专利摘要

本发明提供15-氧代绣线菊内酯各种类型衍生物，其为药物活性成分的药物组合物，其制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明在研究天然产物抗肿瘤的过程中发现15-氧代绣线菊内酯具有抗多种肿瘤细胞株的活性，多数衍生物强于先导物15-氧代绣线菊内酯。对上述化合物进行了抑制Wnt信号通路的活性测试以及对各种肿瘤细胞株抑制活性的测试，发现其抗肿瘤活性与其抑制Wnt信号通路活性呈正相关。

权利要求

1.下述结构式通式（Ⅰ）、（Ⅱ）所示的15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物，

其中：结构式通式（Ⅰ）中R₁，R₆为-OH或=O，R₂为-H或=O或=CH₂或-Cl或-Br或-SCH₃或-CH₂OH或-CH₂N(CH₃)₂或-CH₂N(CH₂)₄O或-CH₂OCOCH₃或-CH₂OSO₂CH₃，R₃为-H或R₂与R₃之间为双键；X₁，X₃为-CH₂或-CH或羰基；X₂为氧原子或氮原子或-SO₂；

当X₁为CH时，R₅为-OCH₃或R₁与R₅形成氧桥；

当X₂为氮原子时，R₄为-H或-CH₂CH₂OH或-CH₂CH₂OTBDMS或R₄，R₅，X₁，X₂形成噁唑环或R₄，X₂，X₃形成噁唑环。

结构式通式（Ⅱ）中，R₁，R₅为-OH，或=O；R₂为-H或=O或=CH₂或-CH₂OH或-CH₂N(CH₂)₄O或-CH₂OCOCH₃或-CH₂OSO₂CH₃；R₃，R₄为-OH或-COCH₃或-COCH₂Cl或-CON(CH₂)₄O或-Ms或-CH₂CN或2-噻吩甲酰基；X₁为-CH₂或-CO。

2.按照权利要求1所示的15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物，其为：

3.一种具有抗肿瘤活性的药物组合物，其特征在于，包含治疗有效量的一种或多种权利要求1或2任一项中所涉及的15-氧代绣线菊内酯衍生物及药学上可接受的辅料。

4.权利要求1或2中所示化合物的制备方法，包括下述步骤：

(1)化合物1-9、25、26的制备方法：

(2)化合物10的制备方法：

(3)化合物11-13的制备方法：

(4)化合物14-20的制备方法：

(5)化合物21的制备方法：

(6)化合物22、27的制备方法：

(7)化合物23、24、28-36的制备方法：

(8)化合物37-41的制备方法：

(9)化合物42、43、44的制备路线：

(10)化合物45、46、47、48、49的制备方法：

(11)化合物50-55的制备方法：

(12)化合物56-58的制备方法：

5.权利要求1或2所示化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

6.权利要求1或2所示化合物在制备Wnt信号通路抑制剂药物中的应用。

说明书

技术领域：

本发明属于药物技术领域，具体地说，涉及绣线菊二萜15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物，其制备方法，以该类化合物为活性成分的药物组合物，以及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术：

尽管肿瘤科学取得了很大的进步，但迄今为止，癌症仍是世界上最严重的公共健康问题。在世界范围内，预计新发癌症人数将由2008年的1270万，跃升到2030年的2000万以上，肿瘤已经成为人类健康的头号杀手。“穷癌”发病率居高不下，“富癌”也增长迅猛，我国正处于从发展中国家高发癌谱向发达国家高发癌谱过渡的时期。导致我国癌症患者年轻化的原因有环境污染、不良生活方式与精神压力过大等。与此同时，“癌情”汹涌的另一个因素是人口的快速老龄化。目前，临床应用的癌症治疗手段包括手术、放疗和化疗，这些手段虽然有一些疗效，但由于其较大的毒副作用而给患者带来巨大的肉体和精神上的痛苦。同时影响化疗效果的一个重要问题是发生了对细胞毒药物的耐药性，一些癌细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性，同时对其他非同类药物也产生抗药性，是造成肿瘤化学药物治疗（化疗）失败的主要原因。许多天然来源的抗肿瘤药物如生物碱类抗癌药物(秋水仙碱、长春碱、三尖杉酯碱和紫杉醇等)，蒽环类抗癌抗生素（阿霉素和柔红霉素），表鬼臼毒素类（Vp-16和VM-26）及合成药（米托蒽醌和胺苯丫啶）都极易发生MDR。新发现的药物如紫杉醇和治疗慢性粒性白血病的STI-571，都是刚用于临床就发现有耐药性，这使问题更加严重。然而，信号转导通路在正常细胞与肿瘤细胞之间存在着巨大差异，这种差异性正好赋予具有靶向性、强效低毒等特点的抗肿瘤药物新的历史发展机遇。迄今，现在技术中未见有本发明15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物的报道。

发明内容：

本发明的目的是提供一种具有结构式（Ⅰ）、（Ⅱ）的15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物，其制备方法，以该类化合物为活性成分的药物组合物，以及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的目的是通过以下技术方法来实现的：

下述结构式（Ⅰ）、（Ⅱ）的15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物：

其中：结构式（Ⅰ）中R₁，R₆为-OH或=O，R₂为-H或=O或=CH₂或-Cl或-Br或-SCH₃或-CH₂OH或-CH₂N(CH₃)₂或-CH₂N(CH₂)₄O或-CH₂OCOCH₃或-CH₂OSO₂CH₃，R₃为-H或R₂与R₃之间为双键；X₁，X₃为-CH₂或-CH或羰基；X₂为氧原子或氮原子或-SO₂;

当X₁为CH时，R₅为-OCH₃或R₁与R₅形成氧桥；

当X₂为氮原子时，R₄为-H或-CH₂CH₂OH或-CH₂CH₂OTBDMS或R₄，R₅，X₁，X₂形成恶唑环或R₄，X₂，X₃形成恶唑环。

结构式（Ⅱ）中，R₁，R₅为-OH，或=O；R₂为-H或=O或=CH₂或-CH₂OH或-CH₂N(CH₂)₄O或-CH₂OCOCH₃或-CH₂OSO₂CH₃；R₃，R₄为-0H或-COCH₃或-COCH₂Cl或-CON(CH₂)₄O或-Ms或-CH₂CN或2-噻吩甲酰基；X₁为-CH₂或-CO。

具体地，本发明的15-氧代绣线菊内酯（S-3）衍生物为：

本发明同时提供一种具有抗肿瘤活性的药物组合物，其包含治疗有效量的一种或多种上述的15-氧代绣线菊内酯衍生物及药学上可接受的辅料。

本发明上述化合物的制备方法，包括下述步骤：

(1)化合物1-9、25、26的制备方法：

(2)化合物10的制备方法:

(3)化合物11-13的制备方法：

(4)化合物14-20的制备方法：

(5)化合物21的制备方法：

(6)化合物22、27的制备方法：

(7)化合物23、24、28-36的制备方法：

(8)化合物37-41的制备方法：

(9)化合物42、43、44的制备路线：

(10)化合物45、46、47、48、49的制备方法：

(11)化合物50-55的制备方法：

(12)化合物56-58的制备方法：

本发明上述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明上述的化合物在制备Wnt信号通路抑制剂药物中的应用。

本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1—99.5%，优选为0.5-90%的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。

所述的药用载体或赋形剂是一种或多种固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明菲啶类衍生物的组合物采用制药和食品领域公认的方法制备成各种剂型、如液体制剂（注射剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂等）、固体制剂（片剂、胶囊剂、颗粒剂，冲剂等）、喷剂、气雾剂等。本发明的药物可经注射（静脉注射、静脉滴注、肌肉注射、腹腔注射、皮下注射）和口服、舌下给药、粘膜透析等给药途径进行抗抗肿瘤的治疗。

本发明前期的研究表明：来自于粉花绣线菊的15-氧代绣线菊内酯（S-3）具有全新的作用机制，S-3诱导非Bax/Bak依赖的细胞凋亡，深入研究发现S-3特异性地诱导促凋亡蛋白Bim的高表达，其与Bcl-2在线粒体水平发生作用，引起Bcl-2构象改变由抗凋亡转换为促凋亡功能，从而激活细胞色素C的释放导致细胞非Bax/Bak依赖性的凋亡，这是诱导细胞凋亡的新机制；发现S-3是肿瘤细胞Wnt信号通路选择性的抑制剂，通过减弱β-catenin和TCF4的相互作用抑制Wnt下游靶基因的表达；通过抑制下游靶基因表达导致细胞周期停滞在G2/M期；SW480移植裸鼠实验表明，低剂量的S-3即可抑制肿瘤的生长。本发明在此基础上，对S-3的大肠和结肠肿瘤株、正常细胞的细胞毒活性，以及ADME/T早期快速评价作了分析，发现S-3具有“首过效应”，其消除半衰期为0.43小时，内酯环的水解产物抗肿瘤活性完全消失。针对其成药性的缺陷，对其进行结构改造和结构优化，以Wnt信号通路的抑制活性、不同肿瘤株的细胞毒活性等作为依据，寻找成药更加合理的抗肿瘤化合物是非常必要的。

具体实施方式：

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。

实施例1：

本发明化合物的制备：

（1）化合物1-9、25、26的制备路线为：

制备方法：

化合物1：取来自于粉花绣线菊的干燥化合物15-氧代绣线菊内酯（S-3）（2.00g,6.06mmol），在N₂保护下用干燥二氯甲烷5ml溶解，将草酰氯（7.28mmol,692ul）在氮气保护注射入装有5ml干燥的二氯甲烷的长颈低温反应瓶中，置于-78℃搅拌20分钟，接着缓慢滴加DMSO（14.56mmol,1032ul,in5ml DCM中）溶液，5分钟滴加完后，低温搅拌30分钟，再将化合物S-3的二氯甲烷溶液缓慢滴加到反应瓶中，于-78℃搅拌下搅拌1小时后，在快速搅拌下，缓慢滴加三乙胺（14.56mmol,2020ul），加完后自然升温至常温，倒入20ml的水中，萃取分层，水层继续用20ml二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后残余物经过硅胶柱层析得到化合物1，无色粉末1888.2mg，得率：95.0%。

化合物2：称好化合物1（1.0mmol，328mg），多聚甲醛（5mmol,150mg），Bu₄NI(0.2mmol,73.8mg)，无水碳酸钾（2.0mmol,276mg）至于50ml的干燥圆底烧瓶中，N₂保护下，用干燥甲苯15ml溶解样品，反应混合物至于50℃下搅拌24小时，TLC点板确定原料消失后，冷却至室温加入20ml水，用乙酸乙酯萃取（2×20ml），有机层相继用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物2，无色粉末204mg，得率：60%。

化合物3：称量多聚甲醛（5mmol,150mg）混悬在10ml的干燥甲苯溶液中，N₂保护下，注射吗啉（5mmol,436ul），在40℃下搅拌1h，溶液变澄清后，降至室温搅拌，依次注射化合物1（1mmol,328mg）的甲苯溶液5ml，AcOH（1.0mmol,60ul），室温搅拌3小时，TLC显示原料消失，停止反应，加20ml饱和碳酸氢钠稀释，用乙酸乙酯（2×20ml）萃取，水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得到化合物3，无色粉末320mg，得率：75%。

化合物4：依次称量多聚甲醛（5mmol,150mg）、二甲胺盐酸盐（5mmol,407.7mg）混悬在10ml的干燥甲苯溶液中，N₂保护下，在40℃下搅拌1h，溶液变澄清后，降至室温搅拌，依次注射化合物1（1mmol,328mg）的甲苯溶液5ml，AcOH（1.0mmol,60ul），室温搅拌1小时，TLC显示原料消失，停止反应，加20ml饱和碳酸氢钠稀释，用乙酸乙酯（2×20ml）萃取，水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得到化合物4，无色粉末366mg，得率：95%。

化合物5、6：称取化合物1（1mmol,328mg），用10ml的干燥DMSO溶解，N₂保护下加入NCS（1.1mmol,147mg），于室温下搅拌1h，TCL显示不反应，加热45℃下搅拌3h，TLC点板发现原料消失，停止反应，冷却至室温加20ml水稀释，用乙酸乙酯（2×20ml）萃取，水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得到化合物5，无色粉末164.7mg，得率46%,化合物6，无色油状物149.6mg，得率：40%。

化合物7：称取化合物1（1mmol,328mg），用10ml的干燥DMSO溶解，N₂保护下加入NBS（1.1mmol,196mg），于室温下搅拌1h，TCL显示不反应，加热45℃下搅拌3h，TLC点板发现原料消失，停止反应，冷却至室温加20ml水稀释，用乙酸乙酯（2×20ml）萃取，水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得到化合物7，棕红色粉末374mg，得率：92%。

化合物8：称取化合物1（1mmol,328mg）用5ml的干燥甲苯溶解，N₂保护下加入NCS（1.1mmol,146.8mg），离子液[(BMIM)PF₄]1ml，室温搅拌1h，原料消失，停止搅拌加20m水稀释，用乙酸乙酯（2×20ml）萃取，水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得到化合物8，无色粉末50mg，得率：13.8%。

化合物9：取化合物S-3（1.0mmol,330mg）溶解于甲苯：二甲基亚砜=2:110ml溶液中，N₂保护下加入2-碘酰基苯甲酸（IBX,3.0mmol,840mg），于70℃下搅拌30小时，原料消失后，冷却至室温，用100ml的乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠溶液，水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物9，无色粉末97.8mg，得率：30%。

化合物25、26：取化合物1（330mg，1.0mmol）溶解在10ml的甲醇溶液中，加入吗啉（1.5eq，1.5mmol）室温搅拌10小时，原料消失后，停止反应，减压浓缩得残余物，经过硅胶柱层析得化合物25（187mg，收率：45%，26（179mg，收率;43%）。

（2）化合物10的制备：

化合物10：将草酰氯（1.0mmol,95ul）在N₂保护下注射入干燥的长颈反应瓶中，用5ml干燥DCM混溶，置于-78℃下搅拌，缓慢滴加DMSO(2.0mmol,142ul in2ml DCM)，搅拌30min，在缓慢滴加S-1（332mg,1.0mmol in2ml DCM），在-78℃下搅拌30min后，滴加三乙胺（2.0mmol,278ul）后自然升至室温，加水20ml稀释，用二氯甲烷（2*20ml）萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，经过硅胶柱层析得到化合物S-3（165mg），和化合物M-1（165mg），将化合物M-1通过与制备化合物2相似的方法制备得到化合物10，无色粉末162.4mg，两步得率：47.5%。

（3）化合物11-13的制备：

制备方法：

将化合物S-1（3.0g,9.04mmol）溶解于分析纯的丙酮250ml中，N₂保护下搅拌，加入（1.81mmol,343.5mg）的对甲苯磺酸（一水合物），在室温下搅拌24小时，反应过程中不断的有白色固体洗出，待原料反应完后，停止反应。过滤固体，石油醚：丙酮=20:1溶液，洗涤滤饼，母液继续用石油醚-丙酮=1:1的溶液重结晶，风干，合并固体，得到中间体化合物M-2（3.30g，得率97%）。将干燥的M-2溶解在干燥的250mlTHF溶液中，N₂保护，置于冰浴中搅拌，缓慢加入四氢铝锂（10.5mmol,400mg），搅拌20分钟后，置于45℃油浴锅上加热搅拌3小时，TLC显示原料消失后，将反应瓶再次放在冰浴中搅拌，缓慢加入2N的氢氧化钠溶液200ml，在冰浴中搅拌10分钟，抽滤，乙酸乙酯洗涤滤饼，滤液分层，水层部分继续用乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂得中间体化合物M-3，无色粉末3.33g，得率：100%。取化合物M-3（376.0mg,1.0mmol）溶解在10ml干燥的DCM溶液中，在室温下缓慢加入PDC（1.0mmol,376mg），室温快速搅拌5小时，TLC点板原料消失后，将反应物倒入冰水中，分层，水层再用20ml二氯甲烷萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，经过硅胶柱层析得到中间体化合物M-4（336mg，得率：90%）。将化合物M-4（224mg,0.60mmol）溶解在10ml的分析纯甲醇中，滴加2NHCl（3ml），在35℃下搅拌24小时，原料消失后，停止搅拌，减压下旋干甲醇，加水稀释，乙酸乙酯萃取，相继用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析得到中间体化合物M-5，无色油状物198mg，得率：95%。

化合物11：取化合物M-5（50mg,0.144mmol）溶解在10ml的干燥二氯甲烷中，分3批加入新制备的活性二氧化锰，每批二氧化锰量为（0.288mmol,25mg），间隔时间为10小时，待原料基本消失后，停止搅拌，过滤二氧化锰，用二氯甲烷反复洗涤二氧化锰，浓缩二氯甲烷得灰色油状物，经过硅胶柱层析得到化合物11，无色油状物28mg，得率：56.2%。

化合物12：将草酰氯（1.28mmol,110ul）在N₂保护下注射入干燥的长颈反应瓶中，用5ml干燥DCM混溶，置于-78℃下搅拌，缓慢滴加DMSO（2.56mmol,182ul in2ml DCM），搅拌30min，在缓慢滴加M-5（148mg,0.425mmol in2ml DCM），在-78℃下搅拌30min后，滴加三乙胺（2.56mmol,369ul）后自然升至室温，加水10ml稀释，用二氯甲烷（2×10ml）萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，经过硅胶柱层析得到化合物12，无色粉末146mg，得率：100%。

化合物13：称好化合物12（0.29mmol，100mg），多聚甲醛（1.45mmol,44mg），Bu4NI（0.06mmol,21mg），无水碳酸钾（0.58mmol,80mg）至于25ml的干燥圆底烧瓶中，N₂保护下，用干燥甲苯10ml溶解样品中，反应混合物至于50℃下搅拌24小时，TLC点板确定原料消失后，冷却至室温加入10ml水，用乙酸乙酯萃取（2×15ml），有机层相继用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物13，无色粉末56.7mg，得率：55%。

（4）化合物14-20的制备路线：

制备方法：

将化合物M-3（376.0mg,1.0mmol）溶解在10ml干燥的THF中，N₂保护下，加入三苯基磷（1.1mmol,288mg），缓慢滴加偶氮二甲酸二异丙酯（1.1mmol,222mg，稀释在2ml的干燥THF中），常温搅拌30分钟，TLC点板确定原料消失后，加入2N的稀盐酸（5ml）在35℃下搅拌24小时，TLC跟踪至丙酮叉全部脱掉后，加水稀释反应液，用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物经过硅胶柱层析得到化合物M-6，无色油状物318mg，得率：100%。

化合物14、18的制备通过与化合物10相似的方法而得到；同时化合物15、20的制备通过与化合物12、13相似的方法而得到。

化合物16、17、20的制备：用25ml的圆底反应瓶依次称取化合物15（100mg,0.318mmol），碳酸钾（0.636mmol,87.8mg），多聚甲醛（1.59mmol,47.7mg），N₂保护下，用10ml干燥的甲苯溶解样品，室温下搅拌24小时，TLC跟踪，原料消失后，停止搅拌，加10ml水稀释，用乙酸乙酯（2×15ml），有机层用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物16，无色粉末82mg，得率：75%；相继称取的化合物16（50mg,0.15mmol）、4-二甲氨基吡啶（5mg）在10ml的圆底反应瓶中，N₂保护下用5ml干燥的二氯甲烷溶解，相继用注射器注射吡啶（0.18mmol,15ul），甲基磺酰氯（0.18mmol,14ul），在室温下搅拌3小时，TLC点板跟踪，原料消失后，停止搅拌，加10ml水稀释，二氯甲烷（2×15ml），有机层用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物17，无色油状物62mg，得率：98%；在15ml的圆底反应瓶里，称取化合物17（50mg,0.118mmol），N₂保护下，用5ml的干燥四氢呋喃溶解，加入DBU（0.236mmol,35ul），室温搅拌24小时，TLC检测发现原料消失，直接减压浓缩，硅胶柱层析的化合物得化合物20，无色粉末27mg，得率：70%。

化合物19：将化合物M-6（1.0mmol,318mg）溶解在20ml分析丙酮中，冰浴下缓慢滴加新配置的Jones reagent（2.2mmol,0.84ml）快速搅拌30分钟，发现原料消失后，加入异丙醇（5ml）停止反应，浓缩去掉丙酮，加水稀释，用乙酸乙酯萃取2次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物经过硅胶柱层析得到化合物得到化合物15（72mg，得率：20.7%），化合物M-8（45mg,得率：13.6%），化合物M-8用5ml的(BMIM)PF4离子液混悬，相继加入吗啉（0.136mmol,12ul），醋酸（0.136mmol,9ul），多聚甲醛（0.68mmol,20mg），在70℃搅拌10h，原料消失后，用饱和碳酸氢钠溶液10ml淬灭反应，乙酸乙酯（2×20ml）萃取，有机层相继用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物19（32mg，得率：70%）。

（5）化合物21的制备路线：

制备方法：

化合物21：在25ml的圆底烧瓶里，称取化合物M-4（112mg,0.3mmol）溶解在10ml的二氯甲烷中，N₂保护下依次加入4-二甲氨基吡啶(5mg)，吡啶（1.0mmol,80.6ul），Ac₂O（0.45mmol,42.5ul），室温搅3h，待原料消失后，浓缩的残余物，用10ml甲醇溶解残余物，加入2N HCl（5ml）在35℃下搅拌24小时，TLC点板发现，原料消失，产生新点，浓缩去掉甲醇，加入乙酸乙酯萃取2次，相继用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经过硅胶柱层析得到化合物M-10，化合物M-10经过一个Swern oxidation得到化合物21（79mg,两步得率95%）。

（6）化合物22、27的制备路线：

制备方法：

化合物22、27：将化合物S-1（500mg,1.50mmol）置于250ml的圆底反应瓶中，用100ml分析纯甲醇溶解样品，加入（7.5mmol,420mg）的KOH，搅拌，加热回馏24小时，原料消失后，停止反应，加水稀释，减压浓缩去掉甲醇，用2N的稀盐酸调成中性溶液，用乙酸乙酯萃取2次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到中间体M-11粗品550mg，取干燥粗品化合物M-11（100mg,0.28mmol）溶解于装有50ml干燥DCM圆底反应瓶中，N₂保护下，分批加入新制MnO₂（1.42mmol,123.5mg），常温搅拌72小时，待原料不再变化后，过滤二氧化锰，浓缩，残余物经过硅胶柱层析得到化合物27，无色粉末30mg，得率：30.2%。取干燥粗品化合物M-11（200mg,0.56mmol）溶解于装有50ml分析纯丙酮的圆底反应瓶中，置于冰浴下，缓慢滴加Jones试剂（2.52mmol,0.96ml），在冰浴下搅拌30分钟后，TLC点板发现原料消失，用异丙醇（5ml）淬灭反应，浓缩去掉丙酮，加水稀释，用乙酸乙酯萃取2次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物经过硅胶柱层析得到化合物得到化合物22，无色粉末80mg，得率：40.8%。

（7）化合物23、24、28-36的制备路线：

制备方法：

将化合物M-3（376.0mg,1.0mmol）溶解在10ml干燥的二氯甲烷中，置于0℃，N₂气保护下缓慢注射入二氯亚砜（1.1mmol,80ul），加完后，升至室温搅拌30分钟，原料消失，加水淬灭反应，旋干DCM，加入10ml THF溶解样品，再加入2N的稀盐酸5ml，在35℃下搅拌24小时，丙酮叉全部脱掉后，停止搅拌，加入乙酸乙酯萃取2次，相继用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经过硅胶柱层析得到中间体化合物M-12，化合物M-12经过二氧化锰氧化得到化合物23，同时M-12用制备化合物13类似的方法制备了化合物24。

在50ml的圆底反应瓶中，将化合物M-3（752.0mg,2.0mmol）、4-二甲氨基吡啶（10mg）溶解在15ml干燥的二氯甲烷中，置于0℃，N₂气保护下缓慢依次注射入吡啶（6.0mmol,484ul）、乙酸酐（6.0mmol,567ul），加完后，升至室温搅拌24小时，TLC显示原料消失后，加20ml水淬灭反应，用二氯甲烷（2×20ml）萃取，饱和食盐水洗涤二氯甲烷层，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物,用15ml THF溶解样品，再加入2N的稀盐酸8ml，在35℃下搅拌24小时，丙酮叉全部脱掉后，停止搅拌，加入乙酸乙酯萃取2次，相继用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经过硅胶柱层析得到中间体化合物M-13，无色油状物773mg，得率：92%。

化合物28、30：称取化合物M-13（150mg,0.36mmol）溶解在干燥的二氯甲烷中，分批加入新制备的二氧化锰（2.16mmol,188mg），室温搅拌72小时，待原料基本消失后，过滤二氧化锰，用二氯甲烷反复洗涤二氧化锰，滤液浓缩得残余物，经过硅胶柱层析而得到化合物30，无色油状物113mg，得率：75%。取化合物30（80mg,0.19mmol）溶解在分析纯的四氢呋喃中，加入2N的HCl（5ml）室温搅拌24小时，原料消失后，加10ml水稀释，用乙酸乙酯（2×20ml）萃取两次，乙酸乙酯层相继用饱和碳酸氢钠、水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥浓缩得残余物经过硅胶柱层析得到化合物28，无色粉末38mg，得率：60%。

化合物31、32、33、34、36经过与前面15、16、17、20的制备相似的方法而制备；化合物31经盐酸水解得到化合物29，方法与化合物30制备化合物28相同；化合物35同化合物3相似的方法而制备。

（8）化合物37-41的制备路线：

制备方法：

化合物37、38、40同30、31的制备方法相似；化合物39、41制备方法同化合物19的制备相似。

（9)化合物42、43、44的制备路线：

制备方法：

化合物42、43：化合物M-3（376.0mg,1.0mmol）置于25ml的圆底反应瓶中，N₂保护下用10ml干燥的THF溶解，在冰浴下搅拌，缓慢加入60%NaH（3.0mmol,120mg），搅拌20分钟，缓慢注射4-吗啉碳酰氯（3.0mmol,351ul），升至室温搅拌3小时，不反应，再在40℃下回馏12小时，原料消失后，加水10ml淬灭反应，乙酸乙酯等体积萃取2次，合并乙酸乙酯层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物，经过硅胶柱层析得到中间体M-17和M-18，皆为油状化合物物，其中M-17（269mg,得率：55%），M-18（171mg,得率：35%），然后M-17和M-18再经过另一个羟基甲基磺酰化以及脱丙酮叉，斯文氧化分别得到化合物42（无色油状物230mg，两步得率：44%）；化合物43（无色油状物143mg，两步得率：27%）。

化合物44：称量化合物M-3（376.0mg,1.0mmol）在25ml的圆底反应瓶中，N₂保护下用10ml干燥的DMF溶解，在冰浴下搅拌，缓慢加入60%NaH（3.0mmol,120mg），搅拌20分钟，缓慢注射溴乙腈（3.0mmol,209ul）于冰浴下搅拌2小时，TLC检测发现原料消失，停止搅拌，加水淬灭，加入50ml的乙酸乙酯萃取分层，每次用20ml的水连续洗涤3次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物，经过硅胶柱层析得到中间体M-16，无色油状物311mg，得率75%；然后把M-16溶解在10ml干燥的二氯甲烷中，加入4-二甲氨基吡啶（5mg），N₂保护下依次加入吡啶（2.0mmol,161ul），噻吩-2-甲酰氯（2.0mmol,215ul），在40℃下回馏12小时，原料消失后，再经过一个脱丙酮叉，斯文氧化得到化合物44，无色油状物264mg，两步得率：55%。

（10）化合物45、46、47、48、49的制备路线：

制备方法：

化合物47、48的制备方法与化合物37、38制备方法相似，从化合物48制备化合物45、46、49的制备方法与化合物19的制备方法相似，其中化合物49的得率为55%，化合物45的得率为20%，化合物46的得率为10%。

（11）化合物50-55的制备路线：

制备方法：

化合物51-54：称取化合物spiramine C/D（1.0g,2.80mmol），用100ml的分析纯甲醇溶解，室温下缓慢分批加入硼氢化钠（5.0mmol,189.5mg），加完后搅拌30min，原料消失后，冰浴下缓慢滴加丙酮至不再冒气泡为止，加50ml水稀释，减压浓缩去掉甲醇，用乙酸乙酯（2×100ml）萃取，水洗、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥、减压浓缩回收溶剂得残余物未经纯化直接下一步反应，将干燥的残余物溶解在20ml的干燥DMF中，N₂保护在冰浴下依次加入叔丁基二甲基氯硅烷（TBDMSCl,2.50mmol,376.7mg），咪唑（imidazole,2.50mmol,170mg），室温搅拌2h，原料消失后，加水（50ml）稀释，用乙酸乙酯（2×100ml）萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得残余物经过硅胶柱层析得到中间体化合物M-22（950mg,2.0mmol,两步得率：71.4%）。将草酰氯（2.0mmol,190ul）在N₂保护下注射入干燥的长颈反应瓶中，用10ml干燥DCM混溶，置于-78℃下搅拌，缓慢滴加DMSO(4.0mmol,283.6ul in2ml DCM)，搅拌30min，在缓慢滴加M-22（950mg,2.0mmol,in5ml DCM），在-78℃下搅拌30min后，滴加三乙胺（4.0mmol,554.9ul）自然升至室温，加水20ml稀释，用二氯甲烷（2×20ml）萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得膏状物（927mg，收率：98%）。取膏状物（460mg,0.97mmol）进行硅胶柱层析得到化合物M-23（220mg,0.46mmol）和M-24（215mg，0.45mmol）。将M-23（220mg,0.46mmol），多聚甲醛（69mg,2.3mmol），Bu₄NI(34mg,0.09mmol)，干燥碳酸钾（127mg,92mmol）至于50ml的干燥圆底烧瓶中，N₂保护下，用干燥甲苯10ml溶解样品中，反应混合物至于50℃下搅拌12小时，TLC点板确定原料消失后，冷却至室温加入水20ml，用乙酸乙酯萃取（2×20ml）,有机层相继用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物；将干燥好的残余物用干燥的THF10ml溶解，N₂保护，搅拌下注射TBAF(0.55mmol,550ul,1M TBAF in THF)，室温搅拌2h,原料消失后，加20ml水稀释，用乙酸乙酯（2*20ml）萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物经硅胶柱层析得到化合物51（无色油状物，85mg，收率：49.8%）。M-24（215mmol,0.45mmol）用TBAF脱保护得化合物50（无色油状物，105mg，65%）。取M-23和M-24的混合物（467mg）再一次斯文氧化(swern oxidation)得到M-25(420mg,0.89mmol)，取M-25(100mg，0.21mmol)，用TBAF脱保护得化合物52（无色油状物，55mg，收率：73%）。取M-25(320mg，0.68mmol)，多聚甲醛（102mg，3.4mmol），Bu₄NI(50.2mg，0.136mmol)，干燥碳酸钾（188mg，1.36mmol）至于50ml的干燥圆底烧瓶中，N₂保护下，用干燥甲苯10ml溶解样品中，反应混合物至于50℃下搅拌12小时，TLC点板确定原料消失后，冷却至室温加入水20ml，用乙酸乙酯萃取（2×20ml）,有机层相继用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得残余物，经过硅胶柱层析得到化合物53（无色油状物，147.7mg，收率：45%）。取化合物53（100mg，0.207mmol）经TBAF脱保护得化合物得到化合物54（无色油状物，49mg，收率：65%）。

化合物55：称取化合物spiramine C/D(100mg，0.28mmol)溶解在30ml的二氯甲烷中，室温下分批加入新制备的二氧化锰（0.28mmol,0.56mmol,0.56mmol），间隔时间为10h，10h，10h，待原料基本消失后，过滤二氧化锰，用二氯甲烷反复洗涤，合并滤液，浓缩的残余物经过硅胶柱层析得化合物55（69.6mg，产率：70%）。

（12）化合物56-58的制备路线：

制备方法：

化合物56：称取化合物spiramine C/D(100mg，0.28mmol)溶解在30ml的分析纯的丙酮中，分批加入新制备的二氧化锰（0.56mmol,0.56mmol,0.56mmol,0.56mmol,0.56mmol），室温下搅拌72h，待原料基本消失后，过滤二氧化锰，用丙酮反复洗涤，合并滤液，浓缩的残余物经过硅胶柱层析的化合物48（31.6mg,产率：30%）。

化合物57、58：称取化合物spiramine C/D（500mg,1.4mmol）溶解在50ml的分析纯甲醇中，分批加入硼氢化钠（2.8mmol,105.8mg），室温下搅拌30min，待原料消失后加入丙酮终止反应，加30ml水稀释，减压浓缩去掉甲醇，用乙酸乙酯（2×100ml）萃取，水洗、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥、减压浓缩得残余物未经进一步纯化直接下一步反应，将干燥残余物（454mg,1.26mmol）溶解在25ml的甲醇中，加入K₃Fe(CN)₆的水溶液（1.24g,3.78mmo in10ml H₂O），再加入KOH的水溶液（750mg KOH溶液5ml水中），加热水流4h，原料消失后，过滤，减压浓缩的残余物，经硅胶柱层析得化合物M-26（180mg,两步收率：35.8%）。将化合物M-26溶解在分析纯的丙酮中，分批加入二氧化锰（880mg,10.1mmol），室温搅拌72h，待原料基本消失后，停止搅拌，过滤二氧化锰，用丙酮反复洗涤二氧化锰，合并滤液，浓缩得残余物，经过硅胶柱层析的化合物57（59.8mg,32%），化合物58（33mg,18%）。

上述化合物的波谱数据如下：

化合物（1）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.05(1H,d,J=1.2Hz),5.34(1H,d,J=1.2Hz),4.24(1H,dd,J=2.4,12.4Hz),4.16(1H,d,J=12.4Hz),2.86-2.91(2H,m),2.78(1H,dd,J=6.0,18.0Hz),2.05-2.32(5H,m),1.66-1.95(7H,m),1.48-1.50(1H,m),1.25-1.38(2H,m),0.91(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:206.2,195.9,173.2,146.6,119.4,76.0,57.5,45.8,44.9,44.8,40.4,38.2,36.6,35.9,33.1,27.2,25.9,24.3,22.8,20.1.HR-EI-MS m/z328.1673[M]⁺(C₂₀H₂₄N₂O₄,calcd328.1675).

化合物（2）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.98(1H,s),5.93(1H,s),5.34(1H,s),5.26(1H,s),3.93(2H,s),2.83(1H,d,J=3.2Hz),2.68(1H,t,J=11.2Hz),2.52(1H,d,J=1.2Hz),2.16-2.22(3H,m),2.01-2.08(1H,m),1.87-1.97(2H,m),1.54-1.82(5H,m),1.35(1H,ddd,J=4.4,12.4,16.8Hz),0.94(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:202.3,195.7,173.3,146.2,144.8,125.8,119.9,75.4,57.8,53.5,44.7,42.5,39.5,36.3,36.2,35.0,27.3,25.9,24.3,20.9,20.8.HR-EI-MS m/z340.1682[M]⁺(C₂₁H₂₄O₄,calcd340.1675).

化合物（3）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.02(1H,s),5.37(1H,s),4.17(1H,d,J=12.0Hz),4.02(1H,d,J=12.0Hz),3.71(4H,t,J=4.4Hz),2.85(1H,d,J=2.4Hz),2.66-2.75(3H,m),2.53(4H,brs),2.10-2.53(5H,m),1.89-2.01(2H,m),1.62-1.82(3H,m),1.53-1.60(3H,m),1.31-1.35(1H,m),0.92(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:208.2,197.0,173.0,146.6,119.7,75.5,68.8(2CH₂-morpholine),63.5,58.2,53.6(2CH₂-morpholine),52.5,47.4,44.6,42.5,40.4,37.1,36.3,34.4,27.6,26.0,22.5,22.3,20.6.HR-EI-MS m/z427.2366[M]⁺(C₂₅H₃₃NO₅,calcd427.2359).

化合物（4）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.04(1H,d,J=1.6Hz),5.39(1H,d,J=1.6Hz),4.22(1H,dd,J=2.4,12.0Hz),4.04(1H,dd,J=1.6,12.0Hz),2.40-2.90(6H,m),2.38(6H,s),1.25-2.29(13H,m),0.91(3H,s).HR-EI-MS m/z385.2266[M]⁺(C₂₃H₃₁NO₄,calcd385.2253).

化合物（5）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.10(1H,s),5.47(1H,s),4.16(1H,d,J=12.0Hz),4.06(1H,d,J=12.0Hz),3.88(1H,m),3.61(1H,m),2.88(1H,m),2.81(1H,m),2.63-2.69(2H,m),2.34(1H,t,J=10.0,10.0Hz),2.20-2.28(2H,m),1.92-2.12(3H,m),1.49-1.84(6H,m),1.34-1.42(1H,m),0.90(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:210.4,198.8,172.7,145.8,121.1,75.2,65.9,58.2,52.6,48.5,44.0,42.2,40.1,36.4,35.9,33.6,27.1,25.9,22.2,21.7,20.2.HR-EI-MS m/z358.1791[M]⁺(C₂₁H₂₆O₅,calcd358.1980).

化合物（6）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.04(1H,d,J=1.6Hz),5.36(1H,d,J=1.6Hz),4.22(1H,dd,J=2.0,12.0Hz),4.09(1H,dd,J=1.2,12.0Hz),3.08(1H,d,J=4.8Hz),2.86(1H,m),2.67(1H,m),2.50(1H,t,J=10.0,10.0Hz),2.21-2.29(2H,m),2.17(3H,s),1.90-2.11(3H,m),1.68-1.84(2H,m),1.53-1.67(4H,m),1.30-1.38(1H,ddd,J=4.4,11.0,15.2Hz),1.02(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:200.4,197.1,172.8,146.6,119.5,75.5,57.4,54.8,48.9,44.5,44.0,40.3,40.2,36.8,34.0,27.6,25.8,23.6,22.2,20.5,16.2.HR-EI-MS m/z374.1536[M]⁺(C₂₁H₂₆O₄S,calcd374.1552).

化合物（7）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.11(1H,d,J=1.2Hz),5.42(1H,d,J=1.2Hz),4.20(1H,d,J=4.8Hz),4.19(1H,d,J=1.6Hz),4.10(1H,dd,J=1.6,12.4Hz),2.90(1H,d,J=3.2Hz),2.67(1H,m),2.56(1H,m),2.50(1H,m),2.21-2.29(2H,m),1.41-2.10(9H,m),1.12(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:199.8,194.8,172.1,145.7,120.3,75.3,59.1,58.4,45.0,43.3,41.0,40.3,36.9,36.0,34.1,27.5,25.8,23.3,22.4,20.2.HR-EI-MS m/z406.0786[M]⁺(C₂₀H₂₃O₄Br,calcd406.0780).

化合物（8）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.10(1H,d,J=1.2Hz),5.42(1H,d,J=1.2Hz),4.09-4.16(3H,m),2.89(1H,s),2.67(1H,t,J=11.6Hz),2.54(1H,t,J=9.6Hz),2.22-2.99(3H,m),1.92-2.13(3H,m),1.81-1.85(2H,m),1.59-1.70(4H,m),1.42(1H,m),1.25(1H,m),1.08(1H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:199.9,194.9,172.1,146.0,120.4,75.6,58.9,58.8,54.6,44.5,41.3,40.3,37.0,36.2,33.9,27.5,25.9,23.2,22.5,20.3.HR-EI-MS m/z362.1287[M]⁺(C₂₀H₂₃O₄Cl,calcd362.1285).

化合物（9）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.13(1H,s),6.02(1H,d,J=1.6Hz),5.31(1H,d,J=1.6Hz),4.27(1H,d,J=10.8Hz),3.83(1H,dd,J=2.4,10.8Hz),3.26(1H,m),2.88(1H,t,J=2.8Hz),2.49-2.54(2H,m),2.17(1H,m),1.70-1.96(7H,m),1.56(1H,m),1.18(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:196.9,195.6,171.5,159.8,147.3,123.4,118.4,79.8,54.9,47.6,42.5,38.9,38.8(C_t and C_s),35.8,25.5,24.5,23.4,21.8,19.5.HR-EI-MS m/z326.1512[M]⁺(C₂₀H₂₂O₄,calcd326.1518).

化合物（10）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.89(1H,s),5.43(1H,s),5.10(1H,brs),4.08(1H,d,J=11.6Hz),4.00(1H,d,J=11.6Hz),3.95(1H,s),2.70(1H,s),2.64(1H,t,J=10.8Hz),2.51(1H,brs),2.47(1H,brs),2.46(1H,d,J=13.2Hz),2.17(2H,s),2.05-2.13(1H,m),1.56-1.83(8H,m),1.32-1.38(1H,m),1.03(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:208.5,173.4,151.2,144.1,125.8,112.6,75.3,74.8,53.0,44.1,40.2,36.6,35.5,27.8,25.1,24.3,20.8,17.0.HR-EI-MS m/z342.1839[M]⁺(C₂₁H₂₆O₄,calcd342.1831).

化合物（11）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.96(1H,d,J=1.6Hz),5.25(1H,d,J=1.6Hz),5.11(1H,s),4.18(1H,dd,J=4.8,J=12.0Hz),3.66(1H,dd,J=2.4,J=11.2Hz),3.55(1H,dd,J=1.2,J=11.2Hz),3.49(3H,s),2.73(1H,brs),2.64-2.72(2H,m),1.18-1.94(14H,m),0.78(1H,m),0.75(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:204.5,147.2,117.5,103.7,71.3,70.5,55.9,50.5,49.0,43.6,41.9,40.7,35.8,34.2,33.0,27.1,24.9,24.1,23.1,21.9,18.7.HR-EI-MS m/z346.2122[M]⁺(C₂₁H₃₀O₄,calcd346.2144).

化合物（12）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.02(1H,d,J=1.6Hz),5.32(1H,d,J=1.6Hz),4.40(1H,s),3.45(2H,m),3.42(3H,s),2.77(1H,brs),2.48-2.64(2H,m),2.16-2.40(4H,m),1.96(1H,t,J=10.4Hz),1.63-1.88(6H,m),1.51-1.54(1H,m),1.41-1.43(1H,m),0.97(1H,m),0.66(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:209.9,196.7,146.5,119.3,102.7,70.4,57.7,55.5,47.9,45.7,40.4,39.7,37.5,35.7,33.6,31.2,27.2,26.8,23.5,21.6,21.4.HR-EI-MS m/z344.1998[M]⁺(C₂₁H₂₈O₄,calcd344.1988).

化合物（13）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.99(1H,d,J=1.2Hz),5.98(1H,dd,J=1.2,2.4Hz),5.33(1H,dd,J=1.2,2.4Hz),5.32(1H,d,J=1.2Hz),4.39(1H,d,J=1.2Hz),3.46(1H,dd,J=1.8,11.2Hz),3.43(3H,s),3.27(1H,dd,J=1.8,11.2Hz),2.78(1H,d,J=3.0Hz),2.33-2.45(4H,m),2.15(1H,t,J=10.4Hz),1.94(1H,t,J=10.4Hz),1.52-1.88(7H,m),1.07(1H,m),0.84(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:203.3,196.3,146.6,145.5,126.2,119.3,103.3,71.6,57.0,55.2,54.8,44.2,41.0,39.2,35.9,35.5,30.6,27.4,26.6,24.0,22.7,21.3.HR-EI-MS m/z356.1985[M]⁺(C₂₂H₂₈O₄,calcd356.1988).

化合物（14）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.00(1H,d,J=1.6Hz),5.29(1H,d,J=1.6Hz),4.13(1H,dddd,J=2.8,5.2,11.6,12.8Hz),4.07(1H,dd,J=2.8,11.6Hz),3.87(1H,d,11.6Hz),3.54(1H,dd,J=2.8,11.6Hz),3.47(1H,d,11.6Hz),2.77(1H,brs),2.64(1H,d,J=3.2Hz),2.33-2.41(1H,m),1.97-2.17(2H,m),0.78-1.83(13H,m),0.73(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:203.8,146.3,118.5,73.0,70.5,67.5,50.0,47.3,42.2,40.8,39.3,38.3,35.8,33.0,27.3,25.1,24.6,23.4,22.2,18.7.HR-EI-MSm/z316.2043[M]⁺(C₂₀H₂₈O₃,calcd316.2038).

化合物（15）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.04(1H,s),5.33(1H,s),3.90(1H,d,J=11.2Hz),3.76(1H,dd,J=2.4,11.2Hz),3.45(2H,s),2.82(1H,d,J=2.4Hz),2.58(1H,d,J=9.2Hz),2.38-2.46(1H,m),2.08-2.18(2H,m),1.39-1.98(11H,m),1.14-1.23(1H,m),0.66(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:208.6,195.6,145.8,119.6,71.7,66.9,56.9,45.6,45.0,40.4,37.4,37.2,36.9,35.5,33.3,26.9,26.1,25.1,22.3,21.8.HR-EI-MS m/z314.1889[M]⁺(C₂₀H₂₆O₃,calcd314.1882).

化合物（16）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.07(1H,d,J=0.8Hz),5.41(1H,d,J=0.8Hz),3.82-3.89(2H,m),3.55(1H,m),3.52(1H,d,J=10.8Hz),3.29-3.36(2H,m),2.85(1H,brs),2.67-2.71(2H,m),2.36-2.47(2H,m),2.02-2.13(2H,m),1.93-1.99(1H,m),1.70-1.80(3H,m),1.56-1.63(2H,m),1.44-1.52(3H,m),1.25-1.30(1H,m),0.70(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:212.2,198.8,145.6,120.7,72.8,68.9,66.1,57.6,52.2,49.3,43.7,40.6,37.4,35.8,35.6,34.2,26.8,25.8,24.1,21.8,21.6.HR-EI-MS m/z344.1989[M]⁺(C₂₁H₂₈O₄,calcd344.1988).

化合物（17）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.00(1H,s),5.34(1H,s),4.32(1H,dd,J=3.6,J=9.6Hz),4.25(1H,dd,J=5.6,J=9.6Hz),3.91(1H,d,J=11.2Hz),3.49(1H,d,J=12.0Hz),3.30-3.37(2H,m),3.12(3H,s),2.77-2.82(2H,m),2.34-2.45(2H,m),2.04-2.17(2H,m),1.96-1.97(1H,m),1.46-1.81(8H,m),1.25-1.31(1H,m),0.73(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:209.0,195.6,145.8,119.7,72.5,72.0,68.8,57.8,48.5,47.5,42.8,40.6,37.3,36.9,35.8,35.5,34.3,26.6,26.1,25.3,22.1,21.6.HR-EI-MSm/z422.1759[M]⁺(C₂₂H₃₀O₆S,calcd422.1763).

化合物（18）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.94(1H,s),5.46(1H,s),5.08(2H,s),3.93(1H,s),3.91(1H,d,J=12.0Hz),3.58(1H,dd,J=2.8,J=12.0Hz),3.44(1H,d,J=11.2Hz),3.25(1H,dd,J=2.8,J=11.2Hz),2.34-2.49(4H,m),2.03(1H,m),1.21-2.06(11H,m),0.86(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:209.4,150.0,144.8,126.8,113.1,74.5,73.7,69.6,53.2,48.6,44.9,41.6,36.7,35.7,35.3,35.2,26.6,25.6,24.4,21.8,20.3.HR-EI-MS m/z328.2040[M]⁺(C₂₁H₂₈O₃,calcd328.2038).

化合物（19）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.98(1H,s),5.35(1H,s),3.97(1H,d,J=12.0Hz),3.53(1H,dd,J=2.8,J=12.0Hz),3.43(1H,dd,J=1.2,J=11.6Hz),3.14(1H,dd,J=3.2,J=11.6Hz),3.12(1H,d,J=6.0Hz),2.87(1H,d,J=6.0Hz),2.42-2.57(2H,m),2.41(1H,brs),2.07-2.18(3H,m),1.52-1.99(9H,m),1.53(1H,m),1.34-1.36(1H,m),0.83(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:203.8,201.1,145.1,126.9,73.9,68.9,60.3,58.0,53.2,52.8,43.1,41.0,37.2,35.4,34.1,24.5,24.3,24.1,23.4,21.7.HR-EI-MS m/z342.1840[M]⁺(C₂₁H₂₈O₄,calcd342.1831).

化合物（20）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.99(2H,s),5.35(1H,s),5.33(1H,s),3.93(1H,d,J=11.6Hz),3.53(1H,dd,J=2.4,11.6Hz),3.42(1H,d,J=11.6Hz),3.13(1H,dd,J=2.4,11.6Hz),2.83(1H,d,J=2.4Hz),2.41-2.50(3H,m),1.47-2.06(10H,m),1.25-1.34(1H,m),0.83(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:202.7,195.8,145.9,145.7,126.4,119.3,73.9,69.2,57.0,53.2,44.0,41.1,37.1,35.7,35.5,35.4,26.8,26.1,24.3,23.7,21.7.HR-EI-MS m/z326.1879[M]⁺(C₂₁H₂₆O₃,calcd326.1882).

化合物（21）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.93(1H,d,J=1.6Hz),5.25(1H,d,J=2.0Hz),5.24(1H,d,J=1.6Hz),4.12(1H,d,J=5.2Hz),3.86(1H,dd,J=3.2,11.6Hz),3.30(1H,dd,J=1.6,11.6Hz),2.81(1H,m),2.25-2.35(2H,m),2.02-2.08(1H,m),1.48-1.91(10H,m),1.17-1.27(3H,m),0.69(3H,s).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:200.7,148.0,117.4,96.3,68.9,66.1,49.1,43.7,43.4,40.3,36.7,34.7,33.7,29.6,27.3,24.5,24.1,23.5,22.5,20.8.HR-EI-MS m/z314.1882[M]⁺(C₂₀H₂₆O₃,calcd314.1882).

化合物（22）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.08(1H,s),5.39(1H,s),2.71-2.91(3H,m),2.41-2.22(1H,m),2.23(1H,t,J=9.6Hz),1.47-2.13(12H,m),1.30(3H,s).₁₃C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:203.5,194.9,170.5,169.8,146.1,120.2,57.2,45.8,45.5,44.8,44.0,39.1,37.3,35.7,35.4,26.8,25.9,24.9,21.7,19.9.HR-EI-MS m/z342.1456[M]⁺(C₂₀H₂₂O₅,calcd342.1467).

化合物（23）：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.00(1H,d,J=1.6Hz),5.29(1H,d,J=1.6Hz),4.81(1H,d,J=14.0Hz),4.16(1H,dd,J=6.4,12.4Hz),4.02(1H,d,J=12.4Hz),3.95(1H,d,J=14.0Hz),3.61(1H,brs),2.82(1H,m),2.74(1H,d,J=2.0Hz),2.18-2.26(3H,m),1.71-1.86(6H,m),1.66(1H,d,J=14.0Hz),1.43-1.55(3H,m),1.35(1H,ddd,J=4.0,14.4Hz),1.79(1H,d,J=12.0Hz),0.85-0.91(4H,m).¹³C-NMR(100MHz,CDCl₃)δ:204.8,146.7,117.9,77.2,71.2,58.2,51.3,50.4,46.0,38.8,38.5,36.1,35.4,30.9,28.7,28.1,25.3,25.0,19.1,15.5.HR-EI-MS m/z380.1651[M]⁺(C₂₀H₂₈O₅S,calcd380.1657).

化合物（24）：¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ:6.14(1H,d,J=2.4Hz),6.04(1H,d,J=1.2Hz),5.80(1H,d,J=2.4Hz),5.36(1H,d,J=1.2Hz),4.86(1H,d,J=13.6Hz),4.02(1H,brs),3.87(1H,d,J=13.6Hz),2.87(1H,m),2.65(1H,m),2.22-2.36(2H,m),1.15-2.14(15H,m).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:198.7,195.5,146.3,146.1,124.2,119.7,66.4,57.7,56.2,54.5,45.2,38.5,37.9,35.8,32.5,31.7,29.2,27.3,26.9,22.4,18.1.HR-EI-MS m/z390.1512[M]⁺(C_21<

15-氧代绣线菊内酯衍生物及其制备方法和应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。