专利摘要

本发明涉及一种抗坏血酸氧钒配合物，其特征在于含氧钒基团的多羟基化合物，分子式为Na[VO(C6H7O6)2OH]，分子量为443.1。本发明的钒化合物能显著降低Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖和胰岛素水平，改善胰岛素抵抗，提高血清脂联素含量，降低抵抗素、瘦素含量，调节胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量。综上所述，抗坏血酸氧钒配合物具有良好的降血糖作用，可用于制备预防和治疗糖尿病、糖尿病引起的脂代谢混乱等疾病的药物。

权利要求

1.一种抗坏血酸氧钒配合物，其特征在于，所述的抗坏血酸氧钒配合物的分子式为Na[VO(C₆H₇O₆)₂OH]。

2.权利要求1所述的抗坏血酸氧钒配合物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法如下：

在醋酸-醋酸钠缓冲液中加入L-抗坏血酸，混合均匀后加入0.1M五价钒盐进行反应，至颜色由蓝色变成绿色；再将pH调整到中性，加入溶剂液得到沉淀，将沉淀用乙醇洗涤后，干燥得到抗坏血酸氧钒配合物。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的五价钒盐是正钒酸钠、偏钒酸铵、偏钒酸钠、偏钒酸钾、焦钒酸钠中任一种或几种。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的溶剂液是无水乙醇、正己烷、丙酮、氯仿、石油醚、乙醚中的任一种。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的将pH调整到中性，是通过滴加0.1M的NaOH溶液完成的。

6.权利要求1所述的抗坏血酸氧钒配合物在制备治疗糖尿病、糖尿病引起的代谢紊乱疾病的制品中的应用。

7.一种治疗糖尿病、糖尿病引起的代谢紊乱疾病的药物，其特征在于，所述的制品包含有药理有效浓度的权利要求1所述的抗坏血酸氧钒配合物。

8.如权利要求8所述的药物，其特征在于，所述的药物为口服给药制剂或肠胃外给药制剂。

说明书

技术领域

本发明属于营养制品制备技术领域，具体涉及一种抗坏血酸氧钒配合物。

背景技术

糖尿病是一种受多种因素影响的复杂代谢性病症，源于环境因素和遗传因素的相互作用，该疾病可诱发一系列并发症，如肥胖症、心脑血管疾病、高血压、高血脂、肾衰竭等。糖尿病分为Ⅰ型和Ⅱ型，大部分糖尿病患者属于Ⅱ型糖尿病，其根本病因之一是胰岛素抵抗，其贯穿于Ⅱ型糖尿病的全过程。

胰岛素抵抗最早是由Yallow等于20世纪50年代提出的，是指胰岛素对靶器官的敏感性下降，促进葡萄糖摄取和利用的效率降低，机体代偿性地分泌过多的胰岛素而产生高胰岛素血症，以维持血糖的稳定。胰岛素典型的效应器官包括肝脏、肌肉和脂肪。其中，肝脏优于其它靶组织首先发生胰岛素抵抗，导致参与葡萄糖代谢的相关酶活性紊乱，影响了机体的血糖水平。由脂肪组织分泌的细胞因子随血液运输到胰腺、肝脏、肾脏等器官，造成各组织发生炎症反应，引起各器官发生胰岛素抵抗及机体高血糖症。

钒是人体必需微量元素之一，具有胰岛素功能模拟作用，对生物体的生长发育、糖代谢、脂肪代谢、心血管、肾脏均有重要的生物学作用。钒在完全吸收的前提下，微量补充就能产生良好的医疗保健作用。临床研究指出[Kurt O,Ozden T,Ozsoy N,Tunali S,Can A,Akev N,Yanardag R,Influence of vanadium supplementation on oxidative stress factors in the muscle of STZ-diabetic rats.Biometals:an international journal on the role of metal ions in biology,biochemistry,and medicine.2011,24:943-949]，使用剂量为动物剂量1％的硫酸氧钒(100mg/d)治疗糖尿病患者60天，仍可观察到有效的降血糖以及改善氧化应激作用。小鼠实验结果表明，钒酸盐能够模拟胰岛素大多数代谢方面的活性，在相对较高的浓度下钒酸盐能够促进脂肪和肌肉组织中己糖转运；促进肝脏和横膈膜糖原的合成，抑制其糖原分解；钒酸盐可促进葡萄糖氧化和脂肪合成，抑制去甲肾上腺素介导的脂肪分解；而且，由于磷酸丙酮酸缩激酶mRNA水平的降低和葡萄糖-6-磷酸酶的抑制而引起的肝糖原合成的抑制也能通过钒阻止肝糖的分解而得到缓解[Sakurai H,Tsuchiya K,Nukatsuka M,Sofue M&Kawada J.Insulin-like effect of vanadyl ion on streptozotocin-induced diabetic rats.The Journal of Endocrinology.1990,126:451-459]。总之，钒通过抑制肝、肌肉和脂肪组织几个关键的代谢酶系统的活性，从而提高了进入这些组织细胞中的葡萄糖的利用率，也降低了与胰岛素作用相反的激素的活性。因此，有必要提供一种能稳定保存的含钒化合物就有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗坏血酸氧钒配合物及其制备方法，能够用作防治胰岛素抵抗所致的Ⅱ型糖尿病。

本发明的抗坏血酸氧钒配合物，是含氧钒基团(VO²⁺)的多羟基化合物，其分子式为Na[VO(C₆H₇O₆)₂OH]。

本发明的抗坏血酸氧钒配合物的制备方法如下：

在醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中加入L-抗坏血酸，混合均匀后加入0.1M五价钒盐进行反应，至颜色由蓝色变成绿色；再将pH调整到中性，加入溶剂液得到沉淀，将沉淀用乙醇洗涤后，干燥得到抗坏血酸氧钒配合物。

所述五价钒盐是指正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)、偏钒酸铵(NH₄VO₃)、偏钒酸钠(NaVO₃·H₂O)、偏钒酸钾(KVO₃)、焦钒酸钠(O₇V₂·4Na)中任一种或几种。

本发明所述的溶剂液是指无水乙醇、正己烷、丙酮、氯仿、石油醚、乙醚中的任一种。

所述的将pH调整到中性，是通过滴加0.1M的NaOH溶液完成的。

本发明的抗坏血酸氧钒配合物在制备治疗糖尿病、糖尿病引起的代谢紊乱疾病的制品中的应用。

本发明所得到的抗坏血酸氧钒配合物均能显著降低Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖和胰岛素水平，改善胰岛素抵抗，提高血清脂联素含量，降低抵抗素、瘦素、和TNF-α含量，具有降低血糖的作用。

本发明以具有L-抗坏血酸为原料，利用其特有的羧基将其与五价钒离子配位络合，得到了一种具有显著降低Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖和胰岛素水平，改善胰岛素抵抗的醇、脂溶性化合物。本发明产品口服效果好，尤其融合了抗坏血酸和氧钒离子的优点，具有良好的降血糖作用，可用于制备预防和治疗糖尿病、糖尿病引起的脂代谢混乱等疾病的药物，具有广阔的市场应用前景。

附图说明

图1：抗坏血酸氧钒配合物的UV图谱；抗坏血酸氧钒配合物在782nm处有VO²⁺的特殊吸收峰。

具体实施方式

下面结合实施案例以及实验结果对发明做进一步说明。应理解，这些实验案例仅用于说明本发明而不限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的方法，通过常规方法中所述的条件，或按照常规方法中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件进行。除非另外说明，否则百分比和分数按重量计算。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容或均等方法及材料皆可应用与本发明，且文中所述的较佳实施方法仅作示范只用。

实施例1

称取L-抗坏血酸0.88g溶于100mL醋酸-醋酸钠(NaAc/HAc)缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入50mmol/L正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)；40℃加热20min后，该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。通过滴加0.1M的NaOH溶液将pH调整到中性。缓慢加入无水乙醇溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用乙醇反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。根据元素分析仪计算得抗坏血酸氧钒配合物的分子式C₁₂H₁₅O₁₄NaV。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产品产率为96.5％。

实施例2

称取L-抗坏血酸0.88g溶于醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入相同摩尔量的正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)。该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。40℃加热20min后，通过滴加0.1M的NaOH溶液将pH调整到碱性(pH＝9.5)，。缓慢加入无水乙醇溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用无水乙醇反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产率为33.6％。

实施例3

称取L-抗坏血酸0.88g溶于醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入相同摩尔量的正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)。该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。40℃加热20min后，通过滴加0.1M的NaOH溶液将pH调整到中性。缓慢加入石油醚溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用石油醚反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。根据元素分析仪计算得抗坏血酸氧钒配合物的分子式C₁₂H₁₅O₁₄NaV。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产率为89.5％。

实施例4

称取L-抗坏血酸0.88g溶于醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入相同摩尔量的正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)。该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。40℃加热20min后，将pH调整到中性，通过滴加0.1M的NaOH溶液。缓慢加入环己烷溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用环己烷反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。根据元素分析仪计算得抗坏血酸氧钒配合物的分子式C₁₂H₁₅O₁₄NaV。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产率为75.4％。

实施例5

称取L-抗坏血酸0.88g溶于醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入相同摩尔量的正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)。该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。40℃加热20min后，将pH调整到中性，通过滴加0.1M的NaOH溶液。缓慢加入氯仿溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用氯仿反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。根据元素分析仪计算得抗坏血酸氧钒配合物的分子式C₁₂H₁₅O₁₄NaV。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产率为72.3％。

实施例6

称取L-抗坏血酸0.88g溶于醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入相同摩尔量的正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)。该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。40℃加热20min后，将pH调整到中性，通过滴加0.1M的NaOH溶液。缓慢加入乙醚溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用乙醚反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。根据元素分析仪计算得抗坏血酸氧钒配合物的分子式C₁₂H₁₅O₁₄NaV。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产率为72.3％。

实施例7

称取L-抗坏血酸0.88g溶于醋酸-醋酸钠缓冲液(pH＝5.6)中，40℃水浴搅拌10min，搅拌中，逐步加入相同摩尔量的正钒酸钠(Na₃VO₄·12H₂O)。该混合物的颜色由最初的蓝色最初反应逐渐变成绿色。40℃加热20min后，将pH调整到中性，通过滴加0.1M的NaOH溶液。缓慢加入丙酮溶液，得到绿色沉淀。抽滤，用丙酮反复洗涤，55℃真空干燥3d，即得抗坏血酸氧钒配合物产品。根据元素分析仪计算得抗坏血酸氧钒配合物的分子式C₁₂H₁₅O₁₄NaV。样品50mg溶于1mL甲醇溶液，以不同VO²⁺浓度的硫酸氧钒溶液作标准曲线，经过分光光度法测定782处VO²⁺特征峰的吸光度，产率为71.1％。

对本发明实施例1-7制备的对高脂高糖诱导的2型糖尿病小鼠的胰岛素抵抗的影响以及糖代谢、脂质代谢的作用。评价了血糖水平、胰岛素水平、脂肪细胞因子(脂联素、抵抗素、瘦素)，脂质代谢因子(甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白)的影响。结果表现出显著的降血糖作用，改善胰岛素抵抗以及调节脂质代谢的作用。实验结果如下：

抗坏血酸氧钒配合物对体重、对脂肪积累的影响

运用高脂高糖饲料对C57BL/6小鼠诱导胰岛素抵抗小鼠模型，通过与罗格列酮比较并测定体重与脂肪质量变化评价改善糖尿病以及脂质代谢作用。如表1所示，模型组小鼠体内脂肪重量显著高于正常对照组(P<0.01)，说明高脂高糖饮食导致了脂肪的积累。摄食抗坏血酸氧钒配合物后，与模型对照组比，小鼠体重下降，肾周、附睾、皮下脂肪重量显著降低(P<0.01)。结果提示抗坏血酸氧钒配合物能减少脂肪在体内的积累。

表1 抗坏血酸氧钒配合物对高脂高糖诱导的胰岛素抵抗小鼠体重增加、脂肪的影响。

^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05,与模型组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

表2抗坏血酸氧钒配合物对空腹血糖及胰岛素的影响

运用高脂高糖饲料对C57BL/6小鼠诱导胰岛素抵抗小鼠模型，通过与罗格列酮比较并测定血糖和胰岛素含量评价改善胰岛素抵抗作用。高血糖和胰岛素抵抗是2型糖尿病的标志。在2型糖尿病早期，胰岛素水平越高，说明胰岛素抵抗程度越严重。HOMA-IR是用于评价个体的胰岛素抵抗水平的指标。由表2可知，高脂高糖饮食显著提高了模型组小鼠血清胰岛素水平(P<0.01)，说明模型对照组出现了严重的糖尿病症状，提示2型糖尿病造模成功。与模型对照组比，抗坏血酸氧钒配合物组小鼠血清胰岛素含量显著降低，空腹血糖显著下降。结果表明抗坏血酸氧钒配合物能降血糖并改善2型糖尿病小鼠的胰岛素抵抗。

^##P<0.01,与正常组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

表3抗坏血酸氧钒配合物对瘦素的影响

瘦素主要是由白色脂肪组织分泌的特异性蛋白质，能免抑制脂肪的合成，与胰岛素抵抗程度呈正相关。由表3可知，经抗坏血酸氧钒配合物干预后，与模型组比，瘦素含量显著降低，提示抗坏血酸氧钒配合物能抑制脂肪细胞对瘦素的合成，抑制胰岛素抵抗。

^##P<0.01,与正常组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

表4抗坏血酸氧钒配合物对脂联素的影响

脂联素是脂肪细胞特异性分泌的蛋白质，血清脂联素浓度与胰岛素敏感性呈正相关，与机体胰岛素抵抗程度呈负相关。由表4可知，与正常组比，模型组小鼠的血清脂联素水平显著降低(P<0.01)。经抗坏血酸氧钒配合物干预后，与模型组比，脂联素水平提高，提示抗坏血酸氧钒配合物能促进脂肪组织分泌脂联素，改善胰岛素抵抗。

^##P<0.01,与正常组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

表5抗坏血酸氧钒配合物对抵抗素的影响

抵抗素是由脂肪细胞产生和分泌的特异性肽激素，作用于骨骼肌细胞、脂肪细胞等，能降低其对胰岛素的敏感性，改善胰岛素抵抗。由表5可知，经抗坏血酸氧钒配合物干预后，与模型组比小鼠抵抗素含量显著降低，表明抗坏血酸氧钒配合物能降低脂肪细胞分泌抵抗素的能力，改善胰岛素抵抗。

^##P<0.01,与正常组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

表6抗坏血酸氧钒配合物对肝脏总胆固醇以及甘油三酯的影响

由表6可知，经抗坏血酸氧钒配合物干预后，与模型组比小鼠总胆固醇含量、甘油三酯含量显著降低，表明抗坏血酸氧钒配合物能降低血脂、调节脂质代谢的能力。

^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05,与模型组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

表7抗坏血酸氧钒配合物对肝脏低密度脂蛋白以及高密度脂蛋白的影响

由表7可知，经抗坏血酸氧钒配合物干预后，与模型组比小鼠低密度脂蛋白含量显著降低，高密度脂蛋白含量显著增大，表明抗坏血酸氧钒配合物能调节胆固醇合成、提高机体血脂代谢能力。

^##P<0.01,与正常组相比；^*P<0.05,与模型组相比；^**P<0.01,与模型组相比.

经过发明人的长期研究，首次揭示了抗坏血酸氧钒配合物对于改善胰岛素抵抗、降血糖以及调节脂质代谢的能力，效果显著。

所述药物可以呈现单元剂型，每剂含有预定量的每一活性成分。这样一种单元可适于提供0.5-10mg/天的化合物，优选0.5-1.5mg/天、1.0-3.0mg/天、2.5-5.0mg/天、4.0-8.0mg/天或6.0-10.0mg/天。最终剂量将依赖于所治疗的病症、给药的途径和患者的年龄、体重与条件，将由医生酌量。本文所述化合物最优选地是以适当组合物的形式给药。作为适当的组合物，可以提及所有常用于全身或局部给药的组合物。药学上可接受的载体应当基本上是惰性的，以便不与活性组分发生作用。适合的惰性载体包括水、醇、聚乙二醇、凝胶等。所述药物制备物可以被配制成以任意适宜方式给药，用在人类或兽医学中。本发明的药物组合物可以被具体配制成以固体或液体形式给药，包括采取下列方式的那些：(1)口服给药，例如顿服剂(水性或非水性溶液或悬液)、片剂、大丸剂、粉剂、颗粒剂；(2)肠胃外给药，例如皮下、肌内或静脉内注射，例如无菌溶液或悬液。不过，在某些实施方式中，可以简单地将主体成分溶解或悬浮在无菌水中。

本发明的产品生产成本低廉，安全性高，可发挥良好的防治胰岛素抵抗和改善糖脂代谢紊乱的活性，为此类药物的开发提供了新的途径。

一种抗坏血酸氧钒配合物专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。