专利摘要

本发明涉及一种从维生素B2发酵液提取维生素B2的方法。以往生产中大多采用酸溶法提取维生素B2，该提取方法工艺流程长、能耗大，一次溶解、分离、结晶的纯度仅60％～70％，多次纯化收率较低。本发明提出了一种新的维生素B2提取方法，通过加入氯化钙、磷酸氢二钠和聚丙烯酸钠进行絮凝，过滤后加入双氧水沉析，然后结晶、重结晶。本发明突破旧框框，采用碱溶法，方法简单，流程短，运行成本低；提取过程对环境无污染。采用本发明，维生素B2的提取收率为85％～87％，产品纯度可达98％～100％。

权利要求

1.一种维生素B₂提取方法，其特征在于它由下列步骤组成：

(1)按1∶1加水稀释维生素B₂发酵液，用液碱调节pH值至11.8，使之溶解；

(2)加入氯化钙、磷酸氢二钠和聚丙烯酸钠进行絮凝并过滤；其中氯化钙的加入量为料液量的0.4％，磷酸氢二钠的加入量为料液量的0.4％，聚丙烯酸钠应先配成0.5％的水溶液再加入，0.5％聚丙烯酸钠水溶液的加入量为料液量的2.5％；

(3)在所得滤液中加入0.20％～0.25％的双氧水，通空气鼓泡搅拌，同时用盐酸调节pH值至4.0～4.2，使固体析出；

(4)静止沉淀，将上层清液倒去约一半，下层物料加热至沸腾，再迅速冷却，过滤，得到维生素B₂粗结晶；

(5)在所得维生素B₂粗结晶中加水，用液碱调节pH值至11.8，使之溶解，再过滤；

(6)重复步骤(3)和步骤(4)，得到维生素B₂重结晶；

(7)干燥、粉碎、过筛。

2.根据权利要求1所述的维生素B₂提取方法，其特征在于在所述步骤(5)中水的加入量为粗结晶的13倍至15倍。

3.根据权利要求1或2所述的维生素B₂提取方法，其特征在于在所述步骤(3)中通空气鼓泡的时间为30min～1hr；在所述步骤(4)中静止沉淀的时间为2hr。

4.根据权利要求1或2所述的维生素B₂提取方法，其特征在于在所述步骤(7)中的干燥是在60℃下烘干，过筛采用80目筛。

5.根据权利要求3所述的维生素B₂提取方法，其特征在于在所述步骤(7)中的干燥是在60℃下烘干，过筛采用80目筛。

说明书

                       技术领域

本发明属于一种化学提取技术，特别是涉及一种从维生素B₂发酵液提取维生素B₂的方法。

                       背景技术

维生素B₂是动物新陈代谢必需而自身不能合成的有机物。维生素B₂主要用作畜禽饲料添加剂，它可以提高饲料转化率，促进动物生长，提高动物的繁殖能力以及抵抗恶劣环境的能力，并具有抗氧化防肿瘤等多种保健功能和治疗作用。文献及教科书都讲到维生素B₂遇碱易被破坏，所以对维生素B₂提取的研究大多集中在以强酸溶解维生素B₂的方法；生产中亦采用酸溶法提取维生素B₂。该提取方法工艺流程长、能耗大，一次溶解、分离、结晶的纯度仅60％～70％，多次纯化收率较低。由此造成企业设备投入多，生产成本高，且环境污染大。

                      发明内容

本发明的目的在于克服上述技术存在的不足，提出一种新的维生素B₂提取方法，以提高维生素B₂的提取收率，降低维生素B₂的提取过程生产成本。

本发明的目的是通过下列技术方案实现的：一种维生素B₂提取方法，它由下列步骤组成：

(1)按1∶1加水稀释维生素B₂发酵液，用液碱调节pH值至11.8，使之溶解；

(2)加入氯化钙、磷酸氢二钠和聚丙烯酸钠进行絮凝并过滤；其中氯化钙的加入量为料液量的0.4％，磷酸氢二钠的加入量为料液量的0.4％，聚丙烯酸钠应先配成0.5％的水溶液再加入，0.5％聚丙烯酸钠水溶液的加入量为料液量的2.5％；

(3)在所得滤液中加入0.20％～0.25％的双氧水，通空气鼓泡搅拌，同时用盐酸调节pH值至4.0～4.2，使固体析出；

(4)静止沉淀，将上层清液倒去约一半，下层物料加热至沸腾，再迅速冷却，过滤，得到维生素B₂粗结晶；

(5)在所得维生素B₂粗结晶中加水，用液碱调节pH值至11.8，使之溶解，再过滤；

(6)重复步骤(3)和步骤(4)，得到维生素B₂重结晶；

(7)干燥、粉碎、过筛。

在所述步骤(5)中水的加入量为粗结晶的13倍至15倍。

在所述步骤(3)中通空气鼓泡的时间为30min～1hr；在所述步骤(4)中静止沉淀的时间为2hr。

在所述步骤(7)中的干燥是在60℃下烘干，过筛采用80目筛。

采用HPLC方法进行分析跟踪发现：维生素B₂在合适的碱性条件下，不仅溶解度大，还显示出一定的稳定性；维生素B₂在pH为11.8的溶液中溶解度最高，且在该pH值下室温放置2天，效价下降率仅为7.9％，具有一定的稳定性。因此，本发明突破旧框框，采用碱溶法，方法简单，流程短，运行成本低；提取过程“三废”少，对环境无污染。采用本发明，维生素B₂的提取收率为85％～87％，产品纯度可达98％～100％。产品质量符合《(中国兽药典》2000年版一部标准，其主要指标为：

性状：橙黄色结晶性粉末，微臭，味微苦；

鉴别：

(1)化学反应呈正反应，

(2)紫外吸收，在267nm、375nm与444nm处有最大吸收；375nm的吸收度与267nm的吸收度的比值为0.31～0.33；444nm的吸收度与267nm的吸收度的比值为0.36～0.39；

检查：

(1)酸碱度：符合规定，

(2)感光黄素：不大于0.016，

(3)干燥失重：不大于1.0％，

(4)炽烧残渣：不大于0.2％；

含量测定：按干燥品计算，含(C₁₇H₂₀N₄O₆)为98.0％～102.0％。

                  具体实施方式

实施例1：

取1000ml维生素B₂发酵液(效价18212μg/ml)，加入1000ml水稀释，用30％的液碱调节pH值至11.8，搅拌30min；加入氯化钙8g、磷酸氢二钠8g和5％聚丙烯酸钠溶液50ml进行絮凝，然后过滤；所得滤液加入2.5mlH₂O₂，用盐酸调节pH至4.2，并通空气鼓泡搅拌30min；静止2hr，将上层清液倒掉一半，剩余料液加热煮沸15min，冷却至室温，过滤滤饼用纯水洗净，得湿粗品18.5g；用250ml水溶解，再用30％的液碱调节pH至11.8，使物料溶解，过滤；滤液再加入H₂O₂2.5ml，并用盐酸调节pH至4.2，通空气鼓泡搅拌30min；静止2hr，加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得成品；60℃烘干，粉碎，过80目筛，测定含量为99.8％，收率为86.5％。

实施例2：

取1000ml发酵液(效价17924μg/ml)，加入1000ml水稀释，用30％的液碱调节pH值至11.8，搅拌30min；加入氯化钙8g、磷酸氢二钠8g和5％聚丙烯酸钠溶液50ml进行絮凝，然后过滤；所得滤液加入2.0mlH₂O₂，用盐酸调节pH至4.0并通空气鼓泡搅拌1hr；静止2hr，将上层清液倒掉一半，剩余料液加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得湿粗品17.5g；再用250ml水溶解，用30％的液碱调节pH至11.8，使物料溶解，过滤；滤液再加入H₂O₂2.0ml并用盐酸调节pH至4.0，通空气鼓泡搅拌1hr；静止2hr，加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得成品；60℃烘干，粉碎，过80目筛，测定含量为99.3％，收率为85.2％。

实施例3：

取1000ml发酵液(效价18122μg/ml)，加入1000ml水稀释，用30％的液碱调节pH值至11.8，搅拌30min；加入氯化钙8g、磷酸氢二钠8g和5％聚丙烯酸钠溶液50ml进行絮凝，然后过滤；所得滤液加入2.2mlH₂O₂，用盐酸调节pH至4.1并通空气鼓泡搅拌40min；静止2hr，将上层清液倒掉一半，剩余料液加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得湿粗品17.7g；再用230ml水溶解，用30％的液碱调节pH至11.8，使物料溶解，过滤；滤液再加入H₂O₂2.2ml并用盐酸调节pH至4.0，通空气鼓泡搅拌1hr；静止2hr，加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得成品；60℃烘干，粉碎，过80目筛，测定含量为98.8％，收率为85.0％。

实施例4：

取1000ml发酵液(效价17996μg/ml)，加入1000ml水稀释，用30％的液碱调节pH值至11.8，搅拌30min；加入氯化钙8g、磷酸氢二钠8g和5％聚丙烯酸钠溶液50ml进行絮凝，然后过滤；所得滤液加入2.4mlH₂O₂，用盐酸调节pH至4.0并通空气鼓泡搅拌1hr；静止2hr，将上层清液倒掉一半，剩余料液加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得湿粗品17.6g；再用264ml水溶解，用30％的液碱调节pH至11.8，使物料溶解，过滤；滤液再加入H₂O₂2.4ml并用盐酸调节pH至4.0，通空气鼓泡搅拌1hr；静止2hr，加热煮沸15min，冷却至室温，过滤，得成品；60℃烘干，粉碎，过80目筛，测定含量为99.0％，收率为85.1％。

维生素B2提取方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。