专利摘要

本发明公开了一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物及其应用和另一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物的应用，一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物，从黑面神中提取分离得到化合物1‑4，通过研究发现该化合物1～4在抗炎、降血脂方面具有很好的作用。从黑面神中提取分离得到已知化合物5‑10，通过研究发现该化合物5～10在抗炎、降血脂方面具有很好的作用。该类化合物从植物中提取获得，具有高效、低毒的优点，有望开发为新的抗炎、降血脂药物。

权利要求

1.一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物，结构式分别为：

化合物1：

化合物2：

化合物3：

化合物4：

。

2.权利要求1所述一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物在制备抗炎药物中的应用。

3.权利要求1所述一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物在制备降血脂药物中的应用。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物及其应用。

背景技术

黑面神(Breynia fruticosa(L)Hook.f)为大戟科黑面神属灌木，广泛分布于我国两广地区。黑面神是一种常见的民间用药，传统上用来治疗咽喉痛、皮炎、湿疹、类风湿、创伤性损伤和皮肤溃疡等，具有抗炎、抗病毒、治疗风湿以及降血脂等多种功效。故而，黑面神的药用价值颇高，但目前对于黑面神的研究和开发并不充分，有效成分和作用机制都尚未明确。

近年来对黑面神的提取物研究发现黑面神水提取物具有抗炎活性，对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀及由醋酸引起的组织毛细血管的通透性均具有极显著的抑制作用，而其嫩枝叶水提取物乙酸乙酯部位和正丁醇部位能够治疗小鼠慢性皮炎-湿疹。同时发现黑面神属植物喙果黑面神(Breynia retusa)叶片甲醇提取部位具有明显体外淀粉酶抑制活性，为其作为降血脂药物提供了科学依据。

对黑面神及其属中其他植物的有效成分及其活性研究发现，黑面神中分离得到的黄酮苷类衍生物具有很强的络氨酸酶抑制活性，药物半抑制浓度分别达到0.89μM和0.82μM。Breynia officinalis的干燥全株中分离得到的含硫螺环缩酮倍半萜苷breynin A和breynin B具有很强的口服降血脂活性，能够显著降低大鼠体内的总胆固醇水平。其中，当breynin A给药剂量为0.1mg/kg/day时，体内总胆固醇水平下降34％，活性明显强于breynin B，同等条件下，breyninA效应强度为breynin B的5倍。另外有研究者从黑面神和小叶黑面神中分离到系列的含硫螺环缩酮倍半萜化合物：breynins C-E，G，I和epibreynins B，D-H，但尚未对这些化合物进行活性研究。

大量研究者的工作都表明，黑面神属植物作为抗炎、降血脂的药物在民间广泛应用，其中的含硫螺环缩酮倍半萜具有显著的降血脂作用，为黑面神属植物中一类明显降血脂活性成分。然而，对于黑面神中其他的药用活性成分以及该类化合物的其他药理活性，目前尚未见报道。这在一定程度上限制了黑面神的应用，因此，作为一种有效的抗炎和降血脂民间用药，黑面神具有较高的开发利用价值。

发明内容

针对上述技术问题，本发明的第一目的在于提供一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物。该类化合物从黑面神中分离提纯得到。

本发明的第二目的在于提供该类含硫螺环缩酮倍半萜化合物的应用。

本发明的第三目的在于提供另一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物的应用。

为了实现上述第一目的，本发明所采用的技术方案为：一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物，结构式分别为：

化合物1：

化合物2：

化合物3：

化合物4：

所述一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物在制备抗炎药物中的应用。

所述一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物在制备降血脂药物中的应用。

本发明的第三目的是这样实现的：

一种类含硫螺环缩酮倍半萜化合物在制备抗炎药物中及在制备降血脂药物中的应用，该类含硫螺环缩酮倍半萜化合物的结构式分别为：

化合物5

化合物6

化合物7

化合物8

化合物9

化合物10

本发明通过长期研究，从黑面神中分离鉴定了一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物1～4。通过研究发现该化合物1～4在抗炎、降血脂方面具有很好的作用。本发明还提供了化合物5-10在抗炎、降血脂方面的应用，该类化合物从植物中提取获得，具有高效、低毒的优点，有望开发为新的抗炎、降血脂药物。

附图说明

图1为化合物1的HRESIMS图。

图2为化合物1的1H-NMR图。

图3为化合物1的13C-NMR图。

图4化合物2的HRESIMS图。

图5为化合物2的1H-NMR图。

图6为化合物2的13C-NMR图。

图7化合物3的HRESIMS图。

图8化合物3的1H-NMR图。

图9化合物3的13C-NMR图。

图10化合物4的HRESIMS图。

图11为化合物4的1H-NMR图。

图12为化合物4的13C-NMR图。

图13为化合物5的1H-NMR图。

图14为化合物5的13C-NMR图。

图15化合物6的1H-NMR图。

图16为化合物7的1H-NMR图。

图17化合物8的1H-NMR图。

图18化合物9的1H-NMR图。

图19为化合物10的1H-NMR图。

具体实施方式

下面通过实施例并结合附图，对本发明作进一步说明：

实施例1：含硫螺环缩酮化合物1-10的分离提纯

干燥的黑面神全株(70kg)经粉碎，甲醇回流提取三次，蒸干溶剂后，得到的浸膏在水中分散，正丁醇萃取三次，合并有机层，55℃水浴减压浓缩至干得正丁醇层黑色浸膏3148g。浸膏用甲醇溶解，经在线二维中压液相色谱系统(CG161M，甲醇-水0-90％(梯度洗脱，甲醇的浓度从0-90％)；Toyopeal HW40C，甲醇-水0-90％(梯度洗脱，甲醇的浓度从0-90％))和Silica gel(硅胶)柱层析分离(洗脱液氯仿-甲醇-水体积比7:3:0.2)，得到两个倍半萜富集部位Fr4-2和Fr4-3。

Fr4-3经RP-18色谱柱柱层析(甲醇-水，10％-100％(梯度洗脱，甲醇的浓度从10％-100％))去除样品中的糖类等杂质，分成三个部分Fr4.3.1-Fr4.3.3。Fr4.3.2部分经过一次CG161M柱层析(甲醇-水，0-100％(梯度洗脱，甲醇的浓度从0-100％))和Sepahedex柱层析(洗脱液分析纯甲醇)后，半制备液相制备(乙腈-水，25min，20％-40％(梯度洗脱，乙腈的浓度从20-40％))得到三个高纯度的淡黄色粉末状化合物6(200mg)、7(360mg)、8(360mg)。

Fr4-2经过RP-18柱层析(甲醇-水，10％-100％(梯度洗脱，甲醇的浓度从10-100％))和CG161M柱层析(甲醇-水，0-100％(梯度洗脱，甲醇的浓度从0-100％))，得到3个部分Fr4.2.1-Fr4.2.3和高纯度的淡黄色粉末状化合物5(2.32g)。Fr4.2.2经过Sephadex柱层析(分析纯甲醇)后去制备高效液相色谱(Preparativehigh performance liquidchromatography，PHPLC)粗分段，得到两个部分Fr4.2.2.1-Fr4.2.2.2。

Fr4.2.2.1经过silica gel柱层析(氯仿-甲醇-水，7:3:0.2)和PHPLC制备(乙腈-水，0-20min，20％-40％(梯度洗脱，乙腈的浓度从20-40％))，PHPLC纯化(乙腈-水，0-30min，20％-50％(梯度洗脱，乙腈的浓度从20-50％))得到高纯的淡黄色粉末状化合物2(2.8mg)。

Fr4.2.2.2经过silica gel柱层析(氯仿-甲醇-水，体积比7:3:0.2)，CG161M中压柱层析(36I.D.×310mm，甲醇-水，30％-100％)，Sephadex柱层析(分析纯甲醇)，PHPLC制备(乙腈-水，80min，15％-55％；50min，15％-40％；104min，10％-62％)和制备薄层色谱(Preparative thin-layer chromatography，PTLC)纯化(氯仿-甲醇-水，8:2:0.2)，得到化合物1(38.5mg)，3(2mg)，4(2.9mg)，9(29.1mg)，10(28.9mg)。

化合物1-10的结构鉴定：

化合物1，为淡黄色无定型粉末。根据高分辨质谱HRESIMS m/z 872.2140[M+Na]+，确定其分子式为C35H47NO21S，不饱和度为13。NMR数据归属如下：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.91(H-1)，1.83(m，H-2a)，2.06(dd，J＝14.8，2.8Hz，H-2b)，3.36(dt，J＝13.0，3.0Hz，H-3)，3.72(m，H-4)，4.58(t，J＝1.7Hz，H-5)，1.99(m，H-9a)，2.17(dd，J＝14.7，3.1Hz，H-9B)，5.30(m，H-10)，2.13(m，H-11)，3.58(H-12a)，4.06(t，J＝11.3Hz，H-12b)，0.83(d，J＝6.9Hz，H-13)，8.05(d，J＝8.7Hz，H-16)，6.96(d，J＝8.7Hz，H-17)，6.96(d，J＝8.7Hz，H-19)，8.05(d，J＝8.7Hz，H-20)，3.22(m，H-21a)，3.62(d，J＝9.8Hz，H-21b)，5.77(d，J＝8.2Hz，H-1')，3.3(m，H-2')，3.57(m，H-3')，3.64(m，H-4')，3.42(m，H-5')，3.92(m，H-6'a)，3.81(m，H-6'b)，3.79(d，J＝7.8Hz，H-1”)，3.05(dd，J＝7.8，9.1Hz，H-2”)，3.17(t，J＝9.1Hz，H-3”)，3.24(dd，J＝9.7，9.7Hz，H-4”)，2.42(m，H-5”)，3.48(m，H-6”a)，3.42(m，H-6”b)，13C-NMR(600MHz，CD3OD)70.1(C-1)，26.0(C-2)，35.4(C-3)，43.9(C-4)，78.9(C-5)，74.5(C-6)，211.4(C-7)，99.5(C-8)，31.5(C-9)，68.7(C-10)，，33.0(C-11)，62.2(C-12)，11.5(C-13)，166.2(C-14)，121.6(C-15)，132.0(C-16)，115.5(C-17)，161.8(C-18)，115.8(C-19)，132.1(C-20)，68.7(C-21)，173.3(C-22)，171.2(C-23)，92.5(C-1')，83.4(C-2')，76.4(C-3')，68.7(C-4')，78.9(C-5')，60.8(C-6')，105.6(C-1”)，74.2(C-2”)，76.4(C-3”)，68.7(C-4”)，75.7(C-5”)，60.1(C-6”)。

结构式为

化合物2，根据高分辨质谱HRESIMS m/z 959.2837[M+Na]+，确定其分子式为C40H56O23S，不饱和度为14。NMR数据归属如下：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.13(m，H-2a)，4.28(d，J＝15.0Hz，H-2b)，4.70(d，J＝4.31Hz，H-3)，2.98(dt，J＝14.1，5.1Hz，H-4)，1.62(q，J＝13.0Hz，H-5a)，1.85(dt，J＝13.0，4.2Hz，H-5b)，3.67(brs，H-6)，2.22(dd，J＝14.5，3.7Hz，H-10a)，2.02(dd，J＝14.5，3.7Hz，H-10b)，5.37(brs，H-11)，2.20(m，H-12)，3.65(m，H-13a)，4.08(t，J＝11.5Hz，H-13b)，5.01(brs，H-16)，3.85(d，J＝6.1Hz，H-17)，0.89(d，J＝6.8Hz，H-18)，7.99(d，J＝8.7Hz，H-21)，6.86(d，J＝8.7Hz，H-22)，6.86(d，J＝8.7Hz，H-24)，7.99(d，J＝8.7Hz，H-25)，糖基qui 4.38(d，J＝7.7Hz，H-1')，3.29(dd，J＝7.8，9.2Hz，H-2')，3.45(dd，J＝9.2，9.2Hz，H-3')，3.08(dd，J＝9.2，9.2Hz，H-4')，3.31(m，H-5')，1.28(d，J＝6.0Hz，H-6')，glc 4.05(d，J＝7.8Hz，H-1”)，3.20(dd，J＝7.8，9.2Hz，H-2”)，3.31(m，H-3”)，3.28(m，H-4”)，2.47(m，H-5”)3.55(dd，J＝3.7，11.3Hz，H-6”a)，3.49(dd，J＝1.9，11.3Hz，H-6”b)，qui 5.10(brs，H-1”')，3.91(m，H-2”')，3.66(brd，J＝9.5Hz，H-3”')，3.38(dd，J＝9.5，9.5Hz，H-4”')，3.95(dd，J＝6.6，9.5Hz，H-5”')，1.28(d，J＝6.0Hz，H-6”')，13C-NMR(600MHz，CD3OD)60.9(C-2)，85.8(C-3)，45.7(C-4)，28.6(C-5)，66.7(C-6)，74.2(C-7)，208.6(C-8)，99.5(C-9)，33.4(C-10)，68.3(C-11)，32.8(C-12)，62.6(C-13)，75.1(C-16)，60.8(C-17)，11.6(C-18)，166.2(C-19)，121.0(C-20)，131.9(C-21)，115.4(C-22)，162.5(C-23)，115.4(C-24)，131.9(C-25)，糖基101.3(C-1')，84.0(C-2')，76.0(C-3')，74.6(C-4')，67.7(C-5')，16.5(C-6')，105.2(C-1”)，75.3(C-2”)，82.6(C-3”)，72.1(C-4”)，76.3(C-5”)，60.5(C-6”)，101.1(C-1”')，70.8(C-2”)，70.9(C-3”)，72.5(C-4”)，68.7(C-5”)，16.7(C-6”)。

结构式为：

化合物3，根据高分辨质谱HRESIMS m/z 667.1695[M+Na]+，确定其分子式为C28H36O15S，不饱和度为12。NMR数据归属如下：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.18(brd，J＝15.1Hz，H-2a)，3.77(dd，J＝15.5,5.1Hz，H-2b)，4.60(brs，H-3)，3.18(m，H-4)，1.67(dt，J＝14.6，3.4Hz，H-5a)，1.34(td，J＝13.6，2.1Hz，H-5b)，3.93(brs，H-6)，2.07(m，2H，H-10)，5.37(brs，H-11)，2.15(m，H-12)，3.61(dd，J＝11.2，4.0Hz，H-13a)，3.99(t，J＝11.2Hz，H-13b)，4.81(s，H-16)，3.76(brs，H-17)，0.87(d，J＝6.8Hz，H-18)，7.94(d，J＝8.6Hz，H-21)，6.91(d，J＝8.6Hz，H-22)，6.91(d，J＝8.6Hz，H-24)，7.94(d，J＝8.6Hz，H-25)，糖基4.36(d，J＝7.6Hz，H-1')，3.20(dd，J＝7.6，7.6Hz，H-2')，3.31(m，H-3')，，3.31(m，H-4')，3.23(m，H-5')，3.84(dd，J＝11.8，1.8Hz，H-6'a)，3.66(dd，J＝11.8，5.7Hz，H-6'b)，13C-NMR(600MHz，CD3OD)56.0(C-2)，84.8(C-3)，36.2(C-4)，28.1(C-5)，68.7(C-6)，73.7(C-7)，210.9(C-8)，99.1(C-9)，31.4(C-10)，68.3(C-11)，32.8(C-12)，62.3(C-13)，74.0(C-16)，69.0(C-17)，11.6(C-18)，166.6(C-19)，121.1(C-20)，131.3(C-21)，115.0(C-22)，162.1(C-23)，115.0(C-24)，131.3(C-25)，糖基102.0(C-1')，76.4(C-2')，70.2(C-3')，76.3(C-4')，69.7(C-5')，61.3(C-6')。

结构式为：

化合物4，根据高分辨质谱HRESIMS m/z 945.2688[M+Na]+，确定其分子式为C39H54O23S，不饱和度为14。NMR数据归属如下：1H-NMR(600MHz，CD3OD)4.24(d，J＝15.0Hz，H-2a)，3.09(dd，J＝15.0，4.7Hz，H-2b)，4.66(d，J＝4.1Hz，H-3)3.14(dt，J＝12.4，5.4Hz，H-4，)，1.81(td，J＝14.5，2.0Hz，H-5a)，1.83(dt，J＝14.5，3.0Hz，H-5b)，3.94(brs，H-6)，2.17(d，J＝3.7Hz，H-10a)，2.10(dd，J＝3.0，15.0Hz，H-10b)，5.37(brs，H-11)，2.22(m，H-12)，4.07(t，J＝11.0Hz，H-13a)，3.64(brd，J＝11.0Hz，H-13b)，4.88(s，H-16)，3.93(brs，H-17)，0.89(d，J＝6.8Hz，H-18)，8.01(d，J＝8.6Hz，H-21)，6.87(d，J＝8.6Hz，H-22)，6.87(d，J＝8.6Hz，H-24)，8.01(d，J＝8.6Hz，H-25)，糖基4.41(d，J＝7.3Hz，H-1')，3.26(m，H-2')，3.46(t，J＝8.7Hz，H-3')，3.39(t，J＝9.6Hz，H-4')，3.96(m，H-5')，1.27(d，J＝6.2Hz，H-6')，4.02(d，J＝7.8Hz，H-1”)，3.22(dd，J＝7.8，9.2Hz，H-2”)，3.28(dd，J＝9.2，9.2Hz，H-3”)，3.29(m，H-4”)，2.47(m，H-5”)，3.55(brd，J＝12.5Hz，H-6”a)，3.51(dd，J＝3.6，12.5Hz，H-6”b)，5.12(s，H-1”')，3.92(brs，H-2”')，3.65(dd，J＝9.7，3.3Hz，H-3”')，3.58(dd，J＝9.7，5.8Hz，H-4”')，3.25(brd，J＝11.6Hz，H-5”')，3.85(dd，J＝5.4，11.6Hz，H-6”')，13C-NMR(600MHz，CD3OD)60.5(C-2)，86.2(C-3)，40.0(C-4)，27.3(C-5)，71.6(C-6)，72.5(C-7)，208.5(C-8)99.7(C-9)，32.9(C-10)，70.3(C-11)，34.5(C-12)，62.5(C-13)，74.6(C-16)，72.4(C-17)，11.6(C-18)，166.3(C-19)，121.3(C-20)，131.9(C-21)，115.2(C-22)，162.1(C-23)，115.2(C-24)，131.9(C-25)，糖基102.4(C-1')，83.4(C-2')，75.9(C-3')，72.9(C-4')，69.0(C-5')，16.5(C-6')，105.1(C-1”)，75.2(C-2”)，82.6(C-3”)，68.5(C-4”)，75.6(C-5”)，60.2(C-6”)，101.1(C-1”')，70.8(C-2”')，70.6(C-3”')，68.7(C-4”')，65.4(C-5”')。

结构式为

化合物5，ESIMS m/z 959.50[M+Na]+，NMR数据归属为：1H-NMR(600MHz，CD3OD)4.20(d,J＝14.9Hz，H-2a)，3.12(m，H-2b)，4.67(brd,4.2，H-3)，3.16(m，H-4)，1.81(m，H-5)，3.92(m，H-6)，2.10(m，H-10)，5.38(m，H-11)，2.18(m，H-12)，3.65(m，H-13a)，4.05(m，H-13b)，4.90(brs，H-16)，3.94(m，H-17)，0.88(d,J＝6.9Hz，H-18)，8.05(d,J＝8.4Hz，H-21)，6.88(d,J＝8.4Hz，H-22)，6.88(d,J＝8.4Hz，H-24)，8.05(d,J＝8.4Hz，H-25)，糖基qui4.42(d,J＝7.7Hz，H-1')，3.28(m，H-2')，3.45(t,J＝9.2Hz，H-3')，3.14(m，H-4')，3.33(m，H-5')，1.30(d,J＝6.1Hz，H-6')，glc 4.05(d,J＝7.6Hz，H-1”)，3.24(m，H-2”)，3.31(m，H-3”)，3.30(m，H-4”)，2.48(m，H-5”)，3.52(m，H-6”a)，3.57(m，H-6”b)，rha5.15(d,J＝1.5Hz，H-1”')，3.93(m，H-2”')，3.67(m，H-3”')，3.38(m，H-4”')，3.98(m，H-5”')，1.27(d,J＝6.2Hz，H-6”')。13C-NMR(600MHz，CD3OD)62.0(C-2)，88.1(C-3)，40.1(C-4)，28.9(C-5)，71.7(C-6)，73.6(C-7)，210.3(C-8)，101.3(C-9)，32.9(C-10)，70.1(C-11)，34.4(C-12)，64.2(C-13)，74.6(C-16)，62.6(C-17)，13.1(C-18)，168.0(C-19)，123.0(C-20)，133.3(C-21)116.9(C-22)，163.6(C-23)，116.9(C-24)，133.3(C-25)，糖基qui 103.3(C-1')，85.7(C-2')，77.5(C-3')，76.2(C-4')，73.5(C-5')，18.2(C-6')，glc 106.8(C-1”)，76.9(C-2”)，84.1(C-3”)，69.2(C-4”)，77.6(C-5”)，61.8(C-6”)，rha 102.7(C-1”')，72.4(C-2”')，72.5(C-3”')，74.1(C-4”')，70.3(C-5”')，18.1(C-6”')。确定化合物5为已报道的化合物epibreynin D。

结构式为：

化合物6，NMR数据归属为：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.80(dd,J＝15.5，5.4Hz，H-2a)，3.26(brd,J＝15.5Hz，H-2b)，4.46(brd,J＝5.3Hz，H-3)，3.13(m，H-4)，1.24(m，H-5a)，1.70(dt,J＝14.5，3.3Hz，H-5b)，4.00(m，H-6)，2.12(m，H-10)，5.45(m，H-11)，2.19(m，H-12)，3.68(brd,J＝13.2Hz，H-13a)，3.99(m，H-13b)，4.88(brs，H-16)，3.94(m，H-17)，0.94(d,J＝7.4Hz，H-18)，8.04(d,J＝8.7Hz，H-21)，6.95(d,J＝8.7Hz，H-22)，6.95(d,J＝8.7Hz，H-24)，8.04(d,J＝8.7Hz，H-25)，糖基qui 4.49(d,J＝7.7Hz，H-1')，3.29(m，H-2')，3.47(t,J＝9.2Hz，H-3')，3.14(t,J＝9.2Hz，H-4')，3.31(m，H-5')，1.30(d,J＝6.4Hz，H-6')，glc 4.17(d,J＝7.8Hz，H-1”)，3.44(t,J＝9.2Hz，H-2”)，3.40(t,J＝9.2Hz，H-3”)，3.34(m，H-4”)，2.61(m，H-5”)，3.54(dd,J＝12.4，4.2Hz，H-6a”)，3.68(brd,J＝12.4Hz，H-6b”)，rha 5.15(brs，H-1”')，3.98(m，H-2”')，3.70(m，H-3”')，3.40(t,J＝9.2Hz，H-4”')，3.94(m，H-5”')，1.28(d,J＝6.4Hz，H-6”')。确定化合物6为已报道的化合物breynin D。

结构式为

化合物7，NMR数据归属为：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.25(m，H-2a)，3.73(dd，J＝5.4，14.0Hz，H-2b)，4.50(brs，H-3)，3.10(dt，J＝13.7，4.2Hz，H-4)，1.69(td，J＝2.0，14.0Hz，H-5a)，1.20(brt，J＝14.0Hz，H-5b)，3.94(m，H-6)，2.08(dd，J＝3.0，14.9Hz，H-10a)，2.14(dd，J＝4.2，14.9Hz，H-10b)，5.41(m，H-11)，2.18(m，H-12)，3.85(brd，J＝11.7Hz，H-13a)，3.94(brd，J＝11.7Hz，H-13b)，4.58(brs，H-16)，3.96(m，H-17)，0.88(d，J＝7.1Hz，H-18)，8.04(d，J＝8.4Hz，H-21)，6.95(d，J＝8.4Hz，H-22)，6.95(d，J＝8.4Hz，H-24)，8.04(d，J＝8.4Hz，H-25)，糖基4.52(d，J＝7.6Hz，H-1')，3.31(m，H-2')，3.47(t，J＝9.2Hz，H-3')，3.38(m，H-4')，3.29(m，H-5')，3.73(dd，J＝6.1，12.Hz 1，H-6'a)，3.85(brd，J＝12.1Hz，H-6'b)，4.08(d，J＝7.6Hz，H-1”)，3.25(dd，J＝7.2Hz，7.6，H-2”)，3.35(m，H-3”)，3.30(m，H-4”)，2.51(dd，J＝2.2，6.15Hz，H-5”)，3.52(m，H-6”a)，3.61(d，J＝11.7Hz，H-6”b)，5.15(brs，H-1”')，3.93(m，H-2”')，3.67(dd，J＝11.3，4.3Hz，H-3”')，3.40(m，H-4”')，3.98(m，H-5”')，1.28(d，J＝6.8Hz，H-6”')。确定化合物7为已报道的化合物epibreynin B。

结构式为：

化合物8，NMR数据归属为：1H-NMR(600MHz，CD3OD)4.40(d，J＝15.1Hz，H-2a)，3.12(dd，J＝4.8，15.1Hz，H-2b)，4.71(d，J＝4.4Hz，H-3)，3.18(dt，J＝14.2，5.4Hz，H-4)，1.81(brq，J＝14.4，1.7Hz，H-5a)，1.85(dt，J＝14.4，3.8Hz，H-5b)，3.93(m，H-6)，2.10(dd，J＝3.3，14.7Hz，H-10a)，2.17(dd，J＝3.8，14.7Hz，H-10b)，5.39(m，H-11)，2.20(m，H-12)，3.67(dd，J＝4.2，11.8Hz，H-13a)，4.06(t，J＝11.8Hz，H-13b)，4.91(brs，H-16)，3.93(m，H-17)，0.91(d，J＝7.4Hz，H-18)，8.03(d，J＝8.4Hz，H-21)，6.89(d，J＝8.4Hz，H-22)，6.89(d，J＝8.4Hz，H-24)，8.03(d，J＝8.4Hz，H-25)，糖基4.44(d，J＝7.6Hz，H-1')，3.29(t，J＝9.2Hz，H-2')，3.50(t，J＝9.2Hz，H-3')，3.38(t，J＝9.2Hz，H-4')，3.40(m，H-5')，3.70(dd，J＝5.5，12.4Hz，H-6'a)，3.89(brd，J＝12.4Hz，H-6'b)，4.06(d，J＝7.6Hz，H-1”)，3.23(dd，J＝8.2，9.1Hz，H-2”)，3.30(m，H-3”)，3.30(m，H-4”)，2.45(m，H-5”)，3.51(dd，J＝5.2，12.1Hz，H-6”a)，3.61(brd，J＝12.1Hz，H-6”b)，5.13(brs，H-1”')，3.92(brd，J＝7.7Hz，H-2”')，3.69(m，H-3”')，3.40(t，J＝9.2Hz，H-4”')，3.97(dq，J＝9.5，6.4Hz，H-5”')，1.28(d，J＝6.4Hz，H-6”')。确定化合物8为已报道的化合物breynin B。

结构式为

化合物9，NMR数据归属为：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.83(m，H-2a)，3.08(d，J＝15.1Hz，H-2b)，4.49(m，H-3)，3.18(m，H-4)，1.32(m，H-5a)，1.68(dt，J＝14.2，3.7Hz，H-5b)，3.92(m，H-6)，2.12(m，H-10a)，2.14(m，H-10b)，5.47(m，H-11)，2.18(m，H-12)，3.91(m，H-13a)，3.76(dd，J＝4.2，3.8Hz，H-13b)，4.77(brs，H-16)，4.06(m，H-17)，0.98(d，J＝6.9Hz，H-18)，7.99(d，J＝8.7Hz，H-21)，6.89(d，J＝8.7Hz，H-22)，6.89(d，J＝8.7Hz，H-24)，7.99(d，J＝8.7Hz，H-25)，糖基4.46(d，J＝7.7Hz，H-1')，3.58(m，H-2')，3.49(m，H-3')，3.02(t，J＝9.1Hz，H-4')，3.30(m，H-5')，1.21(d，J＝6.1Hz，H-6')，4.70(m，H-1”)，3.49(m，H-2”)，3.49(m，H-3”)，3.40(m，H-4”)，2.95(m，H-5”)，3.58(m，H-6”a)，3.67(m，H-6”b)，5.03(brs，H-1”')，5.83(m，H-2”')，3.67(m，H-3”')，3.40(m，H-4”')，4.06(m，H-5”')，1.26(d，J＝6.3Hz，H-6”')，rha-Ⅱ4.89(brs，H-1””)，3.92(m，H-2””)，3.67(m，H-3””)，3.40(m，H-4””)，3.91(m，H-5””)，1.23(d，J＝6.3Hz，H-6””)。确定化合物9为已报道的化合物breynin G。

结构式为

化合物10，NMR数据归属为：1H-NMR(600MHz，CD3OD)3.33(m，H-2a)，3.72(m，H-2b)，4.50(H-3)，3.13(m，H-4)，1.68(m，H-5a)，1.19(dt，J＝14.0，1.9Hz，H-5b)，3.91(brs，H-6)，2.14(H-10a)，2.08(m，H-10b)，5.40(m，H-11)，2.16(m，H-12)，3.67(dd，J＝11,2，4.2Hz，H-13a)，3.99(m，H-13b)，4.90(brs，H-16)，3.95(H-17)，0.90(d，J＝6.8Hz，H-18)，8.00(d，J＝8.8Hz，H-21)，6.92(d，J＝8.8Hz，H-22)，8.00(d，J＝8.8Hz，H-24)，6.92(d，J＝8.8Hz，H-25)，糖基4.51(H-1')，3.18(m，H-2')，3.46(t，J＝8.5Hz，H-3')，3.39(t，J＝9.6Hz，H-4')，3.30(m，H-5')，3.84(m，H-6'a)，3.71(m，H-6'b)，4.13(H-1”)3.17(m，H-2”)，3.52(m，H-3”)，3.29(m，H-4”)，2.45(m，H-5”)，3.57(m，H-6”a)，3.49(m，H-6”b)。确定化合物10为已报道的化合物breynin I。

结构式为

实施例2

化合物1-10的抗炎活性实验。

化合物1-10，每个化合物一个实验组，每个实验组27只SD大鼠(200-250g)，每个实验组随机分配为6组，其中：空白组A(n＝3)，灌胃生理盐水；RA模型组B(n＝5)，灌胃生理盐水；RA阳性对照组C(n＝5)，灌胃2mg/kg吲哚美辛；RA给药实验组D(n＝5)，灌胃0.02mg/kg化合物1-10中的一种；RA给药实验组E(n＝5)，灌胃0.2mg/kg化合物1-10中的一种；RA给药实验组F(n＝5)，灌胃2mg/kg化合物1-10中的一种。

实验持续时间为19天，1-19天期间，C-F组，每天灌胃相应剂量的吲哚美辛和化合物1-10中的一种，A-B组，每天灌胃同体积的生理盐水。第3天时，B-F组大鼠于右后足趾部皮下注射CFA 50μL，从第四天开始，每天用数字游标卡尺测量大鼠右后足趾厚度，用体积计测量大鼠有后足趾体积，通过足趾厚度和体积变化来评价化合物的抗炎活性。

实验结论：完全弗式佐剂诱导的大鼠类风湿性关节炎模型中，10个单体化合物都具有良好的治疗作用，与吲哚美辛阳性对照组相比，经含硫螺环缩酮倍半萜单体化合物治疗后，CFA所致的大鼠足肿胀度明显减轻，灌胃剂量0.2mg/kg/d时，抑制率达到46％以上；而灌胃剂量2mg/kg/d时，抑制率高达72％以上，足肿胀度后期几乎不可见，大鼠也未出现关节功能障碍。

实施例3

化合物1-10的降血脂活性实验。

化合物1-10，每个化合物一个实验组，每个实验组42只SPF级昆明小鼠(18-22g)，随机分为7组，每组6只。分别为：a：空白组；b：模型组；c：阳性对照组(灌胃辛伐他汀2.5mg/kg)。d：低剂量组(0.005mg/kg单体化合物1-10中的一种)、e：中剂量组(0.05mg/kg，单体化合物1-10中的一种)、f：高剂量组(0.5mg/kg，单体化合物1-10中的一种)；g：倍半萜部位(10mg/kg)组。

实验前小鼠自由进水，禁食饲养18小时。腹腔给药：阳性对照组c、单体化合物组d-f、倍半萜部组g分别腹腔注射相应剂量的药物，空白组a和模型组b同时腹腔注射相应剂量的生理盐水。1h后，除空白组外，b-g组分别腹腔注射泊洛沙姆407(500mg/kg)诱导小鼠高血脂发生。4h后眼眶取血，约100μL/只，贮存于3.2％柠檬酸钠抗凝管，再使用便携式血脂检测仪检测小鼠全血中总胆固醇(Total cholesterol，TC)、总甘油三酯(Triglyceride，TG)含量。

实验结论：泊洛沙姆407诱导的小鼠急性高血脂模型中，所有的含硫螺环缩酮倍半萜单体都表现出良好的降血脂活性，能够显著降低小鼠体内TC和TG含量，与辛伐他丁相比，当给药剂量0.5mg/kg时，小鼠全血中TC和TG抑制率分别达到67.6％和73.1％。

一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物及其应用和另一类含硫螺环缩酮倍半萜化合物的应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。