专利摘要

本发明属于医药化工技术领域，公开了一种大环内酯类抗菌化合物及其制备方法与应用。所述大环内酯类抗菌化合物的结构如式I所示，其中，n等于1或2；X为碳或者氮原子；R选自H、C1～6的烷基、硝基、C1～6的烷氧基、卤素取代基和C1～6的卤代烷基中的任意一种。其合成路线是将氟红霉素先在盐酸缓冲液中反应，反应产物再依次与苯甲酸酐、三光气和R取代芳基酸或杂环芳基酸反应，最后在醇溶剂中回流反应，得到大环内酯类抗菌化合物。本发明的制备方法合成路线简单，合成产率高；所得产物抗菌性能好，对大环内酯耐药菌的抑制活性高，具有良好的应用前景。

权利要求

1.一种大环内酯类抗菌化合物，其特征在于，所述大环内酯类抗菌化合物的结构如式I所示：

其中，n等于1或2；X为碳或者氮原子；R选自H、C1～6的烷基、硝基、C1～6的烷氧基、卤素取代基和C1～6的卤代烷基中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的一种大环内酯类抗菌化合物，其特征在于：所述R选自H、C1～3的烷基、硝基、C1～3的烷氧基、氟取代基、氯取代基和C1～3的氟/氯代烷基中的任意一种。

3.根据权利要求2所述的一种大环内酯类抗菌化合物，其特征在于：所述R选自H、甲基、硝基、甲氧基、氟取代基、氯取代基和三氟甲基中的任意一种。

4.根据权利要求3所述的一种大环内酯类抗菌化合物，其特征在于：所述的大环内酯类抗菌化合物具有如下I₁～I₁₁任一项所示的结构式：

5.权利要求1～4任一项所述的大环内酯类抗菌化合物的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将氟红霉素加入盐酸缓冲液中搅拌反应，得到化合物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基氟红霉素；

(2)三乙胺催化下，将3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基氟红霉素2与苯甲酸酐反应，得到化合物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-2’-苯甲酰基氟红霉素；

(3)在吡啶和三乙胺存在下，3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-2’-苯甲酰基氟红霉素与三光气反应，得到3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素；

(4)在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶催化下，3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素与R取代芳基酸或杂环芳基酸反应，得到3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素或3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代杂环芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素；

(5)将3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素或3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代杂环芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素于醇溶剂中回流反应，得到大环内酯类抗菌化合物。

6.根据权利要求5所述的一种大环内酯类抗菌化合物的合成方法，其特征在于：步骤(1)中所述的盐酸缓冲液的pH为1.5；步骤(2)中所述的反应采用四氢呋喃作为反应溶剂；步骤(3)和步骤(4)中所述的反应采用二氯甲烷作为反应溶剂；步骤(5)中所述的醇溶剂是指甲醇。

7.权利要求1～4任一项所述的大环内酯类抗菌化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于，所述应用过程为：将大环内酯类抗菌化合物与药用辅料混合，制成片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、糖浆剂或注射剂。

8.根据权利要求7所述的大环内酯类抗菌化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述的药用辅料包括赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味剂、稀释剂和溶剂中的至少一种。

9.根据权利要求7所述的大环内酯类抗菌化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述的赋形剂包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇、玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉、结晶纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、阿拉伯胶、右旋糖酐、偏硅酸镁铝、磷酸钙或碳酸钙；所述的粘合剂包括明胶、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇；所述的崩解剂包括羧甲基纤维素钠或聚乙烯吡咯烷酮；所述的润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、鲸蜡、硼酸、苯甲酸钠或亮氨酸；所述的稳定剂包括对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；所述的矫味剂包括甜味剂、酸味剂或香料；所述的稀释剂和溶剂包括水、乙醇或甘油。

说明书

技术领域

本发明属于医药化工技术领域，具体涉及一种大环内酯类抗菌化合物及其制备方法与应用。

背景技术

自1952年由礼来公司开发的首个大环内酯类抗生素红霉素A上市至今，60多年全球医药企业和各大研究所对该类抗生素的研究就一直没有停止过，大致可以分为三个阶段：(1)50年代～80年代的为第一代大环内酯类抗生素时代，有红霉素、地红霉素、麦白霉素、交沙霉素、乙酰螺旋霉素、麦迪霉素。主要用于治疗由多种革兰氏阳性菌引起的呼吸道感染等疾病，对衣原体、支原体、弯曲杆菌、军团菌等活性较强。这类化合物疗效确切、无严重的不良反应，但是对胃酸不稳定，生物利用度低，胃肠道反应较多；(2)80年代～90年代的为第二代大环内酯类抗生素时代，主要有克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素、罗他霉素、美欧卡霉素、氟红霉素等，这一代药物改善了第一代大环内酯类抗生素的酸不稳定性的缺点，提高了生物利用度，抗菌活性更强，毒性低，副作用少，延长了半衰期，是广泛用于呼吸道感染的一线药物，但第二代大环内酯类抗生素并没有提高对大环内酯耐药菌的抑制活性，因而随着耐药菌的迅速增多，第二代大环内酯类抗生素面临新的挑战；(3)90年代至今主要发展了第三代大环内酯类抗生素，以泰利霉素为代表，其保留了对敏感菌的抗菌活性，且对第一、第二代大环内酯类抗生素耐药菌也有良好的活性，抗菌谱更广。该类抗生素的典型结构特征主要表现在：1)3-克拉定糖脱除，并将游离出的羟基氧化为羰基。研究认为3-克拉定糖是诱导细菌对14元大环内酯类耐药的共性原因(erm基因编码rRNA甲基化酶)，将克拉定糖脱除后，细菌耐药性明显降低，但也伴随抗菌活性的减弱；2)11，12-羟基环合，形成氨基甲酸酯环，提高骨架结构的稳定性，同时该基团与核糖体有直接的相互作用，可增强其对红霉素敏感及耐药菌的抗菌活性。但IV期临床研究发现，泰利霉素具有严重的肝毒性，出于安全性方面的考虑，美国FDA已对泰利霉素的适应症进行了限制，仅保留社区获得性肺炎，近期报道显示该药在全球大多数国家已停用。

据医药经济报最新报道显示(2015.05)，全球范围的耐药菌状况令人担忧，如金黄色葡萄球菌感染对甲氧西林的耐药状况(MRSA)在非洲、美洲、欧洲等全球大部分地区的比例已超过60％，我国MRSA对抗菌素的耐药率均超过65％，如β-内酰胺类为78％，喹诺酮类为75-85％，大环内酯类为88％。因此，有必要加快新的抗生素研究，特别的，基于第二、第三代大环内酯的药代及抗菌活性方面的优势，设计并筛选具有新化学结构的化合物，提高对大环内酯耐药菌的抑制活性，解决多重耐药问题，为临床提供更有效的药物。

发明内容

为了解决以上现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种大环内酯类抗菌化合物。

本发明的另一目的在于提供上述大环内酯类抗菌化合物的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述大环内酯类抗菌化合物在制备抗菌药物中的应用。

本发明目的通过以下技术方案实现：

一种大环内酯类抗菌化合物，其结构如式I所示：

其中，n等于1或2；X为碳或者氮原子；R选自H、C1～6的烷基、硝基、C1～6的烷氧基、卤素取代基和C1～6的卤代烷基中的任意一种；优选地，R选自H、C1～3的烷基、硝基、C1～3的烷氧基、氟取代基、氯取代基和C1～3的氟/氯代烷基中的任意一种；更优选地，R选自H、甲基、硝基、甲氧基、氟取代基、氯取代基和三氟甲基中的任意一种。

优选地，所述的大环内酯类抗菌化合物具有如下I₁～I₁₁任一项所示的结构式：

上述大环内酯类抗菌化合物的合成方法，包括如下步骤：

(1)将氟红霉素加入盐酸缓冲液中搅拌反应，得到化合物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-氟红霉素；

(2)三乙胺催化下，将3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-氟红霉素与苯甲酸酐反应，得到化合物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-2’-苯甲酰基-氟红霉素；

(3)在吡啶和三乙胺存在下，3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-2’-苯甲酰基-氟红霉素与三光气反应，得到3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基-氟红霉素；

(4)在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)催化下，3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基-氟红霉素与R取代芳基酸或杂环芳基酸反应，得到3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基-氟红霉素或3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代杂环芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基-氟红霉素；

(5)将3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基-氟红霉素或3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-R取代杂环芳基酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基-氟红霉素于醇溶剂中回流反应，得到大环内酯类抗菌化合物。

优选地，步骤(1)中所述的盐酸缓冲液的pH为1.5；步骤(2)中所述的反应采用四氢呋喃作为反应溶剂；步骤(3)和步骤(4)中所述的反应采用二氯甲烷作为反应溶剂；步骤(5)中所述的醇溶剂是指甲醇。

上述反应合成路线如图1所示，图中a～e表示如下条件：a)HCl(pH＝1.5)；b)苯甲酸酐，三乙胺，THF；c)：三光气，吡啶，三乙胺，CH₂Cl₂；d)：RAr(CH₂)_nCOOH，EDCI，DMAP，CH₂Cl₂；e)：CH₃OH，回流。

其中，氟红霉素可以采用任何公知的方法获得，例如，可参考Antimicrobial erythromycin derivatives[M]，Abbott Laboratories，1972，9；Macrolide antibiotics and pharmaceutical compositions containing them[M]，Pierrel S.p.A.，Italy，1982，62；Semisynthetic macrolide antibiotics，intermediate compounds for their preparation and related pharmaceutical compositions containing them[M]，Pierrel S.p.A.，Italy，1982，57；Synthesis of macrolide antibiotics[M]，Pierrel S.p.A.，Italy，1983，31；(8S)-8-Fluoroerythromycins[M]，Pierrel S.p.A.，Italy，1985，8；8-Fluoroerythronolide[M]；Daikin Industries，Ltd.，Japan，1986，11。

上述大环内酯类抗菌化合物在制备抗菌药物中的应用，所述应用过程为：将上述大环内酯类抗菌化合物与药用辅料混合，制成片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、糖浆剂或注射剂。

所述的药用辅料包括赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味剂、稀释剂和溶剂中的至少一种。

所述的赋形剂包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇、玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉、结晶纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、阿拉伯胶、右旋糖酐、偏硅酸镁铝、磷酸钙或碳酸钙；所述的粘合剂包括明胶、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇；所述的崩解剂包括羧甲基纤维素钠或聚乙烯吡咯烷酮；所述的润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、鲸蜡、硼酸、苯甲酸钠或亮氨酸；所述的稳定剂包括对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；所述的矫味剂包括甜味剂、酸味剂或香料；所述的稀释剂和溶剂包括水、乙醇或甘油。

本发明基于的原理为：以氟红霉素为基本骨架，拟在保持其半衰期延长的优势基础上，进一步提高其抗菌活性，进行如下结构变化操作：1)3-克拉定糖脱除；2)3-羟基酯化，引入芳(杂)环；3)11,12-羟基环合形成碳酸酯，可以达到降低细菌耐药诱导性和增强对耐药菌的抑制活性的双重效果。

本发明的制备方法及所得到的产物具有如下优点及有益效果：

(1)本发明的大环内酯类抗菌化合物抗菌性能好，对大环内酯耐药菌的抑制活性高，可解决多重耐药问题；

(2)本发明的制备方法合成路线简单，合成产率高，具有良好的应用前景。

附图说明

图1为本发明大环内酯类抗菌化合物的合成路线图，(图中a～e表示如下条件：a)HCl(pH＝1.5)；b)苯甲酸酐，三乙胺，THF；c)：三光气，吡啶，三乙胺，CH₂Cl₂；d)：RAr(CH₂)_nCOOH，EDCI，DMAP，CH₂Cl₂；e)：CH₃OH，回流)。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₁的合成：

(1)将氟红霉素(70.0g，93mmol)溶于1200mL pH为1.5盐酸缓冲液中，在室温下搅拌反应24h。溶液浓缩至200mL，加氨水调节pH至9。乙酸乙酯萃取3次(150mL×3)，有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(100mL×3)，饱和食盐水溶液(100mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸去溶剂，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝20:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基氟红霉素(40.0g，72％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:118-120℃；¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:5.11(d,J＝7.8Hz,2H,H-1',13),4.48(d,J＝7.3Hz,1H,H-6-OH),4.12(s,1H,H-2'-OH),4.04(s,1H,H-11),3.69(d,J＝10.6Hz,2H,H-11-OH,12-OH),3.56(s,1H,H-3-OH),3.42(dd,J＝10.3,6.0Hz,1H,H-3),3.23-3.16(m,1H,H-5'),3.03(dt,J＝13.1,7.5Hz,2H,H-5,10),2.83(dt,3H,H-2,7a,2'),2.41(t,J＝12.3Hz,1H,H-3'),2.22(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.01-1.92(m,1H,H-7b),1.81(t,J＝12.9Hz,2H,H-4,13-CH_2aCH₃),1.75(s,3H,H-6-CH₃),1.61(d,J＝12.3Hz,1H,H-4'a),1.40(d,J＝14.1Hz,2H,H-13-CH_2bCH₃,4'b),1.19(s,3H,12-CH₃),1.16-1.11(m,3H,10-CH₃),1.10-0.99(m,12H,H-2-CH₃,4-CH₃,5'-CH₃,8-CH₃),0.73(t,J＝7.1Hz,3H,H-13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3460,2977,2881,2790,2362,1721,1642,1460,1382,1172,1075,981,835,701,625,563；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₂₉H₅₂FNO₁₀:594.3654；Found:594.3672。

(2)将步骤(1)所得产物(40.0g，67.3mmol)溶于250mL无水四氢呋喃中，0℃下加入苯甲酸酐(18.5g，81.8mmol)，搅拌，0.5h内缓慢滴加三乙胺9.50mL，自然升温至室温反应48h。反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(100mL)，搅拌1h后静置，分层，留有机相。有机层依次用饱和碳酸氢钠溶液(60mL×3)，饱和食盐水溶液(60mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸去溶剂，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝40:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-2’-苯甲酰基氟红霉素(42.0g，89％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:205-208℃；¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:7.99-7.95(m,2H,H-2”,6”),7.67-7.62(m,1H,H-4”),7.53(t,J＝7.6Hz,2H,H-3”,5”),5.25(d,J＝6.8Hz,1H,H-1'),5.06(dd,J＝11.1,2.3Hz,1H,H-13),4.87-4.80(m,2H,H-11-OH,12-OH),4.46(s,1H,H-3-OH),4.08(s,1H,H-11),3.77(d,J＝1.6Hz,1H,H-3),3.58-3.49(m,1H,H-5'),3.23-3.16(m,1H,H-2'),2.82(dd,J＝14.1,9.2Hz,2H,H-2,7a),2.38(dd,J＝10.4,6.7Hz,1H,H-3'),2.16(d,J＝5.5Hz,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),1.97-1.86(m,1H,H-4),1.77(dd,J＝14.4,6.7Hz,2H,H-13-CH_2aCH₃,7b),1.50-1.37(m,4H,H-H-13-CH_2bCH₃,6-CH₃),1.35-1.27(m,5H,H-8-CH₃),1.22-1.15(m,4H,H-10-CH₃),1.08-1.00(m,7H,H-2-CH₃,5'-CH₃,4'),0.86(d,J＝8.5Hz,3H,H-4-CH₃),0.69(d,J＝7.4Hz,3H,H-13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3469,2977,2932,2875,2784,2362,1727,1638,1456,1381,1272,1168,1058,1000,895,838,712,637,586,464；ESI-MS(m/s):697.73。

(3)将步骤(2)所得产物(42.0g，60.3mmol)溶于250mL无水二氯甲烷，0℃下加入吡啶2.1mL，缓慢滴加固体三光气(21.5g，72.4mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)，再缓慢滴加三乙胺30mL。搅拌5.5h，向反应瓶中加入少量的碎冰块终止反应。有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(100mL×3)，饱和食盐水溶液(100mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸去溶剂，硅胶柱层析(展开剂V_石油醚/V_乙酸乙酯＝1:1)，得淡黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-羟基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素(35.0g，80％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:120-122℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.09(d,J＝7.8Hz,2H,H-2”,6”),7.67(d,J＝7.4Hz,1H,H-4”),7.51(t,J＝7.3Hz,2H,H-3”,5”),5.32(s,1H,H-1'),4.91(d,J＝9.3Hz,1H,H-13),4.86(s,1H,H-11),4.75(d,J＝6.6Hz,1H,H-3-OH),3.78(d,J＝16.2Hz,2H,H-3,5'),3.63(s,1H,H-6-OH),3.24(s,1H,H-5),2.79(dd,J＝25.1,3.7Hz,7H,H-3'-N-(CH₃)₂,7a),2.61(s,1H,H-2),2.36(s,1H,H-3'),2.24(dd,J＝23.0,13.8Hz,1H,H-13-CH_2aCH₃),2.05(s,1H,H-2'),1.95(d,J＝7.0Hz,1H,H-H-13-CH_2bCH₃),1.67(s,3H,H-6-CH₃),1.60(d,J＝12.4Hz,7H,H-8-CH₃,10-CH₃,4'a),1.47(s,3H,H-12-CH₃),1.13(d,J＝6.6Hz,3H,H-5'-CH₃),0.84(dd,J＝15.1,7.5Hz,7H,H-2-CH₃,4-CH₃,4'b),0.77(d,J＝7.0Hz,3H,H-13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3476,2978,2881,2785,2361,1723,1642,1455,1379,1273,1170,1124,1053,982,893,839,712,634,571,486；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₇H₅₄FNO₁₂:724.3708；Found:724.3726。

(4)将步骤(3)所得产物(1.00g，1.38mmol)溶于20mL二氯甲烷，0℃下，加入对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)，EDCI(0.33g，1.73mmol)，DMAP(0.017g，0.14mmol)，继续搅拌0.5h后升至室温，TLC监测反应。反应毕，向反应液中加入2mol/L的氢氧化钠溶液，调节pH至8。有机相依次用饱和的NH₄Cl溶液(30mL×3)，饱和食盐水溶液(30mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸去溶剂，硅胶柱层析(展开剂V_石油醚/V_乙酸乙酯＝1:1)，得黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-对硝基苯乙酰基-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素。

(5)将步骤(4)所得产物(0.4g，0.45mmol)溶于10mL甲醇中，回流10h，蒸去溶剂，加入20mL乙酸乙酯，2mol/L氢氧化钠溶液调节pH至8，有机相依次用饱和的NH₄Cl溶液(10mL×3)，饱和食盐水溶液(10mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸去溶剂，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝30:1)，得黄色固体化合物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-对硝基苯乙酰基-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₁(0.2g，18％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:92-95℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.17(d,J＝8.2Hz,2H,H-2”,6”),7.49(d,J＝8.2Hz,2H,H-3”,5”),5.80(d,J＝11.0Hz,1H,H-1'),4.95(d,J＝9.4Hz,1H,H-13),4.79(s,1H,H-11),4.23(d,J＝7.0Hz,1H,H-3),3.80(s,2H,H-7”-CH₂-),3.58(d,J＝6.3Hz,1H,H-5'),3.44(s,1H,H-5),3.34-3.13(d,J＝7.2Hz,2H,H-10,2'),2.76(d,J＝13.2Hz,1H,H-2),2.56(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.27(dd,J＝24.7,13.4Hz,2H,H-3',7a),2.09(dd,J＝13.2,6.5Hz,1H,H-7b),1.86(d,J＝11.6Hz,1H,H-4),1.73(d,J＝17.5Hz,3H,H-6-CH₃),1.63(s,2H,H-4'a,13-CH_2aCH₃),1.57(s,2H,H-4'b,13-CH_2bCH₃),1.49(s,3H,H-8-CH₃),1.38-1.23(m,6H,H-10-CH₃,12-CH₃),1.11(d,J＝6.8Hz,6H,H-2-CH₃,5'-CH₃),1.01-0.84(m,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3473,2926,2787,2452,2369,1803,1742,1606,1523,1460,1347,1240,1164,1108,1038,974,855,722,633,567,485；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅FN₂O₁₄:783.3716；Found:783.3732。

实施例2

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₂的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为对硝基苯丙酸(0.34g，1.73mmol)，得淡黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-对硝基苯丙酰基-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₂(0.4g，36％)产物鉴定数据如下：

m.p.:110-113℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.13(d,J＝8.1Hz,2H,H-2”,6”),7.40(d,J＝8.2Hz,2H,H-3”,5”),5.81(d,J＝10.7Hz,1H,H-1'),4.94(d,J＝9.2Hz,1H,H-13),4.82(s,1H,H-11),4.22(d,J＝7.0Hz,1H,H-3),3.84(dt,J＝13.2,6.6Hz,2H,H-7”-CH₂-),3.45(s,1H,H-5'),3.27-3.07(m,2H,8”-CH₂-),2.73(ddd,J＝23.8,16.4,9.2Hz,4H,H-2,2',10,5,),2.48(d,J＝31.8Hz,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.09(q,J＝6.5Hz,1H,H-3'),1.71(s,3H,H-6-CH₃),1.61(d,J＝23.1Hz,4H,H-4'b,4,7a,13-CH_2aCH₃),1.48(s,3H,H-8-CH₃),1.19(d,J＝7.2Hz,3H,H-4'a,7b,13-CH_2bCH₃),1.13(t,J＝7.0Hz,12H,H-2-CH₃,5'-CH₃,10-CH₃,12-CH₃),0.91(t,J＝6.9Hz,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3343,2977,2788,2614,2453,1804,1743,1608,1522,1461,1346,1243,1167,1108,1039,855,772,634,568；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₉H₅₇FN₂O₁₄:797.3872；Found:797.3892。

实施例3

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₃的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为2-氟苯乙酸(0.27g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝40:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(2-氟-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₃(0.25g，24％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:90-92℃；¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:7.68-7.65(m,2H,H-2”,6”),7.50(d,J＝7.8Hz,2H,H-3”,5”),5.86(s,1H,H-1'),5.59(dd,J＝10.0,1.4Hz,1H,H-13),4.88(dd,J＝9.8,3.3Hz,1H,H-2'-OH),4.60(s,1H,H-11),4.31(d,J＝4.0Hz,1H,H-3),4.10(d,J＝7.4Hz,1H,H-6-OH),3.84(t,J＝8.8Hz,3H,H-7”-CH₂-,5'),3.48(dd,J＝10.1,5.1Hz,1H,H-5),3.13(dd,J＝7.3,1.6Hz,1H,H-2'),3.05-2.98(m,1H,H-7a),2.72(dd,J＝26.1,13.7Hz,2H,H-10,2),2.21(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),1.99(d,J＝1.8Hz,1H,H-7b),1.96(d,J＝6.8Hz,1H,H-4'a),H-13-CH_2aCH₃),1.51(d,J＝8.4Hz,7H,H-6-CH₃,8-CH₃,13-CH_2aCH₃),1.39(s,3H,H-12-CH₃),1.17-1.12(m,4H,H-10-CH₃,13-CH_2bCH₃),0.98(dd,J＝16.5,7.0Hz,7H,H-4-CH₃,5'-CH₃),0.90-0.86(m,4H,H-2-CH₃,4),0.81(t,J＝7.4Hz,4H,H-13-CH_2bCH₃,4'b)；IR(KBr)ν:3449,2973,1801,1739,1591,1459,1384,1235,1164,1101,1038,973,758,641,540,465；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅F₂NO₁₂:756.3771；Found:756.3780。

实施例4

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₄的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为3-氟苯乙酸(0.27g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝40:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(3-氟-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₄(0.2g，20％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:98-100℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.24(s,1H,H-5”),6.97(t,J＝8.6Hz,3H,H-2”,3”,6”),5.75(d,J＝10.3Hz,1H,H-1'),4.96(d,J＝6.8Hz,1H,H-13),4.82(s,1H,H-11),4.18(d,J＝7.2Hz,1H,H-3),3.65(s,2H,H-7”-CH₂-),3.39(s,1H,H-5'),3.24-3.18(m,2H,H-5,2'),3.10(dd,J＝13.9,7.0Hz,2H,H-10,7a),2.78(d,J＝13.0Hz,1H,H-2),2.70(d,J＝9.4Hz,1H,H-3'),2.44(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.06(dd,J＝13.6,6.7Hz,1H,H-7b),1.77(dd,J＝20.9,7.8Hz,2H,H-4,4'a),1.63-1.55(m,4H,H-13-CH_2aCH₃,6-CH₃),1.46(s,3H,H-8-CH₃),1.31-1.22(m,8H,H-10-CH₃,12-CH₃,13-CH_2bCH₃-),1.10(d,J＝6.6Hz,6H,H-5'CH₃,2CH₃),0.94-0.89(m,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr)ν:3463,2977,2789,1804,1741,1621,1457,1384,1259,1166,1105,1039,772,714,637,569,519；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅F₂NO₁₂:756.3771；Found:756.3782。

实施例5

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₅的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为4-氟苯乙酸(0.27g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝40:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(4-氟-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₅(0.45g，45.8％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:95-98℃；¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.41-7.28(m,2H,H-2”,6”),7.24-7.08(m,2H,H-3”,5”),5.86(s,1H,H-1'),5.55(dd,J＝9.4,1.6Hz,1H,H-13),4.94-4.83(m,1H,H-2'-OH),4.61(s,1H,H-11),4.31(d,J＝3.6Hz,1H,H-3),4.16-3.96(m,2H,H-5',6-OH),3.80-3.69(m,2H,H-7”-CH₂-),3.50(dd,J＝9.4,6.0Hz,1H,H-5),3.27(d,J＝2.7Hz,1H,H-10),3.10(dt,J＝9.0,6.1Hz,1H,H-2'),3.06-2.98(m,1H,H-7a),2.74(t,J＝9.8Hz,1H,H-2),2.22(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.01-1.92(m,2H,H-7b,3'),1.71-1.62(m,2H,H-4,13-CH_2aCH₃),1.58-1.46(m,7H,H-6-CH₃,8-CH₃,4'a),1.39(s,3H,H-12-CH₃),1.17(dt,J＝6.1,5.5Hz,5H,H-4'b,10-CH₃,13-CH_2bCH₃),0.99(dt,J＝15.9,7.9Hz,6H,H-2-CH₃,5'-CH₃),0.86(dt,J＝14.7,6.7Hz,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3458,2975,2788,2344,1804,1742,1605,1512,1460,1385,1226,1165,1101,1038,971,799,717,644,567,518；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅F₂NO₁₂:756.3771；Found:756.3783。

实施例6

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₆的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为2-氯苯乙酸(0.30g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝35:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(2-氯-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₆(0.32g，30％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:99-101℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.37-7.34(m,2H,H-2”,6”),7.21-7.18(m,2H,H-3”,5”),5.76(dd,J＝10.1,1.4Hz,1H,H-1'),4.99(dd,J＝9.7,3.4Hz,1H,H-13),4.84(s,1H,H-11),4.16(d,J＝7.3Hz,1H,H-3),3.86(t,J＝3.2Hz,2H,H-7”-CH₂-),3.73(t,J＝4.9Hz,1H,H-5'),3.42(d,J＝2.3Hz,1H,H-5),3.33(d,J＝3.4Hz,1H,H-2'),3.10(ddd,J＝7.3,6.1,4.4Hz,2H,H-10,7a),2.84(dd,J＝13.0,2.3Hz,1H,H-2),2.50-2.41(m,1H,H-3'),2.32-2.26(m,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.06(q,J＝6.8Hz,1H,H-7b),1.64-1.56(m,6H,H-4,4'a,13-CH_2aCH₃,6-CH₃),1.46(s,3H,H-8-CH₃),1.25(d,J＝7.0Hz,6H,H-12-CH₃,10-CH₃),1.16-1.13(m,4H,H-5'-CH₃,13-CH_2bCH₃),1.09(dd,J＝11.7,7.0Hz,8H,H-2-CH₃,4-CH₃,4'b),0.92(t,J＝7.4Hz,3H,H-13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3465,2976,2878,2788,1804,1742,1649,1543,1458,1384,1248,1165,1106,1039,836,748,685,639,570,501；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅F₂NO₁₂:772.3475；Found:772.3482。

实施例7

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₇的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为3-氯苯乙酸(0.30g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝35:1)，得白色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(3-氯-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₇(0.28g，26％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:100-103℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.29(s,1H,H-5”),7.23-7.16(m,3H,H-2”,3”,6”),5.80-5.72(m,1H,H-1'),4.97(dd,J＝9.7,3.4Hz,1H,H-13),4.82(s,1H,H-11),4.16(d,J＝7.3Hz,1H,H-3),3.72(q,J＝7.0Hz,1H,H-5'),3.67(d,J＝8.7Hz,2H,H-7”-CH₂-),3.52-3.46(m,1H,H-5),3.40(d,J＝1.9Hz,1H,H-2'),3.17-3.06(m,2H,H-10,7a),2.81(dd,J＝13.0,2.6Hz,1H,H-2),2.51-2.41(m,1H,H-3'),2.28(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.07(q,J＝6.8Hz,1H,H-7b),1.65-1.55(m,9H,H-4,4'a,13-CH_2aCH₃,6-CH₃,8-CH₃),1.46(s,3H,H-12-CH₃),1.24(dd,J＝9.7,4.3Hz,4H,H-10-CH₃,13-CH_2bCH₃),1.15-1.09(m,7H,H-5'-CH₃,2-CH₃),0.97-0.88(m,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3467,2978,2880,2789,1804,1743,1638,1460,1385,1242,1165,1104,1039,973,806,762,637,568,500；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅ClFNO₁₂:772.3475；Found:772.3490。

实施例8

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₈的合成，制备方法同实施例1，将对硝基苯乙酸(0.31g，1.73mmol)替换为4-氯苯乙酸(0.30g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝35:1)，得淡黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(4-氯-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₈(0.38g，36％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:107-109℃；¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:7.38-7.34(m,2H,H-2”,6”),7.31-7.27(m,2H,H-3”,5'),5.85(d,J＝0.8Hz,1H,H-1'),5.56(dd,J＝9.6,1.8Hz,1H,H-13),4.88(dd,J＝9.8,3.4Hz,1H,H-2'-OH),4.61(s,1H,H-11),4.30(d,J＝4.1Hz,1H,H-3),4.08(d,J＝7.4Hz,1H,H-6-OH),3.71(d,J＝4.1Hz,2H,H-7”-CH₂-),3.48(dd,J＝9.3,6.1Hz,1H,H-5'),3.26(d,J＝2.6Hz,1H,H-5),3.15-3.09(m,1H,H-2'),3.02(ddd,J＝11.4,7.4,4.2Hz,1H,H-10),2.73(d,J＝12.4Hz,1H,H-2),2.22(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),1.96(q,J＝6.7Hz,1H,H-7a),1.69-1.62(m,2H,H-3',13-CH_2aCH₃),1.55-1.49(m,7H,H-6-CH₃,8-CH₃,4'a),1.40(s,3H,H-12-CH₃),1.25(dt,J＝16.7,7.0Hz,1H,H-4),1.15(d,J＝6.1Hz,3H,H-10-CH₃),1.11-1.06(m,2H,H-4'b,13-CH_2bCH₃),1.03(d,J＝7.3Hz,4H,H-5'-CH₃),0.96(d,J＝6.6Hz,3H,H-2-CH₃),0.89-0.79(m,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3473,2875,2879,2788,1804,1743,1638,1459,1384,1242,1165,1100,1039,973,807,761,635,566,499；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₈H₅₅ClFNO₁₂:772.3475；Found:772.3487。

实施例9

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₉的合成：

步骤(1)～(3)同实施例1；

(4)4-甲氧基苯乙酸(0.29g，1.73mmol)和三乙胺(0.24mL，1.73mmol)溶于10mL二氯甲烷，在-15℃下，缓慢滴加三甲基乙酰氯(0.21mL，1.73mmol)，搅拌0.5h后，缓慢滴加实施例1步骤(3)得到的产物(1g，1.38mmol)的二氯甲烷溶液(15mL)，加入DMAP(0.017g，0.14mmol)，EDCI(0.030g，0.14mmol)，继续搅拌并升至室温。反应完毕，加入2mol/L的氢氧化钠溶液，调节pH至8。有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(20mL×3)，饱和食盐水溶液(20mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸干溶剂，硅胶柱层析(展开剂V二_氯甲烷/V_甲醇＝1:1)，得黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(4-甲氧基-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-2’-苯甲酰基氟红霉素。

(5)将步骤(4)所得产物(0.44g，0.57mmol)溶于10mL甲醇中回流10h，蒸去溶剂，加入20mL乙酸乙酯，用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至8，有机相依次用饱和的NH₄Cl溶液(10mL×3)，饱和食盐水溶液(10mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，蒸去溶剂，硅胶柱层析(展开剂V二_氯甲烷/V_甲醇＝30:1)，得淡黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(4-甲氧基-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₉(0.24g，22％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:89-92℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.19(d,J＝8.6Hz,2H,H-2”,6”),6.80(d,J＝8.6Hz,2H,H-3”,5”),5.73(d,J＝10.2Hz,1H,H-1'),4.96(dd,J＝9.7,3.3Hz,1H,H-13),4.82(s,1H,H-11),4.13(d,J＝7.3Hz,1H,H-3),3.76(d,J＝4.4Hz,3H,H-4'-OCH₃),3.60(s,2H,H-7”-CH₂-),3.47(dd,J＝9.7,6.5Hz,1H,H-5'),3.37(d,J＝1.7Hz,2H,H-5),3.10(dt,J＝9.9,7.4Hz,3H,H-10,2,2'),2.80(dd,J＝13.0,2.4Hz,1H,H-7a),2.49-2.38(m,1H,H-3'),2.27(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.05(d,J＝6.9Hz,1H,H-7b),1.63-1.55(m,7H,H-6-CH₃,8-CH₃,13-CH_2aCH₃),1.44(s,3H,H-12-CH₃),1.22(d,J＝6.1Hz,4H,H-4'a,10-CH₃),1.10(dd,J＝12.3,7.0Hz,7H,H-2-CH₃,5'-CH₃,13-CH_2aCH₃),0.94-0.85(m,7H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃,4'b)；IR(KBr,cm-¹)ν:3514,3285,2979,2869,2663,1716,1632,1461,1384,1305,1167,1090,1018,874,805,760,696,640,587,467；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₉H₅₈FNO₁₃:768.3970；Found:768.3962。

实施例10

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₁₀的合成，制备方法同实施例9，将4-甲氧基苯乙酸(0.29g，1.73mmol)替换为4-三氟甲基苯乙酸(0.35g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝50:1)，得黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(4-三氟甲基-苯乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₁₀(0.30g，27.0％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:85-88℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.55(d,J＝8.4Hz,2H,H-2”,6”),7.44-7.40(m,2H,H-3”,5”),5.79(d,J＝10.0Hz,1H,H-1'),4.96(dd,J＝9.7,3.4Hz,1H,H-13),4.81(s,1H,H-11),4.16(d,J＝7.3Hz,1H,H-3),3.72(d,J＝7.0Hz,2H,H-7”-CH2-),3.52-3.47(m,1H,H-5'),3.42(d,J＝1.6Hz,1H,H-5),3.19-3.07(m,1H,H-2'),2.96(s,1H,H-10),2.84-2.78(m,1H,H-2),2.49-2.41(m,1H,H-3'),2.28(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.07(dd,J＝13.0,6.2Hz,1H,H-7b),1.66-1.57(m,7H,H-4,4'a,13-CH_2aCH₃,6-CH₃),1.46(s,3H,H-8-CH₃),1.25(dd,J＝10.0,4.0Hz,7H,H-12-CH₃,10-CH₃,13-CH_2bCH₃),1.13-1.08(m,7H,H-2-CH₃,5'-CH₃,4'b),0.96-0.87(m,6H,H-4-CH₃,13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3466,2978,2882,2790,1804,1742,1624,1460,1384,1328,1244,1166,1039,823,772,714,636,568,500；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₉H₅₅F₄NO₁₂:806.3739；Found:806.3745。

实施例11

本实施例大环内酯类抗菌化合物I₁₁的合成，制备方法同实施例9，将4-甲氧基苯乙酸(0.29g，1.73mmol)替换为3-吡啶乙酸(0.24g，1.73mmol)，硅胶柱层析(展开剂V_二氯甲烷/V_甲醇＝20:1)，得黄色固体产物3-脱(己吡喃葡萄糖基)-3-(3-吡啶乙酰基)-11,12-环碳酸酯-氟红霉素I₁₁(0.20g，22％)，产物鉴定数据如下：

m.p.:102-105℃；¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.45(s,1H,H-2”),8.00(d,J＝7.2Hz,2H,H-4”,6”),7.20(dd,J＝7.8,4.8Hz,1H,H-5”),5.76(d,J＝10.6Hz,1H,H-1'),5.06-5.00(m,1H,H-13),4.74(s,1H,H-11),4.48(d,J＝7.6Hz,1H,H-3),3.58(dd,J＝9.4,8.1Hz,4H,H-7”-CH₂-,5',5),3.07-2.96(m,1H,H-2'),2.92(d,J＝12.5Hz,1H,H-10),2.73(dd,J＝13.1,2.8Hz,1H,H-2),2.63(q,J＝7.3Hz,1H,H-3'),2.25(s,6H,H-3'-N-(CH₃)₂),2.04(s,2H,H-7a,4),1.81(dd,J＝23.6,8.1Hz,5H,H-8-CH₃,13-CH_2aCH₃,7b),1.68(s,3H,H-6-CH₃),1.61-1.56(m,4H,H-12-CH₃,4'a),1.30(d,J＝6.0Hz,3H,H-10-CH₃),1.25(t,J＝7.2Hz,3H,H-5'-CH₃),1.12(d,J＝6.7Hz,4H,H-2-CH₃,4'b),0.84(d,J＝7.8Hz,3H,H-4-CH₃),0.75(t,J＝7.4Hz,3H,H-13-CH₂CH₃)；IR(KBr,cm^-1)ν:3448,2977,2785,1802,1724,1669,1457,1385,1272,1165,1101,1035,975,804,772,713,636,569,509；ESI-HRMS(m/z)[M+H]⁺:calcd for C₃₇H₅₅FN₂O₁₂ 739.3817；Found:739.3817。

实施例1～11所得大环内酯类抗菌化合物MIC测定：

(1)实验方法：采用NCCL的标准平板二倍稀释法对化合物进行最小抑菌浓度(MIC)测定，判断化合物的抗菌活性及选择性。

(2)测试样品：对照药红霉素A、氟红霉素、克拉霉素；试验样品I_1-11。

(3)测试菌株：

枯草芽孢杆菌168(B.subtilis 168)

金黄色葡萄球菌USA300(S.aureus USA300)

大肠杆菌DH5a(E.coli DH5a)

铜绿假单胞菌PAO1(P.aerμginosa PAO1)

鲍曼不动杆菌ATCC19606(A.baumannii ATCC19606)

(4)实验步骤：

测试菌接种在普通营养肉汤中(10mL/管)，将上述接种菌置于摄氏37℃孵育18h，次日稀释成10⁶/Cuf作为实验用菌浓度。在灭菌的96孔板中加入LB培养液(每孔100μL)。设3孔为健康细菌对照，3孔为空白对照，3孔为加入0.4mL的DMSO的溶剂对照，在剩余的孔中从低浓度到高浓度依次加入浓度为50mM溶于DMSO的大环内酯类抗菌化合物溶液(重复3孔)；使各孔中化合物的浓度分别为(0.39，0.78，1.56，3.13，6.25，12.5，25，50，100，200)μmol/L；然后在每孔中加入当日在LB培养液新鲜生长，吸光度为0.6-1.0之间的菌液5μL。微孔板加盖并用胶纸密封，使用平板读取器(BMG LABTECH FLUOstarOPTIMA)于37℃孵育18h，并使96孔板在7mm距离上下震荡，每10分钟静止并在600nm读取吸光度，并计算最小抑菌浓度(MIC/μmol/L)。

(5)测试结果，见下表1：

表1.以上实施例所得大环内酯类抗菌化合物I₁～I₁₁的MIC(μmol/L)

由表1结果可以看出，所测大部分大环内酯类抗菌化合物对所测的5种菌株均有较好的抗菌活性：

a.化合物I_1-11对B.subtilis 168都具有较好的抑菌作用。除I₆外，其他化合物的MIC均小于红霉素A，其中，化合物I₁、I₂、I₉、I₁₀的MIC低于红霉素A15倍、低于克拉霉素和氟红霉素3倍。

b.化合物I_1-10对耐药菌S.aureus USA300具有较好的抑菌作用。I₃与I₇的抗菌活性强于红霉素A与氟红霉素3倍，与克拉霉素相当，化合物I₄与I₆的抗菌活性较红霉素A与氟红霉素提高1倍。

c.化合物I_1-11对E.coli DH5a都具有较好的抑菌作用。特别地，I₂的MIC小于红霉素A3倍，低于克拉霉素与氟红霉素1倍。

d.化合物I₁和I₂对耐药菌P.aerμginosa PAO1的抗菌作用与克拉霉素相当，略优于红霉素A。

e.化合物I_1-11对耐药菌A.baumannii ATCC19606均具有较好的抑菌作用。其中，I₁和I₂的抑菌作用与克拉霉素相当，其MIC较红霉素A和氟红霉素降低3倍。

由以上结果可以看出，本发明所制备的大环内酯类抗菌化合物具有抗菌作用，可用于制备抗菌药物如抗生素等。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

一种大环内酯类抗菌化合物及其制备方法与应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。