专利摘要

本发明涉及衍生环果聚糖化合物，包含衍生环果聚糖化合物的组成物，以及利用包含衍生环果聚糖化合物的组成物进行包括对映体的化学物质的色谱分离的方法。所述组成物可包含一固体载体及/或包含衍生环果聚糖化合物的聚合物。

说明书

技术领域

本发明涉及色谱领域。尤其是手性色谱。

背景技术

对映体液相色谱(LC)分离在过去的几十年里已备受关注。目前，已报导了百余种手性固定相(CSP)，并且藉由涂渍或连接手性选择剂至载体(通常是硅胶载体)而形成这些CSP。值得探讨的是仅有几种/类CSP在对映体分离领域为主流。多糖类CSP、大环抗生素CSP和π复合物CSP为主要种类的实例。并且在每类CSP中，通常有一个或两个主导实体。因此，尽管引入多种手性选择剂/CSP，但大多数分离仍仅使用少部分的手性选择剂/CSP。一般而言，为了产生实质作用，任意新的CSP必须满足一个或多个下述要求：(a)比现存CSP具有更广的适用性，(b)对特定对映体更好的分离特性(如更好的选择性、更高的效率、更有利的溶剂亲和性、更短的分离时间、低成本、使用超临界流体色谱法的能力增强等)或者(c)可填补没有其它CSP可奏效的重要的分众市场上的空缺。

环果聚糖(CF)为大环低聚糖的一个相对较小部分。环糊精可能是该类分子的最有名成员。然而，各CF在其结构及作用上均不相同。CF为由六个或多个β-(2→1)-键合的D-呋喃果糖单元组成的环菊低聚糖。每个呋喃果糖单元包含四个手性中心和三个羟基。这些化合物的常用简写命名为CF6、CF7、CF8等，其中CFn表示在环状低聚体中具有n个果糖部分(如6、7、8等)的环果聚糖。

环果聚糖由Kawamura和Uchiyama在1989年首先报导。通过环状芽孢杆菌(bacillus circulans)的至少两个不同菌株凭借菊糖的发酵产生环果聚糖。产生环菊低聚糖果糖转移酶(CF Tase)的基因已被分离，并且其序列已被确定并纳入常见酵母酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)。因此，可进行CF的便利生产。图1显示了CF的基本结构。从CF6的x-射线晶体结构可知，较小的CF如环糊精无疏水空腔。因此，在结合有机分子与环糊精时发挥重要作用的疏水包合物似乎与环果聚糖无关。

反之，CF的戊糖部分(果糖)在冠醚核单元周围形成一螺旋桨状边缘。例如，CF6的晶体结构显示六个呋喃果糖环以螺旋或螺旋桨式排列在18-冠-6核周围，相对冠醚平面朝上或朝下。六个3-位羟基交替地朝向或远离分子中心，且指向内部的三个氧原子彼此非常接近 显然在环果聚糖分子中存在大量内部氢键。结果，在大环的一侧进入18-冠-6核的入口被氢键羟基所阻挡。中央凹陷处周围的-O-C-CH₂-O-的亚甲基造成CF6的另一侧似乎更疏水。CF6的计算亲油模式还证实CF6显示出亲水及疏水表面的一清楚的“前/后”区域化。晶体结构及计算模型研究证明CF6似乎具有大量额外的内氢键。实际上三个3-OH基团完全覆盖18-冠-6环一侧以及核冠氧几乎折入分子内，使得CF₆与其它18-冠-6系手性选择剂大不相同。表1示出CF6、CF7和CF8的相关物理-化学资料。

表1 环果聚糖6-8的的物理-化学性质

^a在此范围内熔化及分解

环果聚糖已用在各种应用中，大多数作为消费品中的添加物或者作为溶液中结合金属离子的媒介。作为消费品中添加物的CF的许多应用类似于环糊精的应用。例如，CF已用作纸张涂渍、食品和饮料苦味及涩味的缓和剂、褐变防护剂、乳液聚合剂、油墨配制剂、抑制异味的试剂、药物传递系统部分、润滑剂等。此外，CF已显示出具有冷冻保护效果并且用作一些离子的络合剂。然而，据我们所知，CF或其类似物从未用作广泛使用的CSP，其用于通过色谱进行对映体的分离。不限于理论约束，未衍生(或天然)的CF可能无法用作气液色谱(GLC)CSP，原因在于上述CF的熔点高且在其它液体GLC固定相中无法溶解。出于上述结构原因，天然CF6和其它CF受限形成疏水包合物及/或冠乙醚包合物。

发明内容

本发明涉及分子式Ⅰ的化合物，包含分子式Ⅰ化合物的组成物，以及利用包含分子式Ⅰ化合物的组成物进行化学物质色谱分离的方法，其中分子式Ⅰ如下：

其中n、L和R如本发明所描述。

一方面，本发明提供一种组成物，该组成物包含一固体载体和共价连接至所述固体载体的一环果聚糖残基。另一方面，本发明提供一种组成物，该组成物包含一固体载体和分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基，其中n、L和R如本发明所描述并且其中一至五个R基团为连至固体载体的共价键。

再一方面，本发明提供一种组成物，该组成物包含一固体载体；以及至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一未衍生的环果聚糖的残基或分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基，其中n、L和R如本发明所描述并且其中零至五个R基团为连至固体载体的共价键。

附图说明

图1为环果聚糖的基本结构描述；

图2为包含本发明的固体载体和衍生环果聚糖残基的组成物的描述；

图3为一液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离正相模式(上曲线)、极性有机相模式(中曲线)和反相模式(下曲线)中的手性分析物的结果；

图4为一超临界流体色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；

图5为一亲水作用液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离水杨酸、4-氨基水杨酸以及乙酰水杨酸的结果；

图6为一液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；

图7A为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；

图7B为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；

图8为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果，其中添加剂的百分数从0.125变至0.50至2.0；

图9A为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；

图9B为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离酪氨醇盐酸盐的对映体的结果；

图10为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离1-(2-萘基)乙胺的对映体的结果；

图11为一液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；以及

图12为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离N-(3，5-二硝基苯甲酰)-苯甘氨酸的对映体的结果。

具体实施方式

定义

以下定义是为了清楚说明定义的术语，并不限制所定义的术语。如果本发明使用的特定术语未具体定义，该术语不应理解为不明确的。相反，在其接受的含义内使用术语。

本发明使用的“环果聚糖”指的是由六个或多个β-(2→1)-键合的D-呋喃果糖单元组成的环菊低聚糖。

本发明使用的“衍生环果聚糖”或“功能化环果聚糖”指的是使用其它官能团取代一个或多个羟基的环果聚糖。一般，在本发明的衍生或功能化CF6中使用其它官能团取代约2至18个羟基。一般，在本发明的衍生或功能化CF7中使用其它官能团取代约2至21个羟基。一般，在本发明的衍生或功能化CF8中使用其它官能团取代2至24个羟基。“低”衍生化指的是使用其它官能团取代大约2至7个羟基。类似地，“未衍生环果聚糖”或“天然环果聚糖”指的是不使用不同官能团取代羟基。

本发明使用的“烷基”指的是1至大约20个碳原子的脂肪烃链，优选1至大约10个碳原子，更优选1至大约6个碳原子，且更为优选1至大约4个碳原子，并且包括直链和支链，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基和异己基。“低级烷基”指的是具有1至大约4个碳原子的烷基，其中“烷基”如此处所定义。

本发明使用的“烷烯基”指的是二价烷基，其中“烷基”如此处所定义。

本发明使用的“芳烯基”指的是二价芳基，其中“芳基”如此处所定义。

本发明使用的“芳基”指的是可选择性取代的单取代、二取代、三取代或其它多环芳香环体系，所述芳香环体系具有大约5至大约50个碳原子(以及其中碳原子的范围和具体数量的所有组合与次组合)，优选具有大约6至大约10个碳。非限制性实例包括如苯基、萘基、蒽基、菲基以及3，5-二甲基苯基。芳基可使用一个或多个如此处所定义的R¹选择性取代。

本发明使用的“杂芳基”指的是可选择性取代的单取代、二取代、三取代或其它多环芳香环体系，包括杂环，所述杂环包括至少一个，优选1至大约4个硫、氧或氮杂原子环成员。杂芳基可具有如大约3至大约50个碳原子(以及其中碳原子的范围和具体数量的所有组合与次组合)，优选具有大约4至大约10个碳原子。杂芳基的非限制性实例包括如吡咯基、呋喃基、吡啶基、1，2，4-噻二唑基、嘧啶基、噻吩基、异噻唑基、咪唑基、四唑基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯硫基、苯并噻吩基、异苯并呋喃基、吡唑基、吲哚基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基以及异恶唑基。杂芳基可使用一个或多个如此处所定义的R¹选择性取代。

本发明使用的“杂环”指的是稳定的5至7元单环或双环或7至10元双环杂环，所述杂环为饱和的、部分饱和或不饱和的(芳烃)，并且所述杂环包含碳原子以及1至4个杂原子，所述杂原子独立地选自由N、O和S组成的组群，并且杂环包括任何双环组群，其中任意上述所定义的杂环与苯环稠合。氮和硫原子可被选择性氧化。该杂环可在任何杂原子或碳原子处连接其侧基，从而产生稳定的结构。如果产生的化合物稳定，此处所描述的杂环可于碳或氮原子上取代。如果特别指出，杂环中的氮原子可被选择性四级化。优选的是当杂环中S和O原子的总数超过一个时，这些杂原子彼此不相邻。优选的是杂环中S和O原子的总数不超过一个。杂环的实例包括，但不限于，1H-吲唑基、2-吡咯烷酮基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、2H-吡咯基、3H-吲哚基、4-呱啶基、4aH-咔唑基、4H-喹嗪基、6H-1，2，5-噻二嗪基、吖啶基、吖辛基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并苯硫基、苯并恶唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑基、咔唑基、4H-咔唑基、α-、β-、γ-咔啉基、苯并二氢吡喃基、苯并呱喃基、噌嗪基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二羟呋喃[2，3-b]四羟呋喃基、呋喃基、呋呫基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、恶二唑、1，2，3-恶二唑、1，2，4-恶二唑、1，2，5-恶二唑、1，3，4-恶二唑、恶唑烷基、恶唑基、恶唑烷嘧啶基、啡啶基、啡啰啉基、啡恶嗪基、啡嗪基、啡噻嗪基、啡恶噻基、呔嗪基、呱嗪基、呱啶基、呱啶酮基、4-呱啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、氮苯基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、咔啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并恶唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，3，4-三唑基、呫吨基。优选的杂环包括，但不限于，吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吲哚基、苯并咪唑基、1H-吲唑基、恶唑烷基、苯并三唑基、苯并异唑基、羟吲哚基、苯并恶唑啉基或靛红酰基。还包括稠合环和含螺环化合物，例如上述杂环。

本发明使用的“环烷基”指的是可选择性取代的、其结构中具有一个或多个环的烷基，该结构具有3至大约20个碳原子(以及其中碳原子的范围和具体数量的所有组合与次组合)，优选具有3至大约10个碳原子。多环结构可为桥连或稠合环结构。组群包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环辛基、2-[4-异丙基-1-甲基-7-氧杂-二环[2.2.1]庚基]、2-[1，2，3，4-四氢-萘基]以及金刚烷基。环烷基可使用一个或多个如此处所定义的R¹选择性取代。

本发明使用的“卤代”或“卤素”指的是氯代、溴代、氟代和碘代或氯、溴、氟和碘。

本发明使用的“糖类残基”指的是单糖、二糖、低聚糖或多糖，或指包含单糖、二糖、低聚糖或多糖的化合物，其中可使用不同官能团选择性取代糖类残基的一个或多个羟基。

化合物

本发明的实施例包含衍生环果聚糖，组成物及其使用方法。本发明可以各种方式具体化。

本发明的部分实施例包含分子式Ⅰ的化合物：

其中：

n为1-3；

每个L独立地为，

O，

CR₂，

NR²，

O-C(＝O)，

O-C(＝O)-NR²，

NC(＝O)-NR²，或

每个R独立地为，

H，

使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₃-C₂₀)环烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，

使用1-3R¹选择性取代的杂芳基，

(C₁-C₂₀)烷氧基(C₁-C₂₀)烷基，

H²C＝CH-(当L为O-C(＝O)时)，

H²C＝C(CH₃)-(当L为O-C(＝O)时)，

烯烃基-N＝C＝O；

亚芳基-N＝C＝O；

-SO₂R⁵(当L为O时)，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基1(C₁-C₂₀)烷基，或者

缺少羟基的糖类残基(当L为O时)

R¹独立地为使用1-3R⁶选择性取代的(C₁-C₁₀)烷基、卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；

R²独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R³独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁴独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁵独立地为使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，或者使用1-3R¹选择性取代的杂芳基；

R⁶独立地为卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；以及

假设所有所述的R基团不同时为H或甲基。

在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为O。在这种情况下，O为二价并通过单键连接CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为CR₂。在这种情况下，CR₂为二价并经由L基团的C原子和CF中的C原子之间的C-C单键连接至CF。该L基团经由L基团的C原子和R基团中的一原子之间的C-R单键连接至R基团。在一些实施例中，一个或多个L基团为NR²。在这种情况下，NR²为二价并经由L基团的N原子和CF中的C原子之间的N-C单键连接至CF。该L基团经由L基团的N原子和R基团中的一原子之间的N-R单键连接至R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)。在这种情况下，O-C(＝O)为二价并经由L基团的第一O原子和CF中的C原子之间的C-O单键连接至CF。所述L基团的第一O原子接着通过C-O单键连接至L基团的羰基碳。该L基团经由L基团的羰基碳和R基团中的一原子之间的C-R单键连接至R基团。在本发明的另一其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)-NR²。在这种情况下，O-C(＝O)-NR²为二价并经由L基团的第一O原子和CF中的C原子之间的C-O单键连接至CF。所述L基团的第一O原子接着通过C-O单键连接至L基团的羰基碳。该L基团的羰基碳接着经由C-N单键连接至L基团的N。该L基团经由L基团的N原子和R基团中的一原子之间的N-R单键连接至R基团。在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为NC(＝O)-NR²。在这种情况下，NC(＝O)-NR²为二价并经由L基团的第一N原子和CF中的C原子之间的C-N双键连接至CF。所述L基团的第一N原子接着通过C-N单键连接至L基团的羰基碳。该L基团的羰基碳接着经由C-N单键连接至L基团的第二N。该L基团经由L基团的第二N原子和R基团中的一原子之间的N-R单键连接至R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为叠氮化物和炔烃之间1，3-偶极环加成反应的环加成产物(链接化学)。在这种情况下，环加成产物为二价并能以两种方式连接至CF和R基团。第一，该CF可经由CF中的C原子和如上述具有两个单键(一个N-N单键以及一个C-N单键)的环加成产物中的N原子之间的C-N单键连接至L基团。然后在相对于连接至CF的环加成产物的N原子的β位，该L基团通过R基团的一原子和环加成产物中的C原子之间的C-R单键连接至R基团。该连接可在叠氮化物功能化CF和含炔烃的R基团之间产生推定反应。该L基团的第二种可能连接是反向的，而在炔烃功能化CF和含叠氮化物的R基团之间产生所推定的反应。

在本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中的L基团和部分R基团可共同包含用于连接环果聚糖骨架至另一部分的所有或部分官能团。在本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中的L基团和部分R基团可在CF和另一部分之间共同形成所有或部分氨基甲酸酯、酯、乙醚、烯烃、仲或叔胺、1，3-偶极环加成产物(链接化学)键合。在本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中无-LR基团为-OH或-O-甲基。在本发明的其它实施例中，分子式Ⅰ中无-LR基团为-OH或-O-甲基，但不是所有的-LR基团都相同。在本发明的另外实施例中，分子式Ⅰ中无-LR基团为-OH或-O-甲基，并且所有的-LR基团相同。在本发明的再一其它实施例中，分子式Ⅰ中至少一个但不是所有-LR基团为-OH或-O-甲基。

在一些实施例中，通过与本发明目的不相符的任何方式合成分子式Ⅰ中的化合物。在本发明的一些实施例中，如本发明所描述利用一反应简图以及一个或多个能够形成氨基甲酸酯、酯、乙醚、烯烃、仲或叔胺、1 3-偶极环加成产物(链接化学)连接的试剂，从天然CF_n合成分子式Ⅰ中的化合物。

组成物

本发明的一些实施例包括含有衍生的或未衍生的环果聚糖的组成物。

在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和与所述固体载体结合的环果聚糖残基。所述环果聚糖残基可通过与本发明目的不相符的任何方式与所述固体载体相结合。在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和共价连接至所述固体载体的一环果聚糖残基。在包含固体载体的本发明其它实施例中，环果聚糖可直接吸附至一固体载体。参见图2，在一些实施例中，环果聚糖(组成部分10)可通过连接子(组成部分20)直接共价连接至一固体载体(组成部分30)。在另一些实施例中，环果聚糖可被吸附或共价连接至一聚合物或低聚物，而该聚合物或低聚物能被吸附、涂渍或连接至一固体载体。在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和共价连接至所述固体载体的一环果聚糖残基，其中所述环果聚糖残基未经硫酸盐功能化。

在本发明的实施例中，包括含有一固体载体和与所述固体载体结合的一环果聚糖残基的组成物，该环果聚糖残基可包含与本发明目的不相符的任何环果聚糖残基。在本发明的一些实施例中，该环果聚糖为天然环果聚糖。在其它实施例中，该环果聚糖为衍生环果聚糖。在本发明的另一些实施例中，一组成物包含一固体载体和分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基。

其中：

n为1-3；

每个L独立地为，

O，

CR₂，

NR²，

O-C(＝O)，

O-C(＝O)-NR²，

NC(＝O)-NR²，或

每个R独立地为，

H，

使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₃-C₂₀)环烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，

使用1-3R¹选择性取代的杂芳基，

(C₁-C₂₀)烷氧基(C₁-C₂₀)烷基，

H²C＝CH-(当L为O-C(＝O))，

H²C＝C(CH₃)-(当L为O-C(＝O))，

烯烃基-N＝C＝O；

亚芳基-N＝C＝O；

-SO₂R⁵(当L为O)，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基(C₁-C₂₀)烷基，或者

缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，或者

包含至所述固体载体的一共价键；

R¹独立地为使用1-3R⁶选择性取代的(C₁-C₁₀)烷基、卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；

R²独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R³独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁴独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁵独立地为使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，或者使用1-3R¹选择性取代的杂芳基；

R⁶独立地为卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；

其中一至五个R基团包含连至固体载体的共价键。

在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中一个或多个L基团为O。在这种情况下，O为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为CR₂。在这种情况下，CR₂为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在一些实施例中，一个或多个L基团为NR²。在这种情况下，NR²为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)。在这种情况下，O-C(＝O)为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的另一其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)-NR²。在这种情况下，O-C(＝O)-NR²为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为NC(＝O)-NR²。在这种情况下，NC(＝O)-NR²为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为叠氮化物和炔烃之间1，3-偶极环加成反应的环加成产物(链接化学)。在这种情况下，环加成产物为二价并可连接至此处描述的CF和R基团。

在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，n为1。在其它实施例中，n为2。在另一些实施例中，n为3。

在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，至少一个L为O。在其它实施例中，至少一个L为O-C(＝O)。在另一些实施例中，至少一个L为O-C(＝O)-NR²。在一些实施例中，至少一个L为NC(＝O)-NR²。

在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，每个R独立地为H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环己基、苯基、甲苯基、三氯苯基、氯苯基、溴苯基、碘苯基、羟乙基、羟丙基、二氯苯基、苄基、氯甲苯基、萘乙基、硝基苯基、二硝基苯基、三硝基苯基、三氟甲基、二硝基、3，5-二甲基苯基或金刚烷基。在其它实施例中，每个R独立地为异丙基、叔丁基、二甲苯基、二氯苯基、3，5-二甲基苯基或萘乙基。

在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，每个R¹独立地为羟丙基、羟乙基、甲基、三氯甲基、三氟甲基、氯代、溴代或碘代。

在本发明的实施例中，包括含有一固体载体和与所述固体载体结合的一环果聚糖残基的组成物，该固体载体可为与本发明目的不相符的任何固体载体。在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基，其中所述固体载体为硅胶固体载体。

在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基：

其中：

每个n独立地为1-3；

每个L独立地为，

O，

CR₂，

NR²，

O-C(＝O)，

O-C(＝O)-NR²，

NC(＝O)-NR²，或

每个R独立地为，

Y，

Z，

H，

使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₃-C₂₀)环烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，

使用1-3R¹选择性取代的杂芳基，

(C₁-C₂₀)烷氧基(C₁-C₂₀)烷基，

H²C＝CH-(当L为O-C(＝O))，

H²C＝C(CH₃)-(当L为O-C(＝O))，

烯烃基-N＝C＝O；

亚芳基-N＝C＝O；

-SO₂R⁵(当L为O)，

芳基(C₁-C₂₀)使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)烷基，或者

缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，

R¹独立地为使用1-3R⁶选择性取代的(C₁-C₁₀)烷基、卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；

R²独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R³独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁴独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁵独立地为使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，或者使用1-3R¹选择性取代的杂芳基；

R⁶独立地为卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；以及

Y包含一连至不同单体残基的共价键；以及

Z包含一连至所述固体载体的共价键；以及

其中零至五个R基团包含连至固体载体的共价键。

在本发明的实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述固体载体可为如此处所述的与本发明目的不相符的任何固体载体。

在本发明的实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述至少一衍生环果聚糖的残基可为与本发明目的不相符的任何衍生环果聚糖的残基，如此处所述。

在本发明的实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述聚合物可为与本发明目的不相符的任何聚合物。在本发明的一些实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述聚合物在所述固体载体上形成一涂层。在本发明的其它实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述聚合物共价连接至所述固体载体。在本发明的另一些实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基在所述聚合物上形成一侧基。在本发明的一些实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基形成一所述聚合物骨架部分。

一般，本发明的含环果聚糖的聚合物可分为两类：(1)具有CF单元作为骨架的聚合物以及(2)具有CF作为侧基的聚合物。利用与本发明目的不相符的任何方式藉由聚合CF，可形成包含具有CF单元作为骨架的聚合物的本发明实施例。在一些实施例中，在碱性条件下，于干燥的N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)或表氯醇中利用六亚甲基二异氰酸酯来聚合CF，从而提供具有CF单元作为骨架的聚合物。以该方式制备的含CF的聚合物能被涂渍在一固体载体上或共价连接至如此处所述的固体载体(如经由氨基甲酸盐连接)。藉由制备丙烯酸功能化CF(如甲基丙烯酸-CF)用作含CF的单体并接着共聚合这些单体及其它单体(如丙烯酰胺、丙烯酸、N-乙烯吡咯烷酮)，以提供具有CF单元作为骨架的聚合物，即可形成包含具有CF单元作为骨架的聚合物的本发明实施例。以该方式制备的含CF聚合物可被涂渍或连接至一此处描述的固体载体，也可藉由将一含CF单体锚定于一固体载体并接着在该固体载体表面上与其它单体共聚合，来形成含具有CF单元作为骨架的聚合物的本发明实施例。

藉由制备一以适当的官能团(如p-甲苯磺酰基)衍生的CF并接着使适当衍生的CF与聚合物(如聚(丙烯胺)、聚(乙烯亚胺)、聚(乙烯胺)或聚(乙烯基咪唑))反应，以提供具有CF单元作为侧基的聚合物，即可形成含具有CF单元作为侧基的聚合物的本发明实施例。以该方式制备的含CF的聚合物可被涂渍或连接至此处描述的固体载体上。也可藉由首先涂渍一适当的聚合物至一此处描述的固体载体上，并接着使适当衍生化的CF与此处描述的经聚合物涂渍或经聚合物连接的固体载体反应，来形成含具有CF单元作为侧基的聚合物的本发明实施例。

方法

本发明的一些实施例包含色谱分离的方法，包括手性色谱分离。

在本发明的一些实施例中，色谱分离的方法包含提供一组成物作为第一固定相来分离混合物中的化学物质，其中该组成物包含一固体载体和一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基：

其中：

n为1-3；

每个L独立地为，

O，

CR₂，

NR²，

O-C(＝O)，

O-C(＝O)-NR²，

NC(＝O)-NR²，或者

每个R独立地为，

H，

使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₃-C₂₀)环烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，

使用1-3R¹选择性取代的杂芳基，

(C₁-C₂₀)烷氧基(C₁-C₂₀)烷基，

H²C＝CH-(当L为O-C(＝O))，

H²C＝C(CH₃)-(当L为O-C(＝O))，

烯烃基-N＝C＝O；

亚芳基-N＝C＝O；

-SO₂R⁵(当L为O)，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基(C₁-C₂₀)烷基，或者

缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，或者

包含至所述固体载体的一共价键；

R¹独立地为使用1-3R⁶选择性取代的(C₁-C₁₀)烷基、卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；

R²独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R³独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁴独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁵独立地为使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，或者使用1-3R¹选择性取代的杂芳基；

R⁶独立地为卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；以及

其中一个至五个R基团包含连至固体载体的共价键。

在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中一个或多个L基团为O。在这种情况下，O为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为CR₂。在这种情况下，CR₂为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在一些实施例中，一个或多个L基团为NR²。在这种情况下，NR²为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)。在这种情况下，O-C(＝O)为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的另一其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)-NR²。在这种情况下，O-C(＝O)-NR²为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为NC(＝O)-NR²。在这种情况下，NC(＝O)-NR²为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为叠氮化物和炔烃之间1，3-偶极环加成反应的环加成产物(链接化学)。在这种情况下，环加成产物为二价并可连接至此处描述的CF和R基团。

在本发明的一些实施例中，色谱分离的方法包含提供一组成物作为第一固定相来分离混合物中的化学物质，其中该组成物包含一固体载体和至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基：

其中：

每个n独立地为1-3；

每个L独立地为，

O，

CR₂，

NR²，

O-C(＝O)，

O-C(＝O)-NR²，

NC(＝O)-NR²，或

每个R独立地为，

Y，

Z，

H，

使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₃-C₂₀)环烷基，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，

使用1-3R¹选择性取代的杂芳基，

(C₁-C₂₀)烷氧基(C₁-C₂₀)烷基，

H²C＝CH-(当L为O-C(＝O))，

H²C＝C(CH₃)-(当L为O-C(＝O))，

烯烃基-N＝C＝O；

亚芳基-N＝C＝O；

-SO₂R⁵(当L为O)，

使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基(C₁-C₂₀)烷基，或者

缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，

R¹独立地为使用1-3R⁶选择性取代的(C₁-C₁₀)烷基、卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；

R²独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R³独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁴独立地为H或者(C₁-C₁₀)烷基；

R⁵独立地为使用1-3R¹选择性取代的(C₁-C₂₀)烷基，使用1-3R¹选择性取代的(C₅-C₅₀)芳基，或者使用1-3R¹选择性取代的杂芳基；

R⁶独立地为卤代、羟基、-NR³R⁴、-COOR²、-COR²、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR²)₃；以及

Y包含一连至不同单体残基的共价键；以及

Z包含一连至所述固体载体的共价键；以及

其中零至五个R基团包含至固体载体的共价键。

在包含色谱分离方法的本发明实施例中，通过与本发明目的不相符的任何方法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明某些实施例中，通过高压液相色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明其它实施例中，通过气液色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明另一些实施例中，通过毛细管色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，通过填充管柱气相色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明其它实施例中，通过超临界流体色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明另一些实施例中，通过毛细管电色谱法执行所述色谱分离。

在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，该方法进一步包含提供一流动相，该流动相包含至少一有机溶剂或超临界流体。在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，进一步包含提供一流动相，该流动相包含至少一有机溶剂或超临界流体，所述有机溶剂为极性有机溶剂。

在包含色谱分离方法的本发明优选实施例中，所述色谱分离为手性分离，用以分离外消旋混合物或立体异构体的其它混合物。

在包含色谱分离方法的本发明实施例中，包含提供一含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物作为第一固定相，可使用与本发明目的不相符的任何衍生环果聚糖残基。在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，包含提供一含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物作为第一固定相，分子式Ⅰ中所述L的至少其中之一为O-C(＝O)-NR²，分子式Ⅰ中所述R的至少其中之一为异丙基，并且所述R的至少其中之一为连至所述固体载体的共价键。在包含色谱分离方法的本发明其它实施例中，包含提供，作为第一固定相，含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物，分子式Ⅰ中所述L的至少其中之一为O-C(＝O)-NR²，分子式Ⅰ中所述R的至少其中之一为萘乙基，并且所述R的至少其中之一为至所述固体载体的共价键。在包含色谱分离方法的本发明另一些实施例中，包含提供，作为第一固定相，含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物，分子式Ⅰ中所述L的至少其中之一为O-C(＝O)-NR²，分子式Ⅰ中所述R的至少其中之一为3，5-二甲苯基，并且所述R的至少其中之一为连至所述固体载体的共价键。

包含本发明衍生或未衍生环果聚糖的固定相可由各种方式制备。在本发明的一些实施例中，如此处描述，藉由化学连接一天然环果聚糖至氧化硅，然后选择性地使此处描述的天然环果聚糖衍生化来制备手性固定相。在本发明的其它实施例中，藉由首先使此处描述的环果聚糖部分衍生化，接着连接所述部分衍生的环果聚糖至此处描述的氧化硅来制备手性固定相。在本发明的一些实施例中，在部分衍生的环果聚糖连接至一固体载体之后，进一步予以衍生以达成完全衍生化。在本发明的其它实施例中，在部分衍生的环果聚糖被连接至一固体载体之后，使用不同部分功能化，从而提供一非均相衍生环果聚糖。

含色谱分离方法的本发明实施例包含提供一含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物作为第一固定相，其对于一系列广泛的分析物的分离是有用的，该分析物包括酸、碱、氨基酸衍生物、伯胺、仲胺、叔胺及其它。本发明的一些实施例对于广泛的伯胺分离来说尤其有用。此外，本发明的CF6-系CSP相对于普通有机溶剂显示出良好的稳定性，在超过1000次注射之后观察的管柱性能中无不利的变化。此外，本发明的CF6-系CSP可同时用作分析级和制备级色谱的固定相。

不拘于理论，兹认为可根据本发明主旨将环果聚糖功能化，从而提供两种不同类型的手性选择剂，两种手性选择剂是经由两种不同的机理来分离对映体及其它化学物质。例如，确信的是在本发明的一些实施例中，使用较小脂肪族部分而最低程度功能化的CF6具有一弛豫结构，该结构显示其冠醚核以及额外的羟基。不拘于理论，兹认为该结构可达有机溶剂中手性伯胺的相互作用及分离，这在以前是不可能的。在本发明的其它实施例中，使用芳香族部分而高度衍生化的CF6具有一立体拥塞结构，该结构阻碍进入其分子核但提供围绕其周边的足够其它反应位置。不拘于理论，兹认为在一些实施例中，这些位置为广泛的化合物提供手性识别。

此外，本发明的一些实施例包含毛细管电泳的方法，该方法包含提供含分子式Ⅰ的组成物的电解液，用以分离混合物中的化学物质。

实例

本发明的一些示例性实施例将在以下具体、非限制实例中说明。应注意的是一些以下实例涉及具体CF原料或试剂，如CF6。然而，在这些情况中，在不改变或违反本发明的主旨下，CF7或CF8可代替CF6。实例中使用的缩写如下：

AA＝乙酸

ACN＝乙腈

CF＝环果聚糖

DMF＝二甲基甲酰胺

DMSO＝二甲亚砜

EDTA＝乙二胺四乙酸

ESI-MS＝电喷雾电离-质谱

IP＝异丙基

IP-CFn＝异丙基-氨基甲酸盐功能化CFn

MW＝分子量

RN＝(R)-萘乙基

RN-CFn＝(R)-萘乙基-氨基甲酸盐功能化CFn

TEA＝三乙胺

TFA＝三氟乙酸

THF＝四氢呋喃

实例1

衍生环果聚糖残基4，6-二-O-戊基-3-三氟乙酰基CF6的合成

在冰浴中冷却CF6(1.00g)和无水DMSO(～15mL)的混合物。将精细研磨的NaOH(2.03g)和1-溴戊烷(6.05g)添加至上述混合物中，并且反应48小时。之后，将二氯甲烷(～60mL)和水(～60mL)添加至上述混合物中。产生的有机相被收集两次并用水冲洗数次。藉由旋转蒸发移除二氯甲烷之后接着在真空烘箱干燥一夜，得到淡黄色的粘性液体。ESI-MS证实CF已被戊基化，具有11-12的平均取代度。为了产生三氟乙酰基衍生物，在二氯甲烷中使用过量三氟乙酸酐处理4，6-二-O-戊基CF产物。终产物为液体。

实例2

衍生环果聚糖残基3，4，6-二-O-甲基CF6的合成

藉由在室温下搅拌无水DMSO(～5mL)和NaH(0.864g)30分钟来制备二甲基亚磺酰基负碳离子溶液。接着，将CF6(0.600g)添加至该混合物中，并在室温下持续搅拌4小时。之后，在冰浴中冷却上述反应混合物，并且添加碘甲烷(8.1mL)。然后，室温搅拌该混合物一夜。接着添加二氯甲烷(～50mL)来抑制反应。使用水冲洗收集的有机相。藉由旋转蒸发移除二氯甲烷之后接着在真空烘箱干燥一夜，得到略微灰白色的固体。ESI-MS用于证实该产物：(m/z)1247(M+Na)⁺。

实例3

衍生环果聚糖残基丙基硫酸盐CF6(CF6-CH₂CH₂CH₂SO₃^-)的合成

在CF6(1当量)溶于无水DMF的溶液中添加过量的NaH(10当量)。室温下搅拌该产生的混合物12小时。然后，添加1，3-丙磺酸内酯(10当量)，接着室温搅拌12小时。然后通过甲醇的添加移除过量的NaH，得到衍生环果聚糖残基丙基硫酸盐CF6(CF6-CH₂CH₂CH₂SO₃^-)。

实例4

具有氨基甲酸酯连接子的衍生环果聚糖残基的合成

该实例显示在本发明的一些实施例中，一环果聚糖可衍生有一氨基甲酸酯连接子。

在100mL三口烧瓶中，将1g CF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，添加30ml无水吡啶以溶解CF6。在干燥氮气环境下，对该CF6溶液逐滴滴加0.6mL 4-甲基苯基异氰酸酯/10mL吡啶。接着，将该混合物回流4小时。当该溶液冷却至室温时，根据本发明描述的步骤，其立即可连接至二氧化硅。

实例5

具有酯连接的衍生环果聚糖残基的合成

该实例显示在本发明的一些实施例中，一环果聚糖可衍生有一酯连接子。

在100mL三口烧瓶中，将1g CF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，添加30ml无水吡啶以溶解CF6。在干燥氮气环境下，对该CF6溶液逐滴滴加0.6mL对甲基苯甲酰氯/10mL吡啶。接着，将该混合物回流4小时。当该溶液冷却至室温时，根据本发明描述的步骤，其立即可连接至二氧化硅。

实例6

具有醚连接子的衍生环果聚糖残基的合成

该实例显示在本发明的一些实施例中，一环果聚糖可衍生有一醚连接子。

在100mL烧瓶中，将1g CF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，藉由在氩气环境下搅拌，添加30mL无水DMF来溶解CF6。接着，将0.2g NaH添加至该溶液中，再将温度缓慢升至70℃并保持30min。在氩保护下，添加1g 1-氯-2，4-二硝基苯，并且将该混合物100℃加热5小时。通过过滤移除产生的盐，并通过旋转蒸发移除DMF。使用3×100mL二乙醚冲洗该产物，并过滤及干燥该棕色固体产物。根据本发明描述的步骤，衍生的CF6随后可立即连接至二氧化硅。

除了实例1-6，亦制备许多其它衍生环果聚糖残基。表2列出了本发明衍生环果聚糖残基的一些实例。

表2 本发明的一些衍生环果聚糖残基

实例7

通过醚键的氧化硅键合环果聚糖残基的制备

用于化学键合非衍生(天然)环果聚糖的步骤与用于键合各种衍生环果聚糖的步骤基本相同。仅为了说明目的，以氧化硅键合非衍生环果聚糖残基的制备作为一实例。然而，熟悉本领域的人员应理解类似的步骤可达氧化硅键合衍生环果聚糖残基的制备。

在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径， 孔径)置于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。将产生的混合物冷却至小于40℃，并添加1.3mL 3-环氧丙氧丙基三甲氧基氧化硅烷。将该混合物100℃加热5小时。接着冷却并过滤该混合物。使用20mL甲苯、乙腈、甲醇、丙酮冲洗该固体产物。将产生的环氧功能化的氧化硅置于真空烘箱内干燥一夜。

分别将1g CF6置于110℃下干燥5小时，并且接着在100mL圆底烧瓶中将CF6搅拌溶于30mL无水DMF。然后，在干燥氩气氛下，添加0.2g NaH至该溶液中并搅拌10min。通过真空过滤移除未反应的NaH。接着，添加3.3g干燥环氧功能化的氧化硅至100mL圆底烧瓶内的该滤液中。然后将该混合物140℃加热3小时。冷却并过滤该混合物。使用20mL DMF、乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物。接着将产生的氧化硅键合CF残基置于真空烘箱内干燥一夜，得到3.5g产物。

实例8

利用二异氰酸酯通过氨基甲酸酯键的氧化硅键合环果聚糖残基的制备

以至少两种方式将环果聚糖通过氨基甲酸酯键键合至硅胶。该实例描述了一种方法，同时实例9描述了另一种方法。此外，应注意的是该实例使用1，6-二异氰氧基己烷。但是也可使用在两个异氰酸酯之间具有不同距离的其它二异氰酸酯，如4，4’-二苯基甲烷二异氰酸酯和1，4-苯二异氰酸酯。此外，用于化学键合非衍生(或“天然”)环果聚糖的步骤与用于键合各种衍生环果聚糖的步骤实质上相同。仅为了说明目的，以氧化硅键合非衍生环果聚糖残基的制备作为一实例。然而，熟悉本领域的人员应理解类似的步骤可达氧化硅键合衍生环果聚糖残基的制备。

在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径， 孔径)置于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。将产生的混合物冷却至小于40℃，并逐滴滴加1mL 3-氨丙基三甲氧基氧化硅烷。将该混合物回流4小时。接着冷却并过滤该混合物。使用乙腈、甲醇、丙酮冲洗该固体产物。然后将该固体产物真空干燥一夜，得到3.3g氨基功能化氧化硅。

在250mL烧瓶中，添加180mL无水甲苯至干燥的3.3g氨基功能化氧化硅，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。将该混合物冷却至室温，并添加2mL 1，6-二异氰氧基己烷至干燥的氨基氧化硅甲苯匀浆，其保持在冰浴中。接着将该混合物70℃加热4小时。然后冷却并真空过滤该混合物。使用20mL无水甲苯冲洗该固体产物两次。然后，添加1g溶于20mL吡啶的干燥CF6，将该混合物70℃加热15小时。接着冷却并过滤该混合物。使用吡啶、乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物并将固体产物真空干燥一夜，得到3.7g产物。

实例9

利用异氰酸氧化硅烷通过氨基甲酸酯键的氧化硅键合环果聚糖残基的制备

以至少两种方式将环果聚糖通过氨基甲酸酯键键合至硅胶。该实例描述了一种方法，同时实例8描述了另一种方法。此外，用于化学键合非衍生(或“天然”)环果聚糖的步骤与用于键合各种衍生环果聚糖的步骤基本相同。仅为了说明目的，以氧化硅键合非衍生环果聚糖残基的制备作为一实例。然而，熟悉本领域的人员应理解类似的步骤可达氧化硅键合衍生环果聚糖残基的制备。

在100mL三口圆底烧瓶中，将1g CF6置于110℃下干燥5小时。然后搅拌添加40mL无水吡啶。接着，在干燥氩气氛下将0.7mL3-(三乙氧氧化硅基)丙基异氰酸酯逐滴滴加至该溶液中。接着将该混合物90℃加热5小时。在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径， 孔径)置于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。在两混合物均冷却至室温之后，将环果聚糖混合物添加至氧化硅-甲苯匀浆并于105℃加热一夜。接着冷却并过滤最终混合物。使用乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物。在真空烘箱干燥一夜之后，得到3.4g产物。

实例10

通过醛基官能团与羟基官能团反应的氧化硅键合环果聚糖残基的制备

根据实例6中描述的步骤，氧化硅功能化有环氧基团。在3.5g环氧功能化氧化硅中，添加100mL 0.01M HCl水溶液。将产生的混合物90℃加热3小时。然后冷却并过滤该混合物。使用水、甲醇和丙酮冲洗该固体产物并于真空烘箱内干燥一夜，得到3.5g二醇功能化氧化硅。将100mL 60mM溶于水/甲醇(4∶1)的高碘酸钠添加至该二醇功能化氧化硅中并室温搅拌12小时。过滤、冲洗并干燥产生的醛功能化氧化硅。然后，混合1g CF6，3.5g醛功能化氧化硅以及100mL通入HCl的甲苯并且回流一夜。接着冷却并过滤该混合物。冲洗并干燥该固体产物。然后，将50mL 20mM溶于磷酸缓冲液(pH＝3)的氰基硼氢化钠(NaCHBH₃)添加至该固体产物并室温搅拌5小时，从而减少剩余醛基。然后过滤并使用水、甲醇、乙腈和丙酮冲洗该固体产物。

实例11

通过1，3-偶极环加成反应(链接化学)的氧化硅键合环果聚糖残基的制备

该实例显示叠氮化物和炔烃的1，3-偶极环加成反应可用于连接非衍生和衍生环果聚糖至硅胶。在本发明的一些实施例中，在链接反应之前，该硅胶可修饰有叠氮化物官能团，同时环果聚糖衍生有炔烃。在其它实施例中，硅胶可修饰有炔烃，同时环果聚糖衍生有叠氮化物官能团。在该实例中，仅为说明目的，炔烃功能化硅胶与叠氮化物修饰的环果聚糖反应以提供共价键合的环果聚糖固定相。

使2g CF6和2g NaOH悬浮于200mL水中。将4.2g对甲苯磺酰氯/10mL乙腈逐滴滴至CF6溶液中。室温磁力搅拌反应2小时，过滤移除沉淀，并将该滤液保存于冰箱一夜。过滤并真空干燥回收所得沉淀，得到2.5g产物(单-6-脱氧-6-(对甲苯磺酰基)-CF6)。然后将产物(2g)置于6mL干燥N，N’-二甲基甲酰胺中并加热至65℃。接着，添加0.15g碘化钾和1.0g叠氮化钠，并将该反应混合物65℃搅拌24小时。然后，将该混合物冷却至室温并使用安伯来特(Amberlite)MB-3树脂处理移除盐。添加丙酮产生一白色沉淀

作为分离剂的环果聚糖的组成物及方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。