专利摘要

本发明公开了一种自主驯化的菌株Y2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2018年2月1日，保藏编号为CCTCCNO：M2018079，其分类命名为解单端孢菌素微杆菌Y2（MicrobacteriumtrichothecenolyticumY2）。本发明还公开了该自主驯化的菌株Y2的应用。本发明最后还公开了一种去除电解锰渣中As、Cr、并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子的方法，该方法处理成本低、操作条件简单，处理后的废渣能够达到相应的国家使用标准，而且有效地回收了电解锰渣中的Mn、Mg、NH3‑H和部分硫酸根离子，经处理后，清洗液中可回收高纯度的硫酸铵镁、硫酸铵锰混合物。

权利要求

1.一种自主驯化的菌株Y2，其特征在于，该自主驯化的菌株Y2保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2018年2月1日，保藏编号为CCTCC NO：M 2018079，其分类命名为解单端孢菌素微杆菌Y2（Microbacterium trichothecenolyticum Y2）。

2.一种微生物菌剂，其包含权利要求1所述的自主驯化的菌株Y2。

3.权利要求1所述的自主驯化的菌株Y2或权利要求2所述的微生物菌剂在重金属去除和/或氨氮、锰、镁、硫酸根离子回收中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述重金属为As、Cr中的一种或两种。

5.一种去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将电解锰渣、废糖蜜水溶液按照1 kg: 1.5-2.0 L的质量体积配比混匀，置于配有搅拌装置容器中；利用氢氧化钠溶液调节体系的pH值至7.5-8.0得到混合液；

2）在混合液中再接种自主驯化的菌株Y2，接种量为3-6w%；并保持外部温度为15-35℃，搅拌周期为10-15天，搅拌速度为150-220rpm，补充废糖蜜水溶液使电解锰渣、废糖蜜水溶液的质量体积配比维持在1kg : 1.5-2.0 L；

3）10-15天后过滤使固液分离，将滤液调节pH值至8.0-9.5沉淀回收硫酸铵镁和硫酸铵锰。

6.根据权利要求5所述的去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子的方法，其特征在于，所述电解锰渣为菱锰矿经硫酸酸浸处理后的弱酸性滤渣。

7.根据权利要求5所述的去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子的方法，其特征在于，所述废糖蜜水溶液的总糖量为45%-67%，废糖蜜的浓度为1.5-2.0g/L。

说明书

技术领域

本发明涉及矿渣中资源化及无害化处理技术领域，具体涉及一种自主驯化的菌株Y2，尤其涉及一种去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子的方法。

背景技术

电解锰渣是指在电解金属锰生产过程中排放的酸浸废渣，其主要成分为二氧化硅、硫酸钙和氨氮，同时还存在大量锰、镁及部分有害元素砷和铬。每生产1 t金属锰将产生7～9t的锰渣，且随着锰矿石的品味逐渐下降，每年排放的渣量也在持续上升。由于电解锰渣中可溶性锰和氨氮的含量较高，长期堆积将对周围的水土环境产生持久性的危害，甚至威胁周围居民的生命财产安全。因此，对电解锰渣进行高效回收和资源化利用成为当前电解锰行业可持续健康发展的必由之路。

锰、镁和氨氮等成分在电解锰渣中伴随着其迁移性在自然界中的循环，不仅会造成资源的浪费更给自然造成巨大的污染。开发出一种新的、高效的、经济的能够回收有价值成分的处理技术，将具有重大的社会、环保和经济等意义。

目前处理电解锰渣中重金属的方法主包括：水泥固化处理、石灰碱性处理、塑性材料包容处理、熔融煅烧固化处理、自胶结固化处理和药剂稳定化处理等。而电解锰渣中氨氮的处理方法主要靠水洗回收。但这些方法都存在其固有的缺点与局限性，如在水泥固化中，废渣里存在的某些抑制盐会阻止其水化过程，造成固化体破裂，影响固定效果等。另外，当固化体在环境中破裂后，废物中的有毒物质会重新进入环境。而药剂稳定化中，化学药剂的成本和运行费用均较高，不利于大规模的应用。在水洗电解锰渣回收氨氮的过程需要大量的水做溶剂，造成资源的浪费。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明所要解决的技术问题是提供了一种自主驯化的菌株Y2。

本发明还要解决的技术问题是提供了一种微生物菌剂。

本发明还要解决的技术问题是提供了自主驯化的菌株Y2或微生物菌剂在去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子中的应用。

本发明还要解决的技术问题是提供一种新的去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁、硫酸根离子的方法，该方法处理成本低、操作条件简单，能够改性电解锰渣达到相应的国家使用标准；并回收其中的氨氮、锰、镁和硫酸根离子。

发明目的：为实现上述技术目的，本发明采取如下的技术方案：一种自主驯化的菌株Y2，该自主驯化的菌株Y2保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2018年2月1日，保藏编号为CCTCC NO：M 2018079，其分类命名为解单端孢菌素微杆菌Y2(Microbacteriumtrichothecenolyticum Y2)，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学(武汉大学第一附属小学对面)。

本发明内容还包括一种微生物菌剂，包含所述的自主驯化的菌株Y2。

本发明所述菌株Y2为从电解锰渣渣场附近筛选并驯化保存命名为Y2，具体分离驯化步骤如下：将适量广西崇左地区电解锰渣样品置于无菌水试管中，充分震荡混匀得到混合液体，混匀后使用接菌环蘸取混合液体并于牛肉膏蛋白胨平板上划线培养(30℃，48h)，分离菌株。用接菌环从第一代平板挑取单菌落，在重新配置的牛肉膏蛋白胨平板上划线培养(30℃，48h)，进行纯化。同样方法再纯化2次，使最终平板上为同一形态菌落为止。挑取单菌落接菌于含有电解锰渣固体的废糖蜜液体培养基(废糖蜜浓度为5g/L)中30℃培养24h，并利用逐级培养法提高电解锰渣投加量驯化菌株得到菌株Y2，并保存于含有电解锰渣固体的废糖蜜(5g/L)液体培养基中。将驯化最后的含有菌株Y2的液体培养基菌悬液收集至灭菌离心管中，清洗离心2次，进行基因组DNA的提取，提取完毕后，利用通用引物27F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG；1492R： ACGGCTACCTTGTTACGACTT进行16S rDNA的PCR实验，完成PCR后将最终PCR产物进行测序，并将测序结果与GenBank中已登录的相关序列 (NZ_BCWI01000036.1)进行比对，该菌株Y2的16S rDNA序列参见序列表中的SEQ ID NO：1所示，比对结果显示菌株Y2属于解单端孢菌素微杆菌。

本发明内容还包括上述的自主驯化的菌株Y2或所述的微生物菌剂在重金属去除和/或氨氮、锰、镁和硫酸根离子回收中的应用。

本发明所述的重金属包括但不仅限于As、Cr中的一种或几种。

本发明内容还包括一种去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁和硫酸根离子的方法，包括以下步骤：

1)将电解锰渣、废糖蜜水溶液按照1kg:1.5-2.0L的质量体积配比混匀，置于配有搅拌装置的容器中；调节体系的pH值至7.5-8.0得到混合液；

2)在混合液中再接种自主驯化的菌株Y2，该菌株为菌液形式使用，保存于含有电解锰渣固体的废糖蜜(5g/L)液体培养基中，细菌浓度为109CFU/mL；菌液接种量为3-6w％；并保持外部温度为15-35℃，搅拌周期为10-15天，搅拌速度为150-220rpm，补充废糖蜜水溶液使电解锰渣、废糖蜜水溶液的质量体积配比维持在1kg:1.5-2.0L；

3)10-15天后过滤使固液分离，将滤液的pH值调节至8.0-9.5沉淀回收硫酸铵镁以及硫酸铵锰；滤渣无毒，可排放或进一步资源化利用。

其中，所述电解锰渣为菱锰矿(主要成分：MnCO3)经硫酸酸浸处理后的弱酸性滤渣。

其中，所述废糖蜜为制糖产业的副产物，其中废糖蜜的总糖量一般为 45％-67％，同时含有大量的有机、无机物质，配制成浓度为1.5-2.0g/L的废糖蜜水溶液。

经上述处理后，本发明能够有效地清洗出电解锰渣中As、Cr、Mn、Mg、 NH3-H和部分硫酸根离子，将滤液调节pH值至8.0-9.5可沉淀回收硫酸铵镁以及硫酸铵锰。经本发明方法处理后的电解锰渣中As、Cr、Mn、Mg和NH3-H的浸出率分别为97-99％、95-99％、80-95％、60-80％、95-99％。

与现有技术相比，本发明对电解锰渣的无害化及资源化处理方法具有如下优点和有益效果：

1、该方法处理结束，能够达到相应回用标准：电解锰渣经本发明方法处理后，种子发芽率可达90-95％，并能持续生长一个生命周期，说明对植物无毒害和胁迫作用；电解锰渣中As、Cr、Mn、Mg、NH3-H的含量低于《土壤环境质量标准》(GB 15618-1995)相关要求限制值以下，并符合国家农用肥料标准要求，达到了无害化的目的。

2、有效地回收了电解锰渣中的Mn、Mg、NH3-H和部分硫酸根离子：实验结果表明，经处理后，清洗液中可回收高纯度的硫酸铵镁、硫酸铵锰。

3、工业废弃物资源化利用：采用的是电解锰渣、废糖蜜，该方法有效地解决了以上物料的处理，有效实现了固体废弃物资源化利用。

附图说明

图1为本发明的去除电解锰渣中As、Cr并回收氨氮、锰、镁的方法的工艺流程图；

图2为本发明细菌镜检简单形貌(左图)和革兰氏染色结果图(右图)；由图2可以看出本发明细菌外形呈微小杆状，革兰氏染色显红；

图3为本发明电解锰渣的清洗液(左图)和清洗液调节pH值后的实效图(右图)；由图3可以看出经本发明处理后的电解锰渣清洗液为澄清透明溶液，调节 pH值后会生成大量棕黄色沉淀物质；

图4为本发明回收的棕黄色沉淀物质，由图4可以看出经本发明从电解锰渣中回收的物质为棕黄色粉末物质；

图5为本发明回收的沉淀物XPS(X-Ray Photoelectron Spectroscopy)元素分析结果图，由图5可以看出经本发明从电解锰渣中回收的物质为棕黄色粉末物质在XPS衍射峰上出现了O1s、N1s、Mn2p、Mg2p和S2p的特征峰，以上衍射特征峰的结合能分别为：531.3eV、401.38eV、641.12eV、48.45eV和168.7eV，通过C.D.Wagner,W.M.Riggs,L.E Davis,J.F.Moulder,G.E.Muilenberg(1979). Handbook of X-Ray PhotoelectronSpectroscopy.Perkin-Elmer Corporation Physical Electronics Division6509Flying Cloud Drive Eden Prairie,Minnesota 55344.比对可得经本发明从电解锰渣中回收的沉淀物为硫酸铵镁和硫酸铵锰。

图6为本发明回收的沉淀物FTIR分析结果图，由图6可以看出经本发明从电解锰渣中回收的物质为棕黄色粉末物质在FTIR分析谱图上在1170.87cm-1出现了宽峰，在680-570cm-1出现了尖峰，这符合硫酸根的特征振动吸收带；在 3050.83cm-1出现了宽峰，1435.93cm-1出现了尖峰，这符合铵根的特征振动吸收带。结合图5的XPS分析可进一步说明经本发明从电解锰渣中回收的沉淀物为硫酸铵镁和硫酸铵锰。

具体实施方式

下面申请人将结合具体的实施例对本发明产品的制备过程及应用过程做详细说明，便于本领域技术人员清楚地理解本发明。但应该理解，以下实施例不应以任何方式被解释为对本申请权利要求书请求保护范围的限制。

将适量广西崇左地区电解锰渣渣场附近土壤样品置于无菌水试管中，充分震荡混匀，混匀后使用接菌环蘸取混合液体并于牛肉膏蛋白胨平板上划线培养(30℃，48h)，分离菌株。用接菌环从第一代平板挑取单菌落，在新配置的牛肉膏蛋白胨平板上划线培养(30℃，48h)，进行纯化。同样方法再纯化2次，使最终平板上为同一形态菌落为止。挑取单菌落接菌于含有电解锰渣固体的液体废糖蜜液体培养基(废糖蜜浓度为5g/L)中30℃培养24h，并利用逐级培养法提高电解锰渣投加量驯化菌株得到菌株Y2。将驯化最后的含有菌株Y2的液体培养基菌悬液收集至灭菌离心管中，清洗离心2次，进行基因组DNA的提取，提取完毕后，利用通用引物27F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG；1492R： ACGGCTACCTTGTTACGACTT进行16SrDNA的PCR实验，完成PCR后将最终PCR产物进行测序，并将测序结果与GenBank中已登录的相关序列 (NZ_BCWI01000036.1)进行比对，该菌株Y2的16S rDNA序列参见序列表中的SEQID NO：1所示，比对结果显示菌株Y2属于解单端孢菌素微杆菌。

菌株Y2的简单形貌和革兰氏染色结果图见图2。

以下实施例中的电解锰渣均为菱锰矿(主要成分：MnCO3)经硫酸酸浸处理后的弱酸性滤渣，自然风干后，研磨过10方孔筛备用。所述电解锰渣的主要成分含量如表1所示。

表1

成分2]]>2O₃]]>CaOMgO2O₃]]>3]]>MnO含量(wt％)22.123.1013.171.759.1422.504.82成分3-H]]>FeCrZnCoCdAs含量(wt％)12.020.0470.0070.0200.0030.0030.004

采用《固体废物浸出毒性浸出方法》(GB5086.1-1997)测得As、Cr、Mg、 Mn浸出量如表2所示，采用《土壤氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定氯化钾溶液提取-分光光度法》(HJ634-2012)测得氨氮浸出量为8058mg/L。

表2

废糖蜜的总糖量为：57wt％，其主要成分和主要性质如表3所示。

表3

本申请文件中如无特殊说明，所有％均为质量百分含量。

实施例1

如图1操作流程图所示：将物料按重量比体积，电解锰渣：废糖蜜水溶液(废糖蜜浓度为1.5g/L)＝1kg：1.5L，置于配有搅拌装置容器中；用氢氧化钠溶液调节体系的pH值为7.5；再接种由自主驯化的菌株Y2，该菌株为菌液形式使用，保存于含有电解锰渣固体的废糖蜜液体培养基(废糖蜜浓度为5g/L)中，细菌浓度为109CFU/mL；接种量为5w％(以细菌浓度为109CFU/mL的菌液质量计)；并保持外部温度为15℃，搅拌周期为9天，搅拌速度为150rpm，期间视水分蒸发情况补充废糖蜜水溶液使电解锰渣、废糖蜜水溶液的质量体积配比维持在1kg： 1.5L；10天后过滤使固液分离，所得滤渣的检测结果见表4，将滤液的pH值用氢氧化钠溶液调节至8.0可沉淀回收，将沉淀物作XPS元素分析和FTIR分析可得沉淀物为复盐混合物硫酸铵镁和硫酸铵锰，结果见图5和图6；将复盐混合物溶解做元素全谱分析，具体为：复盐混合物溶解于一定量超纯水后，并用0.45μm 滤膜过滤样品，利用火焰原子吸收光谱仪测得溶液中镁离子和锰离子浓度，利用《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法HJ 535-2009》测得溶液中铵根离子浓度，利用《GB/T 13025.8-1991制盐工业通用试验方法硫酸根离子的测定》测得溶液中硫酸根离子浓度。最后通过物料衡算可得产物的纯度为：86.99％(该纯度指产物中硫酸铵镁和硫酸铵锰的总质量百分比含量)；滤液为菌株Y2作用后的浸出液。

检测浸出液中有害成分(As、Cr、Mn、Mg、NH3-H)，计算得出电解锰渣中As、Cr、Mn、Mg、NH3-H浸出率：

式中η浸为浸出率，M0为电解锰渣中某有害成分的质量；M为浸出液中该有害成分的质量；其结果如表4所示。

表4

经处理后的滤渣无毒，其指标远低于《危险废物鉴别标准》(GB5085.1—2007) 可直接排放或进一步资源化利用。

发芽率实验：将经本实施例处理后的电解锰渣填满边长为15cm的立方体容器各10份，其中5份在表面均匀播种高羊茅种子12颗；另外5份在表面均匀播种番茄种子6颗；保持充足的光照时间和水分，7天后计算发芽情况并计算发芽率：

式中GI为发芽率，X0为供实验种子数，颗；X发芽种子数，颗；其结果如下：

高羊茅种子发芽率：90％，番茄种子发芽率：90％。

所有的发芽种子均至少能持续生长一个生命周期。

实施例2

将物料按重量比体积，电解锰渣：废糖蜜水溶液(废糖蜜浓度为1.8g/L)＝1kg:1.9L，置于配有搅拌装置容器中；用氢氧化钠溶液调节体系的pH值为7.5；再接种由自主驯化的菌株Y2，该菌株为菌液形式使用，保存于含有电解锰渣固体的废糖蜜液体培养基(废糖蜜浓度为5g/L)中，细菌浓度为109CFU/mL；接种量为4w％(以细菌浓度为109CFU/mL的菌液质量计)；并保持外部温度为30℃，搅拌周期为12天，搅拌速度为175rpm，期间视水分蒸发情况补充废糖蜜水溶液使电解锰渣、废糖蜜水溶液的质量体积配比维持在1kg:1.9L；12天后过滤使固液分离，将滤液的pH值用氢氧化钠溶液调节至8.8可沉淀回收，将沉淀物作 XPS元素分析和FTIR分析可得沉淀物为复盐混合物硫酸铵镁和硫酸铵锰；将复盐混合物溶解做元素全谱分析，具体为：复盐混合物溶解于一定量超纯水后，并用0.45μm滤膜过滤样品，利用火焰原子吸收光谱仪测得溶液中镁离子和锰离子浓度，利用《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法HJ 535‐2009》测得溶液中铵根离子浓度，利用《GB/T 13025.8‐1991制盐工业通用试验方法硫酸根离子的测定》测得溶液中硫酸根离子浓度。最后通过物料衡算可得产物的纯度为：

87.08％(该纯度指产物中硫酸铵镁和硫酸铵锰的总质量百分比含量)；滤液为菌株Y2作用后的浸出液。

检测浸出液中有害成分(As、Cr、Mn、Mg、NH3-H)，计算得出电解锰渣中As、Cr、Mn、Mg、NH3-H浸出率:

式中η浸为浸出率，M0为电解锰渣中某有害成分的质量；M为浸出液中该有害成分的质量；其结果如表5所示。

表5

发芽率实验：将经本实施例处理后的电解锰渣填满边长为15cm的立方体容器各10份，其中5份在表面均匀播种高羊茅种子15颗；另外5份在表面均匀播种番茄种子8颗；保持充足的光照时间和水分，7天后计算发芽情况并计算发芽率：

式中GI为发芽率，X0为供实验种子数，颗；X发芽种子数，颗；其结果如下：

高羊茅种子发芽率：93％，番茄种子发芽率：91％。

所有的发芽种子均至少能持续生长一个生命周期。

实施例3

将物料按重量比体积，电解锰渣：废糖蜜水溶液(废糖蜜浓度为2.0g/L)＝1.0kg：2.0L，置于配有搅拌装置容器中；用氢氧化钠溶液调节体系的pH值为8.0；再接种由自主驯化的菌株Y2，该菌株为菌液形式使用，保存于含有电解锰渣固体的废糖蜜液体培养基(废糖蜜浓度为5g/L)中，细菌浓度为109CFU/mL；接种量为6w％(以细菌浓度为109CFU/mL的菌液质量计)；并保持外部温度为35℃，搅拌周期为15天，搅拌速度为220rpm，期间视水分蒸发情况补充废糖蜜水溶液使电解锰渣、废糖蜜水溶液的质量体积配比维持在1.0kg:2.0L；15天后过滤使固液分离，将滤液的pH值用氢氧化钠溶液调节至9.5可沉淀回收，将沉淀物作 XPS元素分析和FTIR分析可得沉淀物为复盐混合物硫酸铵镁和硫酸铵锰；将复盐混合物溶解做元素全谱分析，具体为：复盐混合物溶解于一定量超纯水后，并用0.45μm滤膜过滤样品，利用火焰原子吸收光谱仪测得溶液中镁离子和锰离子浓度，利用《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法HJ 535-2009》测得溶液中铵根离子浓度，利用《GB/T 13025.8-1991制盐工业通用试验方法硫酸根离子的测定》测得溶液中硫酸根离子浓度。最后通过物料衡算可得产物的纯度为：

87.28％(该纯度指产物中硫酸铵镁和硫酸铵锰的总质量百分比含量)；滤液为菌株Y2作用后的浸出液。

检测浸出液中有害成分(As、Cr、Mn、Mg、NH3-H)，计算得出电解锰渣中As、Cr、Mn、Mg、NH3-H浸出率。

式中η浸为浸出率，M0为电解锰渣中某有害成分的质量；M为浸出液中该有害成分的质量；其结果如表6所示。

表6

发芽率实验：将经本实施例处理后的电解锰渣填满边长为15cm的立方体容器各10份，其中5份在表面均匀播种高羊茅种子20颗；另外5份在表面均匀播种番茄种子10颗；保持充足的光照时间和水分，7天后计算发芽情况并计算发芽率：

式中GI为发芽率，X0为供实验种子数，颗；X发芽种子数，颗；其结果如下：

高羊茅种子发芽率：95％，番茄种子发芽率：94％。

所有的发芽种子均至少能持续生长一个生命周期。

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对发明进行了详细的描述，但本领域的技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

序列表

<110> 中南民族大学

<120> 一种自主驯化的菌株Y2及其应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1410

<212> DNA

<213> 解单端孢菌素微杆菌(Microbacterium trichothecenolyticum)

<400> 1

gctgctacct gcagtcgacg gtgaagccaa gcttgcttgg tggatcagtg gcgaacgggt 60

gagtaacacg tgagcaacct gccctggact ctgggataag cgctggaaac ggcgtctaat 120

actggatatg agcctctatc gcatggtggg ggttggaaag attttttggt ctgggatggg 180

ctcgcggcct atcagcttgt tggtgaggta atggctccac caaggcgtcg acgggtagcc 240

ggcctgagag ggtgaccggc cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg 300

cagcagtggg gaatattgca caatgggcgg aagcctgatg cagcaacgcc gcgtgaggga 360

tgacggcctt cgggttgtaa acctctttta gcagggaaga agcgagagtg acggtacctg 420

cagaaaaagc gccggctaac tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg gcgcaagcgt 480

tatccggaat tattgggcgt aaaagctcgt aggcggtttg tcgcgtctgc tgtgaaatcc 540

cgaggctcaa cctcgggcct gcagtgggta cgggcagact agagtgcggt aggggagatt 600

ggaattcctg gtgtagcggt ggaatgcgca gatatcagga ggaacaccga tggcgaaggc 660

agatctctgg gccgtaactg acgctgagga gcgaaagggt ggggagcaaa caggcttaga 720

taccctggta gtccaccccg taaacgttgg gaactagttg tggggaccat tccacggttt 780

ccgtgacgca gctaacgcat taagttcccc gcctggggag tacggccgca aggctaaaac 840

tcaaaggaat tgacggggac ccgcacaagc ggcggagcat gcggattaat tcgaagcaac 900

gcgaagaacc ttaccaaggc ttgacataca ccagaacacc gtagaaatac gggactcttt 960

ggacactggt gaacaggtgg tgcatggttg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt 1020

aagtcccgca acgagcgcaa ccctcgttct atgttgccag cacgtaatgg tgggaactca 1080

tgggatactg ccggggtcaa ctcggaggaa ggtggggatg acgtcaaatc atcatgcccc 1140

ttatgtcttg ggcttcacgc atgctacaat ggccggtaca aagggctgca ataccgtgag 1200

gtggagcgaa tcccaaaaag ccggtcccag ttcggattga ggtctgcaac tcgacctcat 1260

gaagtcggag tcgctagtaa tcgcagatca gcaacgctgc ggtgaatacg ttcccgggtc 1320

ttgtacacac cgcccgtcaa gtcatgaaag tcggtaacac ctgaagccgg tggcccaacc 1380

cttgtggagg gagccgtcga agatgatcga 1410

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 通用引物27F(Artificial Sequence)

<400> 2

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 3

<211> 21

<212> DNA

<213> 通用引物1492R(Artificial Sequence)

<400> 3

acggctacct tgttacgact t 21

一种自主驯化的菌株Y2及其应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。