专利摘要

本发明公开了microRNA-203及其拟似物在制备防治肥胖、血脂异常及其并发症药物中的应用，本发明属于生物医药领域。本发明制备的药物可为miR-203及其拟似物单一成分，也可为一种药物组合物。药物组合物为有效剂量的miR-203及/或其拟似物与药学上可接受的载体混合而成，所述载体可为胆固醇，病毒，纳米颗粒，壳聚糖，脂质体等，将合成的miR-203及/或其拟似物与上述载体连接形成药物，通过静脉，肌肉或腹腔注射等可用来治疗肥胖、血脂异常或肥胖和血脂异常并发症。

权利要求

1.microRNA-203或其拟似物在制备预防或治疗肥胖、血脂异常或肥胖和血脂异常并发症药物中的应用，

其中，所述的microRNA-203序列如SEQ ID NO.1所示；所述的拟似物的序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

2.如权利1所述的应用，其特征在于所述的肥胖和血脂异常并发症包括动脉粥样硬化、冠心病、心肌肥厚、胰腺炎和脂肪肝。

3.一种microRNA-203的拟似物，其特征在于所述的拟似物的序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

4.一种用于预防或治疗肥胖、血脂异常及血脂异常并发症的药物组合物，其特征在于含有权利要求3所述的microRNA-203的拟似物及药学上接受的载体。

5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于还包括microRNA-203。

6.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述的载体为病毒、胆固醇、纳米颗粒、壳聚糖或脂质体。

7.如权利4-6任一项所述的药物组合物，其特征在于将所述组合物按照药物制备的常规方法制成注射制剂，口服制剂，喷雾制剂，软膏制剂或贴剂。

说明书

技术领域

本发明涉及一种核酸类物质在制备预防和治疗疾病药物中的应用，尤其涉及microRNA-203（miR-203）及其拟似物在制备预防和治疗肥胖、血脂异常及肥胖和血脂异常并发症药物中的应用，本发明属于生物医药领域。

背景技术

肥胖是一种由多因素引起的慢性代谢性疾病，与糖尿病、高血压、高脂血症、心脑血管疾病及癌症等多种疾病有明显关系，被称为“万症之源”。目前，肥胖已经与艾滋病、吸毒和酗酒并列为世界四大生活难题，被公认为困扰人类健康的重要顽症之一。据“国际肥胖问题工作组”公布的数据显示，地球上每4人中就有1人过于肥胖。具体而言，全球3.12亿人体重超标，17亿人应该减肥。报告指出，全世界肥胖人口已超过饥饿人口，超重和肥胖已经成为困扰发达国家和发展中国家的一个重大社会问题，也是整个人类社会所要面临的巨大挑战。

肥胖可伴有或不伴有血脂异常的发生，血脂异常是一种全身性疾病，指血中总胆固醇(TC)和/或甘油三酯(TG)过高或高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)过低，也称高脂血症。高脂血症的主要危害是导致动脉粥样硬化，进而导致众多的相关疾病，其中最常见的一种致命性疾病就是冠心病，严重乳糜微粒血症可导致急性胰腺炎，是另一致命性疾病。此外，高血脂症也是导致高血压、糖耐量异常、糖尿病的一个重要危险因素。高脂血症还可导致脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、眼底出血、失明、周围血管疾病、跛行、高尿酸血症。

目前，对于肥胖及血脂异常的防治效果并不理想，极易造成多种并发症的产生，因此急需建立一种以新的治疗靶点研发的有效药物。microRNA（miRNA）是一类长度约为22nt的小分子非编码单链RNA，由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体加工而来，能够和互补或部分互补的靶mRNA的3’末端非翻译区结合，使mRNA降解或介导其翻译抑制。miRNA家族的成员是在研究秀丽线虫的发育转变过程中作为小分子短暂RNA（stRNA）被发现的。研究发现，miRNA是stRNA中的一个大家族，并且在线虫、果蝇、植物、哺乳动物、甚至病毒中均有发现。这类小RNA在表达上具有组织和时间的特异性，是调节其他功能基因表达的重要调节分子，研究表明，miRNA广泛参与发育、凋亡、分化、增殖、代谢等过程的调控，在生物体的各种生命活动中发挥着重要作用。近年来，基于miRNA为靶点的药物不断获得实验成功，从而为各种病症的治疗带来新的希望，因此，以miRNA作为治疗肥胖和血脂异常的新靶点，有着十分重大的突破性和应用性。

发明内容

为了解决上述问题，本发明采用多种技术手段证明了microRNA-203（miR-203）或其拟似物在患有肥胖症个体中的表达情况及其对肥胖和血脂异常的防治作用，最终确定了miR-203或其拟似物可以作为制备预防或治疗肥胖、血脂异常及肥胖和血脂异常并发症的有效药物。

因此，本发明提出了microRNA-203或其拟似物在制备预防或治疗肥胖、血脂异常或肥胖和血脂异常并发症药物中的应用，

其中，所述的microRNA-203序列如SEQ ID NO.1所示；所述的拟似物的序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

在本发明中，优选的，所述的肥胖和血脂异常并发症包括动脉粥样硬化、冠心病、心肌肥厚、胰腺炎和脂肪肝。

当然，本领域技术人员可对本发明所述的microRNA-203或其拟似物的核苷酸序列进行适当修饰，所述的修饰包括任意核苷酸的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或几种的组合或任意核苷酸的增减、替换，只要修饰后的核苷酸序列仍具有与microRNA-203相同的活性就应当属于本发明所要保护的范围之内。

本发明的一种microRNA-203的拟似物，其特征在于所述的拟似物的序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

此外，本发明还提出了一种用于预防或治疗肥胖、血脂异常及血脂异常并发症药物组合物，其特征在于含有以上所述的microRNA-203的拟似物及药学上接受的载体。

在本发明中，优选的，所述的药物组合物中还包括microRNA-203。

在本发明中，优选的，所述的载体为病毒、胆固醇、纳米颗粒、壳聚糖或脂质体。

在本发明中，优选的，可将所述组合物按照药物制备的常规方法制成注射制剂，口服制剂，喷雾制剂，软膏制剂或贴剂等。

附图说明

图1为各组大鼠4周体重变化情况；

图2为4周末各组大鼠血清中TG含量；

图3为4周末各组大鼠血清中TCH含量；

图4为4周末各组大鼠血清中LDL含量；

图5为4周末各组大鼠血清中HDL含量。

具体实施方式

下面通过药理性及临床观察实验并结合实施例对本发明做进一步的说明验证，所有实施例仅用于例证本发明，决不限制本发明的保护范围。

实施例1miR-203，miR-203拟似物1，miR-203拟似物2对肥胖和血脂异常的治疗作用

选用体重160-165g成年健康SD雄性大鼠，分为6组：（1）正常对照组（NC）；（2）高脂饲料诱发肥胖组；（3）高脂饲料诱发肥胖组注射miR-203（SEQ ID NO.1所示），注射剂量为0.1ml/0.5nmol；（4）高脂饲料诱发肥胖组注射miR-203拟似物1（SEQ ID NO.2所示），注射剂量为0.1ml/0.5nmol；（5）高脂饲料诱发肥胖组注射miR-203拟似物2（SEQ ID NO.3所示），注射剂量为0.1ml/0.5nmol；（6）高脂饲料诱发肥胖组注射阴性对照试剂，阴性对照试剂主要成分为cel-miR-239b-5p，cel-miR-67-3p，该miRNA与任何人、大鼠、小鼠miRNA几乎无同源性，广泛用于miRNA相关实验中，注射剂量为0.1ml/0.5nmol（阴性对照组）。3、4、5、6组大鼠开腹，经肠系膜内注射试剂，缝合后与其他各组大鼠处于等同状态下饲养35天，每隔7天称量禁食体重，35天末进行取材，取血清。

各组体重变化如图1所示。结果可见miR-203，miR-203拟似物1，miR-203拟似物2作用组大鼠体重明显低于单纯肥胖组（P<0.05），已接近普通饲料诱发的对照组。用试剂盒测量各组大鼠血清中TG，TCH，LDL，HDL含量，结果如图2-5所示，对照组相对肥胖组TG，TCH，LDL显著降低（P<0.05），HDL含量显著升高（P<0.05）;miR-203组TG，TCH，LDL含量均显著低于单纯肥胖组（P<0.05），HDL含量显著高于肥胖组（P<0.05）与对照组含量相近，NC组则与肥胖组无显著差异。

本实验证明了miR-203，miR-203拟似物1，miR-203拟似物2体内注射可显著改善肥胖和血脂异常，说明miR-203可作为预防和治疗肥胖及血脂异常的新药物。

以上所述均为本发明的说明性实施例，而非限制性的，对于本发明权利要求内所做的更改或等效变更，均落入本发明的保护范围之内。

microRNA专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。