专利摘要
本发明涉及一种甾体化合物的制备方法。该甾体化合物的制备方法通过使用结构式为的化合物A为起始原料，通过通过typeII[5+2]反应作为关键反应，高效，快速地构建出含有桥头双键的、大张力的[4,4,1]双环骨架，利用锂‑乙胺的条件切断碳氧双键；利用叔丁醇钾在有氧条件氧化去甲醛化得到酮，最后利用锂试剂加成引入边链，从而制备得到甾体化合物cyclocitrinol，即通过化学合成的方法制备得到结构式为的甾体化合物，以增加该甾体化合物的来源，以便于研究和使用。
权利要求
1.一种甾体化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
在无水和-78℃的条件下，将结构式为
在室温下，将所述第一粗产物与2-碘酰基苯甲酸在第二有机溶剂中反应，得到结构式为
在无水和0℃的条件下，将所述化合物C与叠氮基三甲基硅烷在第三有机溶剂中反应1小时～5小时，然后加入碘和吡啶，并在室温下继续反应10小时～14小时，得到结构式为
在室温和保护气体的气氛中，将所述化合物D与噻吩-2-甲酸亚铜、醋酸锂、催化剂和结构式为
将所述化合物F、二氯化镍及硼氢化钠在第五有机溶剂中于-78℃下混合，直至反应体系从-78℃升温至室温，得到结构式为
在无水和-78℃的条件下，将结构式为
在室温下，将所述化合物I与四丁基氟化铵在第七有机溶剂中反应0.5小时～2小时，然后在0℃的条件下加入水、醋酸钠、碳酸氢钠和N-溴代丁二酰亚胺，并在0℃的条件下反应0.5小时～1小时，得到含有结构式为
在无水和室温下，将所述第二粗产物、4-二甲氨基吡啶、2,2,6,6-四甲基哌啶及醋酸酐在第八有机溶剂中反应，得到含有结构式为
在无水条件下，将所述第三粗产物和2,2,6,6-四甲基哌啶在第九有机溶剂中于145℃～160℃下反应，得到结构式为
在0℃的条件下，将所述化合物L与硼氢化钠在四氢呋喃和水的混合液中反应，得到含有结构式为
在无水和-78℃的条件下，将所述第四粗产物与双(三甲基硅烷基)氨基钾在第十有机溶剂中反应0.1小时～1小时，然后加入二硫化碳和碘甲烷，继续反应1小时～2小时，得到含有结构式为
在80℃～110℃和保护气体的氛围下，将所述第五粗产物、偶氮二异丁腈与三正丁基锡化氢在第十一有机溶剂中反应，得到结构式为
在0℃的条件下，将所述化合物O、2,4,6-三甲基吡啶、二氯亚砜及吡啶在第十二有机溶剂中反应，得到含有结构式为
在无水和室温下，将所述第六粗产物和锂在乙胺中反应，得到结构式为
在室温下，将所述化合物Q、四丁基氯化铵、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物与N-氯代丁二酰亚胺在第十三有机溶剂和碳酸盐缓冲液的混合溶液中反应，得到结构式为
在无水和-78℃的条件下，将所述化合物R、2,6-二甲基吡啶与三乙基硅基三氟甲磺酸酯在第十四有机溶剂中反应，得到结构式为
在室温下，将所述化合物S和叔丁醇钾在第十五有机溶剂中于无水无氧环境下进行拔氢反应，然后在有氧环境下反应0.1小时～0.3小时，得到结构式为
在无水和-78℃的条件下，将结构式为
2.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述然后加入三甲基氯硅烷继续反应的步骤中，采用薄层色谱法检测反应是否完全。
3.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述第一有机溶剂为无水四氢呋喃或无水乙醚。
4.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述第二有机溶剂为二甲亚砜或N,N-二甲基甲酰胺。
5.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述在无水和0℃的条件下，将所述化合物C与叠氮基三甲基硅烷在第三有机溶剂中反应1小时～5小时，然后加入碘和吡啶，并在室温下继续反应10～14小时的步骤具体为：在无水条件下，将所述化合物C溶解在所述第三有机溶剂中，得到化合物C的第三有机溶液；将所述碘溶解在所述吡啶中，得到碘的吡啶溶液；在0℃的条件下，将所述叠氮基三甲基硅烷加入所述化合物C的第三有机溶液中，反应1小时～5小时，然后加入所述碘的吡啶溶液，接着升温至室温，继续反应10小时～14小时。
6.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述第六有机溶剂由无水乙醚及无水正戊烷组成；
所述在无水和-78℃的条件下，将结构式为
7.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述第十五有机溶剂由无水叔丁醇和无水四氢呋喃组成；
所述在室温下，将所述化合物S和叔丁醇钾在第十五有机溶剂中于无水无氧环境下进行拔氢反应的步骤具体为：在室温下，将所述化合物S溶解在所述无水叔丁醇中，得到化合物S的无水叔丁醇溶液；然后在无氧的条件下，在所述化合物S的无水叔丁醇溶液中加入叔丁醇钾的无水四氢呋喃溶液进行所述拔氢反应。
8.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述第十六有机溶剂由无水四氢呋喃和无水正己烷组成；
所述在无水和-78℃的条件下，将结构式为
9.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述将第六粗产物和锂在乙胺中反应的步骤具体为：在室温下，将所述第六粗产物溶解在所述无水乙胺中，然后加入所述锂，反应0.5小时～1小时后，降温至-78℃，依次用异戊二烯及饱和氯化铵溶液淬灭反应。
10.根据权利要求1所述的甾体化合物的制备方法，其特征在于，所述碳酸盐缓冲液为碳酸氢钠和碳酸钾的混合水溶液。
说明书
技术领域
本发明涉及一种甾体化合物的制备方法。
背景技术
cyclocitrinol是在2000年由Kozlovsky等人从海绵penicillium citrinum中分离类得到的一种天然产物，是一类新型的甾体化合物。其正确结构是由Philip Crews小组在2003年通过其家族类似物的X射线单晶衍射结构推测而来。到目前为止共有超过20个家族天然产物被分离和鉴定出来。cyclocitrinols家族天然产物都具有独特的化学结构特点：具有共同的[7-7-6-5]四环核心骨架，其中A/B环系为张力较大的双环[4.4.1]桥环体系；A环中存在一个桥头双键，具有极大的环张力，是全合成中的一大挑战。同时，cyclocitrinol家族天然产物中的多个化合物表现出特殊的生物活性，对GPR12-CHO细胞的测试表明，这一家族中的多个化合物在低浓度即可刺激cAMP(cyclic adenosinemonophosphate)的产生，而且这种活性是受体依赖的，这些结果有助于理解神经细胞的再生机制和探索神经受损相关病症的治疗方法，此外，它们对表皮葡萄球菌和肠球菌也表现出弱的抗性。由于cyclocitrinol独特的结构和显著的生理活性显示出作为药物先导化合物的潜力，因此，合成这类天然产物具有重大意义。然而，迄今为止没有这类天然产物的全合成报道。
发明内容
基于此，有必要提供一种甾体化合物的制备方法，以通过化合合成的方法制备得到甾体化合物cyclocitrinol，以便于增加甾体化合物cyclocitrinol的来源。
一种甾体化合物的制备方法，包括如下步骤：
在无水和-78℃的条件下，将结构式为 的化合物A与二异丙基氨基锂在第一有机溶剂中反应0.5小时～4小时，然后加入三甲基氯硅烷继续反应，得到含有结构式为 的化合物B的第一粗产物，其中，所述化合物A与所述二异丙基氨基锂的摩尔比为1:1～1:2.5，所述化合物A与所述三甲基氯硅烷的摩尔比为1:1～1:2，Me为甲基，TMS为三甲基硅基；
在室温下，将所述第一粗产物与2-碘酰基苯甲酸在第二有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物C，其中，所述化合物A与所述2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1:1～1:2.5；
在无水和0℃的条件下，将所述化合物C与叠氮基三甲基硅烷在第三有机溶剂中反应1小时～5小时，然后加入碘和吡啶，并在室温下继续反应10小时～14小时，得到结构式为 的化合物D，其中，所述化合物C与所述叠氮基三甲基硅烷的摩尔比为1:1～1:5，所述化合物C与所述吡啶的摩尔比为1:5～1:10，所述化合物C与所述碘的摩尔比为1:1～1:5；
在室温和保护气体的气氛中，将所述化合物D与噻吩-2-甲酸亚铜、醋酸锂、催化剂和结构式为 的化合物E在第四有机溶剂中反应8小时～10小时，得到结构式为 的化合物F，其中，所述化合物D与所述噻吩-2-甲酸亚铜的摩尔比为1:1～1:1.5，所述化合物D与所述醋酸锂的摩尔比为1:2～1:4，所述化合物D与所述化合物E的摩尔比为1:1～1:2，TBS为叔丁基二甲基硅基，
将所述化合物F、二氯化镍及硼氢化钠在第五有机溶剂中于-78℃下混合，直至反应体系从-78℃升温至室温，得到结构式为 的化合物G，其中，所述化合物F与所述二氯化镍的摩尔比为1:3～1:8，所述化合物F与所述硼氢化钠的摩尔比为1:5～1:15；
在无水和-78℃的条件下，将结构式为 的化合物H、叔丁基锂在第六有机溶剂中反应0.5小时～1小时，然后加入所述化合物G继续反应，得到结构式为 的化合物I，其中，所述化合物G与所述化合物H的摩尔比为1:2～1:4，所述化合物G与所述叔丁基锂的摩尔比为1:3～1:6，TIPS为三异丙基硅基；
在室温下，将所述化合物I与四丁基氟化铵在第七有机溶剂中反应0.5小时～2小时，然后在0℃的条件下加入醋酸钠、碳酸氢钠和N-溴代丁二酰亚胺，并在0℃的条件下反应0.5小时～1小时，得到含有结构式为 的化合物J的第二粗产物，其中，所述化合物I与所述四丁基氟化铵的摩尔比为1:2.5～1:4，所述化合物I与所述醋酸钠的摩尔比为1:1～1:3，所述化合物I与所述碳酸氢钠的摩尔比为1:1～1:3，所述化合物I与所述N-溴代丁二酰亚胺的摩尔比为1:1～1:2；
在无水和室温下，将所述第二粗产物、4-二甲氨基吡啶、2,2,6,6-四甲基哌啶及醋酸酐在第八有机溶剂中反应，得到含有结构式为 的化合物K的第三粗产物，其中，所述化合物I与所述4-二甲氨基吡啶的摩尔比为1:0.1～1:1，所述化合物I与所述2,2,6,6-四甲基哌啶的摩尔比例为1:2～1:4，所述化合物I与所述醋酸酐的摩尔比例为1:2～1:4，Ac为乙酰基；
在无水条件下，将所述第三粗产物和2,2,6,6-四甲基哌啶在第九有机溶剂中于145℃～160℃下反应，得到结构式为 的化合物L，其中，所述化合物I与所述2,2,6,6-四甲基哌啶的摩尔比为1:1.5～1:4；
在0℃的条件下，将所述化合物L与硼氢化钠在四氢呋喃和水的混合液中反应，得到含有结构式为 的化合物M的第四粗产物，其中，所述化合物L与所述硼氢化钠的摩尔比为1:1～1:3；
在无水和-78℃的条件下，将所述第四粗产物与双(三甲基硅烷基)氨基钾在第十有机溶剂中反应0.1小时～1小时，然后加入二硫化碳和碘甲烷，继续反应1小时～2小时，得到含有结构式为 的化合物N的第五粗产物，其中，所述化合物L与所述双(三甲基硅烷基)氨基钾的摩尔比为1:1～1:1.5，所述化合物L与所述二硫化碳的摩尔比为1:2～1:8，所述化合物L与所述碘甲烷的摩尔比为1:2～1:8；
在80℃～110℃和保护气体的氛围下，将所述第五粗产物、偶氮二异丁腈与三正丁基锡化氢在第十一有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物O，其中，所述化合物L与所述偶氮二异丁腈的摩尔比为1:0.1～1:0.4，所述化合物L与所述三正丁基锡化氢的摩尔比为1:4～1:10；
在0℃的条件下，将所述化合物O、2,4,6-三甲基吡啶、二氯亚砜及吡啶在第十二有机溶剂中反应，得到含有结构式为 的化合物P的第六粗产物，其中，所述化合物O与所述2,4,6-三甲基吡啶的摩尔比为1:5～1:10，所述化合物O与所述二氯亚砜的摩尔比为1:2～1:5，所述化合物O与所述吡啶的摩尔比为1:4～1:6；
在无水和室温下，将所述第六粗产物和锂在乙胺中反应，得到结构式为 化合物Q，其中，所述化合物O与所述锂的摩尔比为1:5～1:20；
在室温下，将所述化合物Q、四丁基氯化铵、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物与N-氯代丁二酰亚胺在第十三有机溶剂和碳酸盐缓冲液的混合溶液中反应，得到结构式为 的化合物R，其中，所述化合物Q与所述四丁基氯化铵的摩尔比为1:2～1:5，所述化合物Q与所述2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物的摩尔比为1:0.2～1:1，所述化合物Q与所述N-氯代丁二酰亚胺的摩尔比为1:2～1:8；
在无水和-78℃的条件下，将所述化合物R、2,6-二甲基吡啶与三乙基硅基三氟甲磺酸酯在第十四有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物S，其中，所述化合物R与所述2,6-二甲基吡啶的摩尔比为1:3～1:6，所述化合物R与所述三乙基硅基三氟甲磺酸酯的摩尔比为1:2～1:4，TES为三乙基硅基；
在室温下，将所述化合物S和叔丁醇钾在第十五有机溶剂中于无水无氧环境下进行拔氢反应，然后在有氧环境下反应0.1小时～0.3小时，得到结构式为 的化合物T，其中，所述化合物S与所述叔丁醇钾的摩尔比为1:2～1:5；
在无水和-78℃的条件下，将结构式为 的化合物U和正丁基锂在第十六有机溶剂中反应0.5小时～1小时，然后加入所述化合物T，继续反应0.1小时～1小时，再用甲醇淬灭反应，得到反应液，接着在室温下，在所述反应液中加入四丁基氟化铵，并反应1小时～2小时，得到结构式为 的甾体化合物，其中，所述化合物T与所述化合物U的摩尔比为1:4～1:8，所述化合物T与所述正丁基锂的摩尔比为1:3～1:6，所述化合物T与所述四丁基氟化铵的摩尔比为1:12～1:20，X选自
上述甾体化合物的制备方法通过type II[5+2]反应作为关键反应，高效，快速地构建出含有桥头双键的、大张力的[4,4,1]双环骨架，利用锂-乙胺的条件切断碳氧双键；利用叔丁醇钾在有氧条件氧化去甲醛化得到酮，最后利用锂试剂加成引入边链，从而制备得到甾体化合物cyclocitrinol，即通过化学合成的方法制备得到甾体化合物cyclocitrinol，以增加甾体化合物cyclocitrinol的来源，以便于研究和使用。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面对本发明进行更全面的描述。以下给出了本发明的较佳的实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
一实施方式的甾体化合物的制备方法，用于制备甾体化合物cyclocitrinol，该方法包括如下步骤：
步骤S110：在无水和-78℃的条件下，将结构式为 的化合物A与二异丙基氨基锂在第一有机溶剂中反应0.5小时～4小时，然后加入三甲基氯硅烷继续反应，得到含有结构式为 的化合物B的第一粗产物。
其中，化合物A与二异丙基氨基锂的摩尔比为1:1～1:2.5，化合物A与三甲基氯硅烷的摩尔比为1:1～1:2，Me为甲基，TMS为三甲基硅基。
具体地，加入三甲基氯硅烷继续反应步骤中，采用薄层色谱法检测反应是否完全。加入三甲基氯硅烷继续反应的时间为1小时～4小时。第一有机溶剂为无水四氢呋喃或无水乙醚。
具体地，在步骤S110中，待反应完全之后，用饱和氯化铵溶液淬灭反应后，用乙醚稀释、萃取反应液，水相用乙醚萃取，有机相依次用饱和氯化铵及饱和食盐水洗涤。洗涤后的有机相用无水硫酸钠干燥过滤，减压下旋干有机溶剂，得到的液体用硅胶柱快速洗脱，得到第一粗产物。其中，洗脱液为体积比为1:10:0.01的乙酸乙酯、正己烷和三乙胺。
步骤S120：在室温下，将第一粗产物与2-碘酰基苯甲酸在第二有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物C。
化合物A与2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1:1～1:2.5。在本文中，所指的室温为20℃～30℃。
具体地，第二有机溶剂为二甲亚砜或N,N-二甲基甲酰胺。
具体地，将第一粗产物与2-碘酰基苯甲酸在第二有机溶剂中反应的步骤中，采用薄层色谱法检测直至第一粗产物消失，即反应完全。将第一粗产物与2-碘酰基苯甲酸在第二有机溶剂中反应的时间为1小时～5小时。
具体地，步骤S120的第一粗产物与2-碘酰基苯甲酸在第二有机溶剂中反应得到的反应液用乙醚稀释、萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，洗涤后的有机相用无水硫酸钠固体干燥后过滤，再在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析分离，即得到纯化的化合物C。
步骤S130：在无水和0℃的条件下，将化合物C与叠氮基三甲基硅烷在第三有机溶剂中反应1小时～5小时，然后加入碘和吡啶，并在室温下继续反应10小时～14小时，得到结构式为 的化合物D。
其中，化合物C与叠氮基三甲基硅烷的摩尔比为1:1～1:5，化合物C与吡啶的摩尔比为1:5～1:10，化合物C与碘的摩尔比为1:1～1:5。
在本实施方式中，步骤S130具体为：在无水条件下，将化合物C溶解在第三有机溶剂中，得到化合物C的第三有机溶液；将碘溶解在吡啶中，得到碘的吡啶溶液；在0℃的条件下，将叠氮基三甲基硅烷加入化合物C的第三有机溶液中，反应1小时～5小时，然后加入碘的吡啶溶液，接着升温至室温，继续反应10小时～14小时。此步骤如此操作有利于提高化合物D的产率。
具体地，第三有机溶剂为无水二氯甲烷或氯仿。
具体地，加入碘和吡啶，并在室温下继续反应10小时～14小时的步骤会后：将反应体系降至0℃，加入饱和硫代硫酸钠淬灭反应，用乙醚稀释、萃取反应体系，有机相依次用饱和氯化铵，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠固体干燥过滤后，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析，得到纯化的化合物D。
步骤S140：在室温和保护气体的气氛中，将化合物D与噻吩-2-甲酸亚铜(CuTC)、醋酸锂、催化剂和结构式为 的化合物E在第四有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物F。
化合物D与噻吩-2-甲酸亚铜的摩尔比为1:1～1:1.5，化合物D与醋酸锂的摩尔比为1:2～1:4，化合物D与化合物E的摩尔比为1:1～1:2，TBS为叔丁基二甲基硅基，
具体地，催化剂为四三苯基膦钯。更具体地，化合物D与催化剂的摩尔比为1:0.01～1:0.05。
具体地，第四有机溶剂为氮甲基吡咯烷酮或四氢呋喃。保护气体为氮气或氩气。
具体地，化合物D与噻吩-2-甲酸亚铜、醋酸锂、四三苯基膦钯和化合物E反应的时间为8小时～10小时。步骤S140中，在化合物D与噻吩-2-甲酸亚铜、醋酸锂、四三苯基膦钯和化合物E在第四有机溶剂中反应8小时～10小时之后得到的反应液用乙醚稀释、萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，再无水硫酸钠固体干燥过滤，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析后，得到纯化的化合物F。
步骤S150：将化合物F、二氯化镍及硼氢化钠在第五有机溶剂中于-78℃下混合，直至反应体系从-78℃升温至室温，得到结构式为 的化合物G。
其中，化合物F与二氯化镍的摩尔比为1:3～1:8，化合物F与硼氢化钠的摩尔比为1:5～1:15。二氯化镍通过六水合二氯化镍的方式加入，也可以直接加入纯的二氯化镍。
具体地，第五有机溶剂为甲醇、或者为甲醇和水的混合溶液。
具体地，步骤S150中，反应体系升温至室温之后，用乙酸乙酯稀释反应体系，随后加入硅藻土，过滤所得的母液依次用饱和氯化铵溶液、饱和食盐水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，再经过滤后，在减压下将有机溶剂旋干，得到的液体用硅胶柱层析，得到纯化后的化合物G。
步骤S160：在无水和-78℃的条件下，将结构式为 的化合物H、叔丁基锂在第六有机溶剂中反应0.5小时～1小时，然后加入化合物G继续反应，得到结构式为 的化合物I。
化合物G与化合物H的摩尔比为1:2～1:4，化合物G与叔丁基锂的摩尔比为1:3～1:6，TIPS为三异丙基硅基。
在本实施方式中，第六有机溶剂由无水乙醚及无水正戊烷组成；此时，步骤S160具体为：在-78℃的条件下，将化合物H溶解在无水乙醚中，形成化合物H的乙醚溶液；将叔丁基锂的正戊烷溶液加入化合物H的乙醚溶液中反应0.5小时～1小时，然后加入化合物G的无水乙醚溶液，继续反应。如此操作有利于使化合物I具有较高的产率。
需要说明的是，第六有机溶剂也不限由无水乙醚及无水正戊烷组成，第六有机溶剂还可以为无水四氢呋喃或无水正戊烷。
具体地，加入化合物G继续反应的时间为1小时～2小时。
具体地，步骤S160中，加入化合物G继续反应的步骤后用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙醚稀释反应液，合并的有机相依次用饱和氯化铵和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥过滤后，在减压下将有机溶剂旋干，得到的液体用硅胶柱层析，得到纯化的化合物I。
步骤S170：在室温下，将化合物I与四丁基氟化铵在第七有机溶剂中反应0.5小时～2小时，然后在0℃的条件下加入水、醋酸钠、碳酸氢钠和N-溴代丁二酰亚胺，并在0℃的条件下反应0.5小时～1小时，得到含有结构式为 的化合物J的第二粗产物。
化合物I与四丁基氟化铵的摩尔比为1:2.5～1:4，化合物I与醋酸钠的摩尔比为1:1～1:3，化合物I与碳酸氢钠的摩尔比为1:1～1:3，化合物I与N-溴代丁二酰亚胺的摩尔比为1:1～1:2。
具体地，第七有机溶剂为四氢呋喃、或者为四氢呋喃和水的混合溶液。
具体地，步骤S170中，加入水、醋酸钠、碳酸氢钠和N-溴代丁二酰亚胺，并在0℃的条件下反应0.5小时～1小时后用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭反应，用乙酸乙酯稀释、萃取，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤，在减压下将有机溶剂旋干，即得到含有化合物J的第二粗产物。
步骤S180：在无水和室温下，将第二粗产物、4-二甲氨基吡啶、2,2,6,6-四甲基哌啶及醋酸酐在第八有机溶剂中反应，得到含有结构式为 的化合物K的第三粗产物。
其中，化合物I与4-二甲氨基吡啶的摩尔比为1:0.1～1:1，化合物I与所述2,2,6,6-四甲基哌啶的摩尔比例为1:2～1:4，化合物I与醋酸酐的摩尔比例为1:2～1:4，Ac为乙酰基。
具体地，第八有机溶剂为无水二氯甲烷或无水乙腈。
具体地，步骤S180中，第二粗产物、4-二甲氨基吡啶、2,2,6,6-四甲基哌啶及醋酸酐在第八有机溶剂中反应得到的反应液用硅胶短柱过滤，滤液在减压下旋干浓缩，即得到第三粗产物。第二粗产物、4-二甲氨基吡啶、2,2,6,6-四甲基哌啶及醋酸酐在第八有机溶剂中反应的时间为0.5小时～1小时。
步骤S190：在无水条件下，将第三粗产物和2,2,6,6-四甲基哌啶在第九有机溶剂中于145℃～160℃下反应，得到结构式为 的化合物L。
其中，化合物I与2,2,6,6-四甲基哌啶的摩尔比为1:1.5～1:4。具体地，第九有机溶剂为无水乙腈、无水甲苯或无水二氯甲烷等。步骤S190中，第三粗产物和2,2,6,6-四甲基哌啶在第九有机溶剂中于145℃～160℃下反应的时间为10小时～12小时。
进一步地，第三粗产物和2,2,6,6-四甲基哌啶在第九有机溶剂中于145℃～160℃下反应得到的反应液冷却，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析，得到纯化的化合物L。
步骤S210：在0℃的条件下，将化合物L与硼氢化钠在四氢呋喃和水的混合液中反应，得到含有结构式为 的化合物M的第四粗产物。
其中，化合物L与硼氢化钠的摩尔比为1:1～1:3。
具体地，四氢呋喃和水的混合液中，四氢呋喃和水的体积比为2:1～6:1。
具体地，化合物L与硼氢化钠在四氢呋喃和水的混合液中反应的时间为0.5小时～2小时。
进一步地，化合物L与硼氢化钠在四氢呋喃和水的混合液中反应后用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯稀释、萃取，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤，在减压下将有机溶剂旋干，得到第四粗产物M。
步骤S220：在无水和-78℃的条件下，将第四粗产物与双(三甲基硅烷基)氨基钾在第十有机溶剂中反应0.1小时～1小时，然后加入二硫化碳和碘甲烷，继续反应1小时～2小时，得到含有结构式为 的化合物N的第五粗产物。
其中，化合物L与双(三甲基硅烷基)氨基钾的摩尔比为1:1～1:1.5，化合物L与二硫化碳的摩尔比为1:2～1:8，化合物L与碘甲烷的摩尔比为1:2～1:8。
具体地，第十有机溶剂为无水四氢呋喃或无水乙醚。
具体地，加入二硫化碳和碘甲烷，继续反应1小时～2小时后，用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯稀释、萃取，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤。在减压下将有机溶剂旋干。
步骤S230：在80℃～110℃和保护气体的氛围下，将第五粗产物、偶氮二异丁腈与三正丁基锡化氢在第十一有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物O。
其中，化合物L与偶氮二异丁腈的摩尔比为1:0.1～1:0.4，化合物L与三正丁基锡化氢的摩尔比为1:4～1:10。
具体地，第十一有机溶剂为无水甲苯或无水苯。保护气体为氩气或氮气。将第五粗产物、偶氮二异丁腈与三正丁基锡化氢在第十一有机溶剂中反应的时间为1小时～2小时。
具体地，步骤S230中，将第五粗产物、偶氮二异丁腈与三正丁基锡化氢在第十一有机溶剂中反应后的反应液冷却至室温，再将反应液旋干浓缩后，所得液体用硅胶层析分离纯化，得到纯化的化合物O。
步骤S240：在0℃的条件下，将化合物O、2,4,6-三甲基吡啶、二氯亚砜及吡啶在第十二有机溶剂中反应，得到含有结构式为 的化合物P的第六粗产物。
其中，化合物O与2,4,6-三甲基吡啶的摩尔比为1:5～1:10，化合物O与二氯亚砜的摩尔比为1:2～1:5，化合物O与吡啶的摩尔比为1:4～1:6。
具体地，第十二有机溶剂为无水二氯甲烷或无水1,2-二氯乙烷。化合物O、2,4,6-三甲基吡啶、二氯亚砜及吡啶在第十二有机溶剂中反应的时间为0.2小时～0.5小时。
进一步地，化合物O、2,4,6-三甲基吡啶、二氯亚砜及吡啶在第十二有机溶剂中反应后用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应后，用乙醚稀释、萃取，有机相依次用盐酸，饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥，过滤。在减压下将有机溶剂旋干后，得到第六粗产物。其中，第六粗产物为三级羟基消除产物P、P'及P”的混合物；其中，P:P':P”＝9:1:1。P'和P”的结构式分别如下：
步骤S250：在无水和室温下，将第六粗产物和锂在乙胺中反应，得到结构式为 化合物Q。
其中，化合物O与锂的摩尔比为1:5～1:20。
在本实施例中，将第六粗产物和锂在无水乙胺中反应的步骤具体为：在室温的条件下，将第六粗产物溶解在无水乙胺中，然后加入锂，反应0.5小时～1小时后，降温至-78℃，依次用异戊二烯及饱和氯化铵溶液淬灭反应。
具体地，用异戊二烯及饱和氯化铵溶液淬灭反应后，加入乙醚稀释、萃取，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析分离纯化，得到纯化的化合物Q。
步骤S260：在室温下，将化合物Q、四丁基氯化铵、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物与N-氯代丁二酰亚胺在第十三有机溶剂和碳酸盐缓冲液的混合溶液中反应，得到结构式为 的化合物R。
其中，化合物与四丁基氯化铵的摩尔比为1:2～1:5，化合物Q与2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物的摩尔比为1:0.2～1:1.0，化合物Q与N-氯代丁二酰亚胺的摩尔比为1:2～1:8。
具体地，第十三有机溶剂为二氯甲烷。碳酸盐缓冲液为碳酸氢钠和碳酸钾的混合水溶液。其中，在碳酸盐的缓冲液中，碳酸氢钠的摩尔浓度为0.5mol/L，碳酸钾的摩尔浓度为0.05mol/L。碳酸盐缓冲液的pH值为8.6。
具体地，将化合物Q、四丁基氯化铵、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物与N-氯代丁二酰亚胺在第十三有机溶剂和碳酸盐缓冲液的混合溶液中反应的步骤中，用薄层色谱法检测反应是否完全。
具体地，将化合物Q、四丁基氯化铵、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物与N-氯代丁二酰亚胺在第十三有机溶剂和碳酸盐缓冲液的混合溶液中反应得到的反应液用乙酸乙酯稀释、萃取，有机相依次用饱和硫代硫酸钠，饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，有机相减压浓缩后，残留物用硅胶柱分离，得到纯化的化合物R。
步骤S270：在无水和-78℃的条件下，将化合物R、2,6-二甲基吡啶与三乙基硅基三氟甲磺酸酯在第十四有机溶剂中反应，得到结构式为 的化合物S。
其中，化合物R与2,6-二甲基吡啶的摩尔比为1:3～1:6，化合物R与三乙基硅基三氟甲磺酸酯的摩尔比为1:2～1:4，TES为三乙基硅基。
具体地，第十四有机溶剂为无水二氯甲烷或无水1,2-二氯乙烷。
具体地，化合物R、2,6-二甲基吡啶与三乙基硅基三氟甲磺酸酯在第十四有机溶剂中反应0.5小时～1小时后，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，用乙酸乙酯稀释、萃取反应液，有机相经饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥，过滤，有机相减压浓缩后，残余物硅胶柱层析分离纯化，得到纯化的化合物S。
步骤S280：在室温下，将化合物S和叔丁醇钾在第十五有机溶剂中于无水无氧环境下进行拔氢反应，然后在有氧环境下反应0.1小时～0.3小时，得到结构式为 的化合物T。
其中，化合物S与叔丁醇钾的摩尔比为1:2～1:5。
在本实施方式中，第十五有机溶剂由无水叔丁醇和无水四氢呋喃组成。此时，在室温下，将化合物S和叔丁醇钾在第十五有机溶剂中于无水无氧环境下进行拔氢反应的步骤具体为：在室温下，将化合物S溶解在无水叔丁醇中，得到化合物S的无水叔丁醇溶液；然后在无氧的条件下，在化合物S的无水叔丁醇溶液中加入叔丁醇钾的无水四氢呋喃溶液进行拔氢反应。该操作有利于提高化合物T的产率。
需要说明的是，第十五有机溶剂不限于由无水叔丁醇和无水四氢呋喃组成，第十五有机溶剂还可以为无水叔丁醇或无水四氢呋喃；若第十五有机溶剂为无水叔丁醇，在化合物S的无水叔丁醇溶液中加入叔丁醇钾的无水叔丁醇溶液进行拔氢反应；若第十五有机溶剂为无水四氢呋喃，将化合物S溶解在无水四氢呋喃中，得到化合物S的无水四氢呋喃溶液；然后在无氧的条件下，在化合物S的无水四氢呋喃溶液中加入叔丁醇钾的无水四氢呋喃溶液进行拔氢反应。
具体地，步骤S280中，在有氧环境下反应0.1小时～0.3小时后，用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取反应液，有机相经饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥，过滤，有机相减压浓缩后，残余物硅胶柱层析分离纯化，得到纯化的化合物T。
步骤S290：在无水和-78℃的条件下，将结构式为 的化合物U和正丁基锂在第十六有机溶剂中反应0.5小时～1小时，然后加入化合物T，继续反应0.1小时～1小时，再用甲醇淬灭反应，得到反应液，接着在室温下，在反应液中加入四丁基氟化铵，并反应1小时～2小时，得到结构式为 的甾体化合物。
其中，化合物T与化合物U的摩尔比为1:4～1:8，化合物T与正丁基锂的摩尔比为1:3～1:6，化合物T与四丁基氟化铵的摩尔比为1:12～1:20，X选自
具体地，化合物T与甲醇的摩尔比为1:10～1:100。
在本实施方式中，第十六有机溶剂由无水四氢呋喃和无水正己烷组成。此时，在无水和-78℃的条件下，将化合物U和正丁基锂在第十六有机溶剂中反应0.5小时～1小时，然后加入化合物T，继续反应0.5小时～1小时的步骤具体为：将化合物U溶解在无水四氢呋喃中，然后在-78℃的条件下加入正丁基锂的无水正己烷溶液，并在-78℃下反应0.5小时～1小时，接着加入化合物T的无水四氢呋喃溶液，继续反应0.5小时～1小时。此操作有利于提高甾体化合物的产率。
需要说明的是，第十六有机溶剂不限于由无水四氢呋喃和无水正己烷组成，例如，第十六有机溶剂还可以为无水四氢呋喃或无水正己烷。若第十六有机溶剂为无水四氢呋喃，在-78℃的条件下加入正丁基锂的无水四氢呋喃溶液；若第十六有机溶剂为无水正己烷，将化合物U溶解在无水正己烷中，化合物T以化合物T的无水正己烷溶液的方式加入。
具体地，在所述反应液中加入四丁基氟化铵，并反应1小时～2小时后用饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取反应液，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析，得到纯化的甾体化合物。
上述甾体化合物的制备方法通过type II[5+2]反应作为关键反应，高效，快速地构建出含有桥头双键的、大张力的[4,4,1]双环骨架，利用锂-乙胺的条件切断碳氧双键；利用叔丁醇钾在有氧条件氧化去甲醛化得到酮，最后利用锂试剂加成引入边链，从而制备得到甾体化合物cyclocitrinol，即通过化学合成的方法制备得到甾体化合物cyclocitrinol，以增加甾体化合物cyclocitrinol的来源，以便于研究和使用。该方法操作简单，各步产率较高，适合广泛推广。
以下为具体实施例部分(以下实施例如无特殊说明，则不含有除不可避免的杂质以外的其它未明确指出的组分。)：
实施例1
本实施例的甾体化合物的制备方法的步骤如下：
(1)在-78℃下，将化合物A(20.0g，78.6mmol)溶解于无水四氢呋喃(300mL)中，得到化合物A的四氢呋喃溶液；在-78℃下，在持续搅拌的条件下，将化合物A的四氢呋喃溶液加入二异丙基氨基锂(47.2mL，2.0mol/L)中，并在该温度下搅拌反应半小时，然后加入三甲基氯硅烷(7.5mL，86.5mmol)，在该温度下继续搅拌反应，并用薄层色谱板检测直至反应完全，约1小时，用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙醚稀释、萃取反应液，有机相依次用饱和氯化铵及饱和食盐水洗涤，再用无水硫酸钠干燥过滤，减压下旋干有机溶剂，得到的液体用硅胶短柱(洗脱液为体积比为1:10:0.01的乙酸乙酯、正己烷及三乙胺的混合物)快速洗脱，得到含有化合物B(烯醇硅醚)的第一粗产物，约26.0g。
(2)将上述所得的第一粗产物溶于分析纯的二甲基亚砜(100mL)中，在室温下，加入2-碘酰基苯甲酸(28.6g，102.2mmol)，继续搅拌反应，并用薄层色谱板检测直至第一粗产物消失，约3小时，然后用乙醚稀释、萃取反应液，有机相用饱和食盐水洗涤数次，再将有机相用无水硫酸钠固体干燥后过滤，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析分离，得到化合物C，约为15.8g，收率80％。其中，化合物C的检测数据如下： (c 0.93，CHCl3)；
(3)将碘(50.3g，198.3mmol)溶解在吡啶(44.7mL，555.0mmol)中，得到碘的吡啶溶液；将化合物C(20.0g，79.3mmol)溶于无水二氯甲烷(300mL)中，在0℃条件下加入叠氮基三甲基硅烷(36.5mL，277.6mmol)，并在该温度下搅拌2小时，然后在0℃下缓慢滴加碘的吡啶溶液，反应自然恢复至室温，搅拌过夜(约10小时)至反应完全，然后再将反应体系降至0℃，加入饱和硫代硫酸钠淬灭反应，用乙醚稀释、萃取反应体系，有机相依次用饱和氯化铵，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠固体干燥过滤，再在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析，得到化合物D，约21.0g，收率70％。
化合物D的检测数据如下： (c 1.00，CHCl3)；
(4)在室温下，将化合物D(8.40g，22.2mmol)溶于分析纯的氮甲基吡咯烷酮(50mL)中，然后在氮气保护的环境中依次加入CuTC(4.23g，22.2mmol)、醋酸锂(4.39g，66.6mmol)、四三苯基膦钯(770mg，0.66mmol)、化合物E(16.7g，33.3mmol)，并在室温下搅拌反应8小时，得到的反应液用乙醚稀释、萃取，有机相依次用饱和食盐水洗涤3次、用无水硫酸钠固体干燥，然后过滤，再在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析分离，得到化合物F，约8.53g，产率83％。
化合物F的检测数据如下： (c 1.55，CHCl3)；
(5)在室温下，将化合物F(8.53g，18.3mmol)溶于分析纯甲醇(200mL)中，再加入六水合二氯化镍(25.0g，91.5mmol)，然后降温至-78℃，小心加入硼氢化钠(6.91g，183mmol)，并在-78℃下搅拌反应直至反应体系缓慢升至室温，约3小时。接着用乙酸乙酯(500mL)稀释反应体系，再加入硅藻土(30g)，搅拌半小时后过滤，所得母液依次用饱和氯化铵溶液、饱和食盐水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后，在减压下将有机溶剂旋干，得到的液体用硅胶柱层析，得到化合物G，约5.70g，产率67％。
化合物G的检测数据如下： (c 0.90，MeOH)；
(6)在-78℃下，将化合物H(3.20g，9.90mmol)溶解于无水乙醚(50mL)，得到化合物H的乙醚溶液，然后将11.42mL的叔丁基锂(14.85mmol)的正戊烷溶液(摩尔浓度1.3mol/L)加入到化合物H的乙醚溶液中，并在-78℃下搅拌反应半小时，接着加入化合物G(2.3g，4.95mmol)的无水乙醚(20mL)溶液，继续搅拌反应约1小时，再用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙醚稀释、萃取反应液，水相用乙醚萃取2次后，有机相合并，依次用饱和氯化铵和饱和食盐水洗涤有机相，再将有机相用无水硫酸钠干燥过滤，在减压下将有机溶剂旋干，得到的液体用硅胶柱层析，得到化合物I，约2.90g，产率83％。
化合物I的检测数据如下： (c 0.66，CHCl3)；
化合物I的合成路线如下：
(7)将化合物I(1.93g，2.73mmol)溶于分析纯四氢呋喃(60mL)中，然后在持续搅拌和在室温的条件下，加入6.90mL的四丁基氟化铵(6.90mmol)的四氢呋喃溶液(摩尔浓度1.0mol/L)，继续搅拌半小时至反应完全，接着将反应体系降温至0℃，再依次加入水(20mL)、醋酸钠(0.76g，6.03mmol)，碳酸氢钠(0.33g，3.93mmol)和N-溴代丁二酰亚胺(0.56g，3.14mmol)，并在0℃下反应至反应完全，约半小时，再用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭反应，用乙酸乙酯稀释、萃取，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤。在减压下将有机溶剂旋干，得到含有化合物J的第二粗产物。
(8)在室温下，将第二粗产物溶于无水二氯甲烷(50mL)中，依次加入4-二甲氨基吡啶(0.16g，1.36mmol)、2,2,6,6-四甲基哌啶(1.84mL，10.9mmol)、醋酸酐(0.92mL，8.19mmol)，反应至反应完全，约半小时，反应体系用硅胶短柱快速过滤后，滤液在减压下旋干浓缩，得到含有化合物K的第三粗产物。
(9)将第三粗产物溶于无水乙腈(750mL)后转移至1L封管瓶，加入2,2,6,6-四甲基哌啶(0.92mL，5.45mmol)。加热至155℃反应10小时后，冷却至室温，在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析，得到化合物L，约0.88g，收率为68％。
化合物L的检测数据如下： (c 1.30，CHCl3)；
化合物L的合成路线如下：
(10)在0℃下，将化合物L(0.88g，1.85mmol)溶于分析纯四氢呋喃(32.0mL)和水(8.0mL)中，缓慢加入硼氢化钠(0.21g，5.54mmol)，搅拌至完全反应，约1小时，然后用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯稀释、萃取，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤，再在减压下将有机溶剂旋干，得到含有化合物M的第四粗产物。
(11)在-78℃下，将第四粗产物溶于无水四氢呋喃(30mL)中，在持续搅拌的条件下加入1.94mL的双(三甲基硅烷基)氨基钾的四氢呋喃溶液(浓度为1.0mol/L，1.94mmol)，反应6分钟后，加入二硫化碳(0.42mL，6.98mmol)，碘甲烷(0.43mL，6.98mmol)，继续搅拌1小时，然后用饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯稀释、萃取后，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤，再在减压下将有机溶剂旋干，得到含有化合物N的第五粗产物。
(12)在室温下，将第五粗产物溶于无水甲苯中，用氩气球排气15分钟后，依次加入偶氮二异丁腈(68.0mg，0.41mmol)和三正丁基锡化氢(4.85mL，18.5mmol)，然后加热至80℃，搅拌至反应完全，约1小时，接着冷却至室温，将反应液旋干浓缩后，所得液体用硅胶层析分离纯化，得到化合物O，约140mg，产率51％。
其中，化合物O的检测数据如下： (c 1.10，MeOH)；
(13)在0℃下，将化合物O(250.0mg，0.54mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL)中，依次向反应体系中加入2,4,6-三甲基吡啶(360μL，2.70mmol)、二氯亚砜(120μL，1.62mmol)及吡啶(220μL，2.70mmol)，并在0℃下搅拌至反应完全，约半小时，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应后，用乙醚稀释、萃取，有机相依次用1mol/L的盐酸、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤。在减压下将有机溶剂旋干后，得到含有化合物P的第六粗产物。
(14)在室温下，将第六粗产物溶于无水乙胺中(5mL)，小心加入金属锂(75.6mg，10.8mmol)，搅拌10分钟后溶液变蓝，继续在室温下搅拌45分钟，然后降温至-78℃，依次加入异戊二烯(1mL)和饱和氯化铵溶液(3mL)淬灭反应，接着加入乙醚稀释、萃取反应，有机相依次用饱和氯化铵溶液，饱和食盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠固体干燥，过滤。在减压下将有机溶剂旋干，所得液体用硅胶柱层析分离纯化，得到化合物Q，约99mg，收率51％。
化合物Q的检测数据如下： (c 1.00，MeOH)；
甾体化合物的制备方法专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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