专利摘要

本发明涉及一种腈水解酶基因及其原核表达和固定化技术，属于化工酶的原核表达及固定化技术领域。本发明利用PCR技术，以热纤梭菌的基因组为模板克隆到腈水解酶基因，通过大肠杆菌表达系统对该酶进行原核表达，得到含有该腈水解酶基因的重组质粒pET‑28a‑nit，转化到大肠杆菌BL21获得重组菌BL21(pET‑28a‑nit)，诱导重组菌表达获得重组腈水解酶；该腈水解酶基因与连接有孢子外衣壳蛋白基因cotG的高拷贝穿梭质粒连接，构建成用于表面展示的重组质粒pHS‑cotG‑nit，该质粒转入枯草芽孢杆菌菌株DB403获得重组菌DB403(pHS‑cotG‑nit)，诱导重组菌产生的重组芽孢表面展示有该腈水解酶。本发明首次通过孢子表面展示技术对腈水解酶进行固定化，该方法不仅可以使酶的结构更稳定，而且利于酶在催化后的回收再利用，只需要离心就可以把展示有腈水解酶的孢子回收再利用。

专利附图

一种腈水解酶基因及其原核表达和固定化技术专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。