应在35-100℃的条件下进行。

6.权利要求1所述配合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：是在制备抗宫颈癌和/或卵巢癌的药物中的应用。

8.一种药物组合物，其特征在于：它含有治疗上有效剂量的权利要求1所述配合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的辅料。

9.权利要求1所述配合物或其药学上可接受的盐在制备荧光定位靶向于线粒体的靶向抗癌药物中的应用。

说明书

技术领域

本发明涉及基于8-羟基喹啉衍生物和1-苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物及其合成方法和应用，属于医药技术领域。

背景技术

癌症是目前威胁人类生命和健康的最严重的恶性疾病之一。目前，我国每年大概有三百多万人以上的人死于癌症，已经严重的威胁到我国民众的生命健康安全。顺铂等铂类配合物是目前使用最广的化疗药物之一，是治疗很多癌症的首选药物之一(Lippard,S.J.；et al.Chem.Sci.,2015,6,1189–1193.)。但是顺铂等铂类药物在临床的大量使用容易导致耐药性和严重的毒副作用如肾脏毒性、神经毒性和骨髓抑制等，这大大限制了它们的治疗效果和长期使用(Lippard,S.J.；et al.Chem.Sci.,2015,6,1189–1193.)。因此，非常迫切需要开发新型的金属靶向性抗肿瘤药物。

8-羟基喹啉被广泛用作医药中间体，但已有的试验表明，很多8-羟基喹啉衍生物(如2-甲基-5,7-二溴-8-羟基喹啉、2-甲基-5,7-二氯-8-羟基喹啉等)对多种肿瘤细胞不具抗增殖活性(IC₅₀>50uM)，而在构筑配合物时，本领域的研究人员公认通过使用具有生物活性的配体来参与构筑是实现合成多功能化合物的有效方法，如此建构目标产物能理想地使金属中心和配体之间产生协同效应。目前尚未见有以几乎没有活性的8-羟基喹啉衍生物和1-苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物及其合成方法和应用的相关报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一类对多种肿瘤细胞具有显著抑制活性但是对人正常肝细胞毒性低的基于8-羟基喹啉衍生物和1-苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物及其合成方法和应用。

本发明所述的基于8-羟基喹啉衍生物和1-苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物为具有下述式1-5所示结构的配合物及其药效学上可接受的盐：

本发明还提供上述式1-5所示结构的配合物合物的合成方法，具体为：取1-苯基吡唑铱二聚体和下述式(I)所示化合物置于有机溶剂中，于加热或不加热条件下反应，得到相应的目标配合物；

其中：

R₁表示氢原子或甲基，R₂表示卤原子，R₃表示氢原子或卤原子；

所述的有机溶剂为乙醇，或者是乙醇与选自水、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷、二甲基亚砜和N,N-二甲基甲酰胺中的一种或两种以上的组合。

本发明所述合成方法中，原料1-苯基吡唑铱二聚体可参考现有文献(Watts,R.J.；J.Am.Chem.SOC.,1 984,106,6647-6653.)进行制备，也可自行设计合成，在此不再详述。

本发明所述合成方法中，所述式(I)所示化合物和1-苯基吡唑铱二聚体的摩尔比为化学计量比，在实际操作过程中，1-苯基吡唑铱二聚体的量可相对过量一些。

本发明所述合成方法中，原料式(I)所示化合物中，R₁优选为氢原子或甲基，R₂优选为氯原子或溴原子，R₃优选为氢原子、氯原子或溴原子。具体的：

当R₁为甲基，R₂为氯原子，R₃为氯原子时，式(I)所示化合物为氯喹那多(本申请中也简称为H-QL1)，相应合成得到的目标配合物为式1所示结构的配合物(本申请中也简称为Ir1或配合物Ir1)；

当R₁为甲基，R₂为溴原子，R₃为溴原子时，式(I)所示化合物为5,7-二溴-2-甲基-8-羟基喹啉(本申请中也简称为H-QL2)，相应合成得到的目标配合物为式2所示结构的配合物(本申请中也简称为Ir2或配合物Ir2)；

当式R₁为氢原子，R₂为氯原子，R₃为氯原子时，式(I)所示化合物为5,7-二氯-8-羟基喹啉(本申请中也简称为H-QL4)，相应合成得到的目标配合物为式3所示结构的配合物(本申请中也简称为Ir3或配合物Ir3)；

当式R₁为氢原子，R₂为溴原子，R₃为溴原子时，式(I)所示化合物为5,7-二溴-8-羟基喹啉(本申请中也简称为H-QL5)，相应合成得到的目标配合物为式4所示结构的配合物(本申请中也简称为Ir4或配合物Ir4)；

当式R₁为氢原子，R₂为氯原子，R₃为氢原子时，式(I)所示化合物为5-氯-8-羟基喹啉(本申请中也简称为H-QL6)，相应合成得到的目标配合物为式5所示结构的配合物(本申请中也简称为Ir5或配合物Ir5)。

本发明所述合成方法中，只有当溶剂中有乙醇存在的条件下才有目标化合物生成。当有机溶剂为乙醇与其它选择的组合时，优选乙醇在有机溶剂中所占的体积比≥5％，进一步优选为≥10％，更优选≥20％。所述有机溶剂的用量以能够溶解参加反应的原料为宜，通常情况下，以1mmol的1-苯基吡唑铱二聚体为基准，所有参加反应的原料通常用1.5-50mL的有机溶剂来溶解。

本发明所述合成方法中，当反应在加热条件下进行时相对于不加热条件能够更快的得到目标化合物，因此，本发明优选反应在加热条件下进行，进一步优选反应在≥30℃的条件下进行，更优选反应是在35-100℃的条件下进行。反应过程中可采用TLC跟踪检测反应是否完全。申请人的试验结果表明，当反应在不加热条件下进行时，需要≥5天的时间才会有目标化合物生成；而当反应在35-100℃的条件下进行时，反应时间在8-48h即会有大量目标化合物生成。

本发明还提供上述式1-5所示结构的配合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。具体来说，是在制备抗宫颈癌和/或卵巢癌的药物中的应用。

本发明进一步包括一种药物组合物，它含有治疗上有效剂量的上述式1-5所示结构的配合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的辅料。所述药物的剂型可以是药学上可接受的任意剂型，如颗粒剂、胶囊剂、注射剂等。

此外，本申请人还发现上述式1-5所示结构的配合物能够在肿瘤细胞中作为一种线粒体膜电位的荧光成像染料，因此，本发明还包括上述式1-5所示结构的配合物或其药学上可接受的盐在制备敏化剂中的应用。

与现有技术相比，本发明提供了五例结构新颖的铱配合物及其合成方法，申请人的试验结果表明，这些配合物对宫颈癌和卵巢癌细胞具有显著的生物活性(活性显著高于其配体和顺铂)，同时它们对人正常肝细胞毒性极小(IC₅₀＞80μM)；另一方面，这些配合物还能够在肿瘤细胞进行荧光定位，可以开发成荧光定位靶向于线粒体的靶向抗癌药物。

附图说明

图1为本发明实施例1制得的最终产物的晶体结构图。

图2为本发明实施例3制得的最终产物的晶体结构图。

图3为本发明实施例5制得的最终产物的晶体结构图。

图4为本发明实施例6制得的最终产物的晶体结构图。

图5为本发明实施例7制得的最终产物的晶体结构图。

图6为本发明实验例2中配合物Ir1作用在宫颈癌HeLa细胞中6h的荧光成像图(1：空白组；3：配合物Ir1(0.05μM))。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的详述，以更好地理解本发明的内容，但本发明并不限于以下实施例。

以下各实施例中涉及的1-苯基吡唑(H-ppyz)铱二聚体均按下述方法制备得到：

取1-苯基吡唑2.4mmol、三水合三氯化铱1.2、mmol、乙二醇乙醚18mL去离子水6mL置于50mL的烧瓶后，氮气保护，加热至120℃冷凝回流24h，反应结束后，自然冷却至室温，向反应液中倒入200mL去离子水，搅拌析出大量黄色沉淀，过滤，滤饼依次用水和乙醇洗涤，之后于45℃条件下真空干燥，得到黄色固体，即为1-苯基吡唑铱二聚体。

实施例1：配合物Ir1的合成

在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的氯喹那多(H-QL1)与1.0mmol的1-苯基吡唑铱二聚体，然后加入5.5mL有机溶剂(由5.0mL的乙醇和0.5mL的二甲基亚砜组成)，搅拌溶解，在65℃下进行反应至完全(约15h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率85.50％。

对本实施例所得产物进行表征：

(1)X-射线单晶衍射

通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如下述表1所示，部分键长键角数据分别如下述表2和表3所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图1所示。

表1.配合物Ir1-Ir3的晶体学和结构修正数据

^aR₁＝Σ||F_o|–|F_c||/Σ|F_o|；^bwR₂＝[Σw(F_o²–F_c²)²/Σw(F_o²)²]^1/2.

表2.配合物Ir1的健长

表3.配合物Ir1的键角[°]

(2)元素分析结果，如表4所示。

表4.配合物Ir1-Ir3的元素分析(C₂₈H₂₀Cl₂IrN₅O)结果

(3)电喷雾质谱，其解析如下。

ESI-MS m/z:70.6[M+H]⁺，其中M为配合物Ir1的分子量。

因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir1，其分子式为[Ir(QL1)(ppyz)₂](其中QL1表示氯喹那多脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppyz表示1-苯基吡唑脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：

实施例2：配合物Ir1的合成

重复实施例1，不同的是，有机溶剂改为乙醇，用量不变；反应改在30℃下进行(反应至完全约38h)。

结果得到红棕色晶体。产率62.34％。

对本实施例所得产物进行单晶衍射分析、元素分析、红外分析及质谱分析，确定所得的红棕色晶体为目标配合物Ir1。

实施例3：配合物Ir2的合成

在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5,7-二溴-2-甲基-8-羟基喹啉(H-QL2)与1.0mmol的1-苯基吡唑铱二聚体，然后加入14.0mL有机溶剂(由3.5mL的乙醇和10.5mL的三氯甲烷组成)，搅拌溶解，在65℃下进行反应至完全(约29h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率70.21％。

对本实施例所得产物进行表征：

(1)X-射线单晶衍射

通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如上述表1所示，部分键长键角数据分别如下述表5和表6所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图2所示。

表5.配合物Ir2的健长

表6.配合物Ir2的键角[°]

(2)元素分析(C₂₈H₂₀Br₂IrN₅O)结果，如上述表4所示。

(3)红外光谱，其红外数据如下。

IR(KBr):3453,1637,1542,1477,1429,1355,1052,880,744,657,610,461cm^-1.

(4)电喷雾质谱，其解析如下。

ESI-MS m/z:794.1[M+H]⁺，其中M为配合物Ir2的分子量。

因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir2，其分子式为[Ir(QL2)(ppyz)₂](其中QL2表示5,7-二溴-2-甲基-8-羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppyz表示1-苯基吡唑脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：

实施例4：配合物Ir2的合成

重复实施例1，不同的是，有机溶剂改为由2.0mL的乙醇、8.0mL的DMF组成；反应改在80℃下进行(反应至完全约40h)。

结果得到红棕色晶体。产率85.66％。

对本实施例所得产物进行单晶衍射分析、元素分析、红外分析及质谱分析，确定所得的红棕色晶体为目标配合物Ir2。

实施例5：配合物Ir3的合成

在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5,7-二氯-8-羟基喹啉(H-QL4)与1.0mmol的1-苯基吡唑铱二聚体体，然后加入16.0mL有机溶剂(由1.0mL的乙醇和15.0mL的二氯甲烷组成)，搅拌溶解，在45℃下进行反应至完全(约60h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率81.2％。

对本实施例所得产物进行表征：

(1)X-射线单晶衍射

通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如上述表1所示，部分键长键角数据分别如下述表7和表8所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图3所示。

表7.配合物Ir3的健长

表8.配合物Ir3的键角[°]

(2)元素分析(C₃₁H₂₀Cl₂IrN₃O)结果，如上述表4所示。

(3)红外光谱，其红外数据如下。

IR(KBr):3431,1642,1553,1482,1442,1373,1356,1246,1111,1055,1032,964,883,751,660,615,453cm^-1.

(4)电喷雾质谱，其解析如下。

ESI-MS m/z:713.5[M+H]⁺，其中M为配合物Ir3的分子量。

因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir3，其分子式为[Ir(QL4)(ppyz)₂](其中QL4表示5,7-二氯-8-羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppyz表示1-苯基吡唑脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：

实施例6：配合物Ir4的合成

在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5,7-二溴-8-羟基喹啉(H-QL5)与1.0mmol的1-苯基吡唑铱二聚体体，然后加入20.0mL有机溶剂(由10.0mL的乙醇和10.0mL的水组成)，搅拌溶解，在100℃下进行反应至完全(约11h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率84.2％。

对本实施例所得产物进行表征：

(1)X-射线单晶衍射

通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如下述表9所示，部分键长键角数据分别如下述表10和表11所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图4所示。

表9.配合物Ir4-Ir5的晶体学和结构修正数据

^aR₁＝Σ||F_o|–|F_c||/Σ|F_o|；^bwR₂＝[Σw(F_o²–F_c²)²/Σw(F_o²)²]^1/2.

表10.配合物Ir4的健长

表11.配合物Ir4的键角[°]

(2)元素分析(C₂₇H₁₈Br₂IrN₅O)结果，如表12所示。

表12.配合物Ir4-Ir5的元素分析结果

(3)红外光谱，其红外数据如下。

IR(KBr):3410,1633,1547,1497,1439,1368,1246,1107,1054,966,863,810,750,656,448cm^-1.

(4)电喷雾质谱，其解析如下。

ESI-MS m/z:780.1[M+H]⁺，其中M为配合物Ir4的分子量。

因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir4，其分子式为[Ir(QL5)(ppyz)₂](其中QL5表示5,7-二溴-8-羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppyz表示1-苯基吡唑脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：

实施例7：配合物Ir5的合成

在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5-氯-8-羟基喹啉(H-QL6)与1.0mmol的1-苯基吡唑铱二聚体体，然后加入15.5mL有机溶剂(由15.0mL的乙醇和0.5mL的二甲基亚砜组成)，搅拌溶解，在55℃下进行反应至完全(约20h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率86.03％。

对本实施例所得产物进行表征：

(1)X-射线单晶衍射

通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如上述表9所示，部分键长键角数据分别如下述表13和表14所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图5所示。

表13.配合物Ir5的健长

表14.配合物Ir5的键角[°]

(2)元素分析(C₂₇H₁₉ClIrN₅O)结果，如上述表12所示。

(3)红外光谱，其红外数据如下。

IR(KBr):3452,1636,1567,1476,1403,1452,1355,1330,1054,749cm^-1.

(4)电喷雾质谱，其解析如下。

ESI-MS m/z:655.6[M+H]⁺，其中M为配合物Ir5的分子量。

因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir5，其分子式为[Ir(QL6)(ppyz)₂](其中QL6表示5-氯-8-羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppyz表示1-苯基吡唑脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：

实施例8：配合物Ir5的合成

重复实施例7，不同的是，有机溶剂改为乙醇，用量不变；反应改在常温下进行(反应至完全约3天)。

结果得到红棕色晶体。产率90.12％。

对本实施例所得产物进行单晶衍射分析、元素分析、红外分析及质谱分析，确定所得的红棕色晶体为目标配合物Ir5。

实验例1：配合物Ir1-Ir5对多种人肿瘤细胞株的增殖抑制活性实验：

1、细胞株与细胞培养

本实验选用人宫颈癌HeLa、人卵巢癌耐顺铂SK-OV-3/DDP细胞株和人正常肝细胞HL-7702。

所有细胞株均培养在含10wt％小牛血、100U/mL青霉素、100U/mL链霉素的RPMI-1640培养液内，置37℃含体积浓度5％CO₂孵箱中培养。

2、待测化合物的配制

各待测化合物的纯度≥95％，将其DMSO储液用生理缓冲液稀释后配制成20μmol/L的终溶液，其中助溶剂DMSO的终浓度≤1％，测试该浓度下待测化合物对各种肿瘤细胞生长的抑制程度。

3、细胞生长抑制实验(MTT法)

(1)取对数生长期的肿瘤细胞，经胰蛋白酶消化后，用含10％小牛血清的培养液配制成个数浓度为5000/mL的细胞悬液，以每孔190μL接种于96孔培养板中，使待测细胞密度至1000～10000孔(边缘孔用无菌PBS填充)；

(2)5％CO₂，37℃孵育6.0h，至细胞单层铺满孔底，每孔加入一定浓度梯度的药物10μL，每个浓度梯度设4个复孔；

(3)5％CO₂，37℃孵育48小时，倒置显微镜下观察；

(4)每孔加入10μL的MTT溶液(5mg/mL PBS，即0.5％MTT)，继续培养4h；

(5)终止培养，小心吸去孔内培养液，每孔加入150μL的DMSO充分溶解甲瓒沉淀，振荡器混匀后，在酶标仪用波长为570nm，参比波长为450nm测定各孔的光密度值；

(6)同时设置调零孔(培养基、MTT、DMSO)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、DMSO)。

(7)根据测得的光密度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强。

利用上述公式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率，再以Bliss法分别计算铱配合物对上述几种细胞株的IC₅₀值。其结果如表15所示。

表15.配合物Ir1-Ir5对不同肿瘤细胞株的IC₅₀值(μM，6.0h)

由表15的IC₅₀结果可以看出，本发明所述的配合物对3种人细胞株均表现出一定的增殖抑制作用，尤其是对人宫颈癌细胞HeLa抑制效果最为明显，其活性明显高于顺铂、IrCl₃·6H₂O和相应的配体H-QL1、H-QL2、H-QL4、H-QL5、H-QL6和H-ppyz；且这些配合物对正常细胞HL-7702的毒性很小(IC₅₀大于80μM)，具有较好的细胞毒性选择性。可见，本发明所述配合物具有较好的潜在药用价值，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。

实验例2：配合物Ir1对HeLa细胞的靶向定位线粒体的成像实验

1、实验步骤

(1)配合物Ir1(0.05μM)作用HeLa细胞6h；

(2)按照1:1000用无血清培养液稀释线粒体染液，使终浓度为50nM，去除细胞培养液后，加入适当体积稀释好的线粒体染液，加入的体积以充分盖住细胞为宜。

(3)37℃细胞培养箱内孵育20min。

(4)用无血清细胞培养液洗涤细胞3次，以充分去除未进入细胞内的线粒体染液；

(5)分别用DAPI(染核)和Mito-green(染线粒体膜)染色10min，用无血清细胞培养液洗涤细胞3次；

(6)观察细胞内线粒体的情况。

2、实验结果与讨论

由图6可知，配合物Ir1(0.05μM)作用HeLa细胞6h后，主要分布在线粒体膜电位，与市场上的膜电位检测的荧光染料(Mito-Green)重叠，且在线粒体膜部位呈红色，是一种良好的荧光染料。此外，从图中也可以看出，细胞核中几乎没有药物的分布，说明药物靶向于线粒体膜，从而诱导肿瘤细胞凋亡。

综上，本发明所述的配合物Ir1–Ir5，总体表现出了明显的体外抗肿瘤活性和毒性选择性，具有良好的潜在药用价值，是一种具有荧光定位靶向于线粒体的靶向抗癌药物，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。

基于8-羟基喹啉衍生物和1-苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物及其合成方法和应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。