专利摘要
一种大豆基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于裂解细胞的裂解 液，所述裂解液包括高盐高PH提取液和2％的β‑巯基乙醇；其中所述高盐高PH提取液包括总 溶液以及十二烷基硫酸钠； 所述总溶液包括：终浓度为35mM的六水合氯化镁，终浓度为400mM的氯化钾，终浓度为 200mM的蔗糖，终浓度为200mM的Tris‑base，终浓度为25mM的EDTA·2Na；将总溶液配制完成 后，调节pH至9.0，然后加入质量与所述总溶液体积比为10％的十二烷基硫酸钠，即得所述 高盐高PH提取液。 2.如权利要求1所述的大豆基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用 于去除杂质的清洗液；以及用于洗脱DNA的洗脱液。 3.如权利要求2所述的大豆基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，所述清洗液包括酚氯 仿异戊醇，氯仿异戊醇，醋酸钠，无水乙醇，75％乙醇；所述酚氯仿异戊醇中苯酚、氯仿、异戊 醇的体积比为25：24：1；所述氯仿异戊醇中氯仿、异戊醇的体积比为24：1。 4.如权利要求2所述的大豆基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，所述洗脱液包括10mM， pH＝8.0的Tris或者pH＝8.0的超纯水中的任意一种。 5.一种大豆基因组DNA提取方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： 步骤1、溶液的配制：分别配制好裂解液，清洗液以及洗脱液；所述裂解液包括高盐高PH 提取液和2％的β‑巯基乙醇；所述高盐高PH提取液包括总溶液以及十二烷基硫酸钠；所述总 溶液包括：终浓度为35mM的六水合氯化镁，终浓度为400mM的氯化钾，终浓度为200mM的蔗 糖，终浓度为200mM的Tris‑base，终浓度为25mM的EDTA·2Na，将总溶液配制完成后，调节pH 至9.0，然后加入质量与所述总溶液体积比为10％的十二烷基硫酸钠，即得所述高盐高PH提 取液； 步骤2、原材料的处理：将大豆幼嫩叶片或大豆种子经处理得到大豆粉； 步骤3、DNA的提取：在大豆粉中加入所述高盐高PH提取液，颠倒混匀后加入所述2％的 β‑巯基乙醇，液氮冷冻后37℃水浴，待其溶解为冰水混合物后振荡 ，再反复冻融2～6次； 步骤4、杂质的去除：加入清洗液去除杂质，其中所述清洗液包括：酚氯仿异戊醇；氯仿 异戊醇；3M，pH5.2的醋酸钠；3M，pH5.6的醋酸钠；无水乙醇；75％乙醇；所述酚氯仿异戊醇中 苯酚、氯仿、异戊醇的体积比为25：24：1；所述氯仿异戊醇中氯仿、异戊醇的体积比为24：1； 步骤5、大豆基因组DNA的溶解：杂质去除后风干，加入洗脱液溶解即可。 6.如权利要求5所述大豆基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤2中，将采集的大 豆幼嫩叶片放入离心管中，放入0.5cm直径的钢珠，放入液氮中冷冻后在高通量研磨仪上打 碎，得到大豆粉放入‑80℃冰箱保存；或挑取干燥的大豆种子，打碎，过筛后得到大豆粉常温 保存备用。 7.如权利要求5所述大豆基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤4具体包括： S1、加入所述酚氯仿异戊醇，剧烈震荡后静置分层，12000rmp，4℃离心10分钟； S2、吸取上清，加入所述氯仿异戊醇，剧烈震荡后静置分层，12000rmp，4℃离心10分钟； 再重复此步骤一次； S3、取上清，加入1/10体积的所述3M，pH5.2的醋酸钠，混匀，然后加入2.5倍溶液体积预 冷乙醇，混匀，静置5分钟，沉淀核酸；8000rpm离心5分钟，弃上清，保留沉淀； S4、往沉淀中加入所述3M，pH5.6的醋酸钠，溶解沉淀5分钟，然后8000rpm 离心5分钟； S5、将上清转入新的离心管，加入溶液3倍体积预冷的无水乙醇，静置5分钟，待DNA充分 沉淀后，12000rpm离心20分钟； S6、弃上清，用75％乙醇洗涤DNA 2次。 8.如权利要求5所述大豆基因组DNA提取方法，其特征在于，所述步骤3中，所述振荡采 用高通量研磨仪，震荡时间为3分钟，振荡频率为50HZ/min。
一种大豆基因组DNA提取试剂盒及提取方法专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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