专利摘要

本发明提供了一种治疗变应性鼻炎的药物组合物，它是由下述重量配比的中药原料药制备而成的制剂：徐长卿14-26份、蝉蜕3.15-5.85份、冰片0.021-0.039份、牛黄0.21-0.39份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。该药物组合物，具有疏风清热、开窍醒鼻的功效，临床疗效显著。药效试验表明，本发明药物滴剂通过降低AR豚鼠血LTE₄、IgE浓度，抑制炎性介质的释放，减少炎症细胞在鼻粘膜的聚集，从而减轻鼻道的变态反应。

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗变应性鼻炎的药物组合物。属于药物领域。

背景技术

变应性鼻炎(Allergic rhinitis，AR)，又称过敏性鼻炎，是由免疫球蛋白E(IgE)介导通过释放组胺、激肽类和白三烯等诱发的鼻粘膜I型变态反应。主要症状有鼻痒、喷嚏、流涕、鼻塞等。近年来，全球10％～25％的人受到变应性鼻炎的困扰，且发病率曾逐年增高趋势。AR虽不是严重疾病，但可影响患者的睡眠、学习、工作等日常生活，并可诱发支气管哮喘、鼻窦炎、鼻息肉、中耳炎和变应性结膜炎等。因此，寻求有效的治疗方法和药物是全球共同关注的课题。

目前AR西药治疗的药物主要有抗组胺药、糖皮质类固醇激素、减充血剂、抗胆碱药和肥大细胞稳定剂5类，但由于这些药物久用易产生不良反应、远期疗效差，均不能达到理想的要求。而中医的整体观念、辨证施治以及中药药源广、毒副作用小，是中医中药治疗本病的优势所在。因此，应用中医药理论治疗AR已成为研究热点。如：申请号：200510030089.7，发明名称：一种治疗变应性鼻炎的中药外用制剂及其制备方法，该发明公开了一种治疗变应性鼻炎的中药外用制剂。该制剂由当归、茜草、鹅不食草组成，本制剂经动物实验证实对TDI、卵蛋白致敏大鼠鼻炎模型从行为学、血及鼻粘膜的组胺含量、鼻分泌物的嗜酸细胞计数、组织病理学等方面进行观察，均有改善作用。经安全性实验发现，该发明制剂对家兔完整皮肤黏膜以及破损黏膜均无刺激作用；急性毒性实验结果显示，受试大鼠在人用剂量86倍下滴鼻未见毒性反应。制剂是以祛瘀入手，温润养血、宣通鼻窍为治则，扶正祛邪并用，具有良好的开发应用前景。

目前中药治疗AR多以口服制剂为主，对鼻腔局部用药的报道较为少见。鼻腔具有丰富的黏膜，黏膜上有系列绒毛和上皮细胞，绒毛使鼻黏膜吸收面积增加，黏膜下大量的毛细血管网，使药物可以很快被吸收。鼻腔给药起效较口服用药迅速，且能够避免全身应用产生的不良反应，无首过效应，药物可达到高效、安全、方便的治疗效果。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种治疗变应性鼻炎的药物组合物。本发明的另一技术方案是提供了该药物组合物的制备方法和用途。

本发明提供了一种治疗变应性鼻炎的药物组合物，它是由下述重量配比的中药原料药制备而成的制剂：

徐长卿14-26份、蝉蜕3.15-5.85份、冰片0.021-0.039份、牛黄0.21-0.39份。

进一步优选地，它是由下述重量配比的中药原料药制备而成的制剂：

徐长卿20份、蝉蜕4.5份、冰片0.03份、牛黄0.3份。

本发明药物是由徐长卿、蝉蜕的水或有机溶剂提取物为活性成分，加入冰片、牛黄，及药学上可接受的辅料或辅助性成分制备药学上常用的制剂。

其中，所述的制剂是滴鼻剂。

进一步地，所述的滴鼻剂是滴剂、喷雾剂、注入剂或洗净剂。

其中，所述的滴剂为凝胶滴剂，它是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成：

徐长卿14-26份、蝉蜕3.15-5.85份、冰片0.021-0.039份、牛黄0.21-0.39份、山梨酸钾0.14-0.26份、白及胶0.7-1.3份、卡波姆9400.63-1.17份、甘油7-13份、三乙醇胺1.26-2.34份。

进一步优选地，所述的凝胶滴剂是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成：

徐长卿20份、蝉蜕4.5份、冰片0.03份、牛黄0.3份、山梨酸钾0.2份、白及胶1份、卡波姆9400.9份、甘油10份、三乙醇胺1.8份。

其中，所述的凝胶滴剂中含有丹皮酚的重量百分不低于0.2284％，含有冰片的重量百分含量不低于0.02759％。

本发明还提供了制备该药物组合物的方法，所述的凝胶滴剂制备方法包括如下步骤：

a、称取重量配比的原料及辅料：

b、取徐长卿饮片，采用水蒸气蒸馏法，收集馏出液，冷藏结晶或加入氯化钠冷藏结晶，馏出液体积与氯化钠质量比例为100∶2.5～10，过滤，真空干燥，即得丹皮酚结晶；采用β-环糊精包合法，得丹皮酚环糊精包合物，干燥备用；

c、将b步骤的徐长卿收集馏出液后的残渣，加入蝉蜕，加水煎煮，过滤，滤液浓缩，澄清，得上清液，浓缩，得浓缩液；

d、取冰片，采用β-环糊精包合法包合，得冰片环糊精包合物；

e、取c步骤的浓缩液，加入卡波姆940、白及胶，搅拌溶胀，加入甘油及山梨酸钾，搅拌均匀，调节pH6.0，得凝胶基质，备用；

f、取b步骤丹皮酚环糊精包合物、d步骤冰片环糊精包合物、牛黄，混合均匀后，加入e步骤所述的凝胶基质中，搅拌均匀，制成凝胶剂。

其中，c步骤所述的澄清采用剂101果汁澄清剂。

本发明还提供了所述的药物组合物在制备治疗变应性鼻炎的药物组合物中的用途。

其中，所述的药物是鼻粘膜局部给药的药物。

本发明药物原料中徐长卿性味辛温，功能祛风化湿，止痛止痒，是为君药；蝉蜕性味甘寒，功能散风除热，利咽透疹，有助徐长卿止痛止痒之功和除其过于辛燥之弊，故为臣药；牛黄性味甘凉，功能化痰开窍，清热解毒，起佐助之效，故为佐药；天然冰片性味辛苦微寒，功能开窍醒神，清热止痛，且能引药上行，故为使药。纵观全方，标本兼治，诸药合用，共奏疏风清热、开窍醒鼻之功效。

本发明药物具有疏风清热、开窍醒鼻的功效，临床疗效显著，制备成凝胶剂为均一乳胶稠厚液体，能够较长时间与作用部位紧密粘附，药物作用时间延长，并有较好的生物相容性，使用舒适；将药物直接投到鼻粘膜上，可把全身作用降到最小，药物集中到鼻部而产生最佳疗效。上述药效试验表明，本发明药物凝胶滴剂通过降低AR豚鼠血LTE₄、IgE浓度，抑制炎性介质的释放，减少炎症细胞在鼻粘膜的聚集，从而减轻鼻道的变态反应。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1：正常组豚鼠鼻粘膜组织嗜酸性细胞光镜图片(HE×400)

图2：模型组豚鼠鼻粘膜组织嗜酸性细胞光镜图片(HE×400)

图3：本发明药物凝胶滴剂I组豚鼠鼻粘膜组织嗜酸性细胞光镜图片(HE×400)

图4：本发明药物凝胶滴剂II组豚鼠鼻粘膜组织嗜酸性细胞光镜图片(HE×400)

图5：雷诺考特组豚鼠鼻粘膜组织嗜酸性细胞光镜图片(HE×400)

具体实施方式

实施例1本发明药物凝胶滴剂的制备

a、称取下列重量配比的原料：

徐长卿20g、蝉蜕4.5g、天然冰片0.03g、人工牛黄0.3g

b、取徐长卿，加入按生药重量计20倍量的水，浸泡30分钟，采用水蒸气蒸馏法，提取3小时，收集馏出液，加入氯化钠冷藏结晶，馏出液体积与氯化钠质量比例为100∶5，过滤，真空干燥，即得丹皮酚结晶；取丹皮酚结晶，加适量乙醇使其溶解，再缓慢加入β-环糊精饱和水溶液中，丹皮酚结晶与β-环糊精的质量比例为1∶8，在45℃下，800r/min搅拌包合1小时后，冷藏24小时，滤过，真空干燥，得丹皮酚环糊精包合物，备用；

c、将b步骤的徐长卿收集馏出液后的残渣，加入蝉蜕，加水，煎煮2次，其中第一次加水按生药重量10倍，煎煮1小时，第二次加水8倍，煎煮40分钟，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至100ml，加入5％101果汁澄清剂，其药液与澄清剂体积比例为100∶18，搅拌，静置数小时，再加等量的5％101果汁澄清剂助剂，搅拌，离心，得上清液，浓缩至80ml，得浓缩液；

d、取天然冰片，加适量乙醇使其溶解，缓慢加入β-环糊精饱和水溶液中，冰片与β-环糊精的质量比例为1∶6，在30℃下，800r/min搅拌包合1.5小时后，冷藏24小时，滤过，真空干燥，得天然冰片环糊精包合物，备用；

e、取c步骤的浓缩液，加入0.9g卡波姆940、1g白及胶，搅拌溶胀，加入10g甘油及0.2g山梨酸钾，搅拌均匀，再加入1.8g三乙醇胺调节pH至6.0-6.5，得凝胶基质，备用；

f、取b步骤丹皮酚环糊精包合物2.2g、d步骤冰片环糊精包合物0.25g、牛黄0.3g，混合均匀后，加入e步骤所述的凝胶基质中，搅拌均匀，制成凝胶滴剂。

将制得的凝胶滴剂分装，每支10g，凝胶剂中丹皮酚重量百分率不低于0.2284％，冰片的重量百分率不低于0.02759％。

实施例2本发明药物凝胶滴剂的制备

1.徐长卿中的丹皮酚提取工艺

将处方量徐长卿和蝉蜕加20倍水，浸泡0.5h，煎煮3h后，收集馏出液，加入5％(g/ml)氯化钠，冷藏24h，滤过，结晶用蒸馏水洗涤数遍，常温下抽真空干燥。

2.丹皮酚包合工艺

取丹皮酚2g溶于12ml乙醇中，缓慢滴入400ml β-环糊精饱和水溶液中，水温45℃，搅拌时间1h(800r/min)，冷藏24h，过滤。乙酸乙酯少量洗3次，吹干。常温抽真空干燥。

3.冰片包合工艺

冰片1g溶于10ml中，缓慢滴入280ml β-环糊精饱和水溶液中，水温30℃，搅拌时间1.5h(800r/min)，冷藏24h，过滤。乙酸乙酯少量洗3次，吹干。常温抽真空干燥。

4.凝胶剂制备工艺

将徐长卿收集馏出液后的残渣，加入蝉蜕，加水，煎煮2次，其中第一次加水按生药重量10倍，煎煮1小时，第二次加水8倍，煎煮40分钟，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至100ml药液离心10min后(3500r./min)加18ml5％101澄清剂，静置数小时后，离心得上清液，浓缩至80ml，加入0.2g山梨酸钾和1g白及粉，0.9gCb940，10g甘油，溶胀，搅拌，再加入1.8g三乙醇胺，搅匀。将2.2g丹皮酚包合物和0.25g冰片包合物，0.3g牛黄，套色法混匀，加入，搅匀，分装。

每支10g，凝胶滴剂中丹皮酚重量百分率不低于0.2284％，冰片的重量百分率不低于0.02759％。

实施例3本发明药物喷雾剂的制备

取徐长卿14g、蝉蜕5.85g、冰片0.039g、牛黄0.39g，按实施例1所述的方法提取药材，浓缩液加入常规辅料，装入喷瓶，制备成喷雾剂。

实施例4本发明药物注入剂的制备

徐长卿26g、蝉蜕3.15g、冰片0.021g、牛黄0.21g，按实施例2所述的方法提取药材，浓缩液加入常规辅料，灌封，制备成注入剂。

实施例5本发明药物洗净剂的制备

徐长卿26g、蝉蜕3.15g、冰片0.021g、牛黄0.21g，按实施例1所述的方法提取药材，浓缩液加入常规辅料，制备成洗净剂。

实施例6本发明药物凝胶剂含量测定方法

1)凝胶剂中丹皮酚的含量测定

(1)色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：Hypersil ODS(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：已腈-0.1％磷酸溶液(60∶40)；流速1.0ml/min；柱温30℃；检测波长274nm。理论塔板数按丹皮酚峰面积计应不低于3000。

(2)对照品溶液的制备：精密称取丹皮酚对照品10.06mg，置25ml量瓶中，加无水乙醇溶解并至刻度，摇匀，作为对照品储备液。再精密移取1ml对照品储备液至10ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

(3)供试品溶液的制备：精密称取样品0.25g，置15ml具塞离心管中，精密加入10ml无水乙醇，超声40min(250W，40kHz)，滤过，取续滤液，即得。

(4)测定法与测定结果

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

表样品测定结果

测得丹皮酚的重量百分率不得低于0.2284％。

2)冰片的含量测定

(1)色谱条件与系统适用性试验：柱温：150℃；气化室温度：230℃；检测器：FID；温度：230℃；氮气压力：4.0×10⁵Pa；氢气压力：4.0×10⁵Pa；空气压力：4.0×10⁵Pa；流速：1ml/min；按右旋龙脑峰计理论塔板数不低于1900。

(2)对照品溶液的制备：精密称取右旋龙脑对照品24.10mg，置25ml容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并定容，摇匀，得对照品溶液。

精密称取联苯对照品15.66mg，置50ml的容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并定容，摇匀，得内标物溶液。

(3)供试品溶液的制备：精密称取2.0g样品，置15ml具塞离心管中，精密加入5ml乙酸乙酯，振摇提取40min后，滤过，取续滤液4ml置5ml量瓶中，精密加入1ml联苯内标溶液，摇匀即得。

(4)测定法与测定结果

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2微升，注入气相色谱仪，测定，即得。

表样品含量测定结果

测得冰片的重量百分率不得低于0.02759％。

实施例7本发明药物凝胶滴剂的辅料选择试验

1)卡波姆940用量比例考察方法与结果

取徐长卿20g、蝉蜕4.5g、天然冰片0.03g、人工牛黄0.3g，按照实施例1所述的方法提取药材，取c步骤所得的100ml浓缩液，加入0.1g、0.2g、0.3g、0.4g、0.5g、0.6g、0.7g、0.8g、0.9g、1g的卡波姆940，搅拌溶胀过夜，加1g甘油及0.2g山梨酸钾，再加入三乙醇胺中和至PH为6.0-6.5，加入2.45g的环糊精，搅匀，离心(2500r/min)30min，观察有无环糊精沉淀。

上述试验中，100ml浓缩液中加入0.9g、1g卡波姆940的凝胶基质离心后无环糊精沉淀现象，但含1g卡波姆940的凝胶基质过于粘稠；其他含量卡波姆940的凝胶基质离心后均有环糊精沉淀现象。

结果表明，凝胶基质中卡波姆940加入质量与浓缩液的体积比以0.9∶100为宜。

2)白及胶用量比例考察方法与结果

取徐长卿20g、蝉蜕4.5g、天然冰片0.03g、人工牛黄0.3g，按照实施例1所述的方法提取药材，取c步骤所得的100ml浓缩液，加入0.9g的卡波姆940，加入1g、2g、3g、4g、5g的白及胶，搅拌溶胀过夜，加1g甘油及0.2g山梨酸钾，再加入三乙醇胺中和至pH为6.0-6.5，加入2.45g的环糊精，搅匀，离心(2500r/min)30min，观察有无环糊精沉淀。

上述试验中，100ml浓缩液中加入1g白及胶的凝胶基质无环糊精沉淀，其他含量白及胶的凝胶基质均有环糊精沉淀。

结果表明，凝胶基质中白及胶加入质量与浓缩液的体积比以1∶100为宜。

以下通过具体药效学试验证明本发明的有益效果。

实验例1本发明药物凝胶治疗变应性鼻炎的药效学试验

1)动物造模、分组及给药

采用0.5mgOVA(卵白蛋白)作抗原，氢氧化铝粉末30mg作佐剂，加生理盐水1ml形成混悬液，腹腔注射，隔日1次，共注射7次致敏。于致敏完成后第4天，豚鼠取头低位，每侧鼻腔滴以2％OVA溶液50μl激发，隔日1次，共5次，每次激发为当日第1次滴鼻给药1h后。

普通级Hartley豚鼠65只，雌雄各半，体重350-400g，随机分成5组，其中，凝胶滴剂I组10只，凝胶滴剂II组10只，西药对照组10只，模型组10只，正常对照组13只。于第7次致敏注射后的第2天开始给药，每日3次。凝胶滴剂I组0.2483g/ml(由实施例1制备)，凝胶滴剂II组0.4966g/ml(由实施例1制备)，西药对照组用雷诺考特1.28g/ml(布地奈德鼻喷雾剂，购于阿司利康制药有限公司)，均以微量加样器滴入双侧鼻孔，每侧每次滴入50μl。模型组及正常对照组用等容量的生理盐水滴鼻。连续给药11天。

2)观察指标及检测项目

行为学指标评分每次卵清蛋白双侧鼻腔滴鼻激发后，观察记录30min内豚鼠喷嚏、搔鼻次数、流涕量，采用叠加法计算总分，总分≥5分表示造模成功。

(1)喷嚏：一次连续3-9个为1分，10-14个为2分，≥15个为3分。

(2)鼻痒：搔鼻2-3次为1分，3-5次为2分，≥5次为3分。

(3)流涕：流至鼻孔为1分，超过前鼻孔为2分，流涕满面为3分。

血液检测指标在第11天治疗结束后，禁食过夜，次日断头采集血液标本，按试剂盒说明书的要求进行测定。

(1)血清白三烯E4(LTE4)测定取血清标本，用ELISA法于波长450nm的酶标仪上检测。根据LTE4试剂盒内附的标准品血清测定的OD值结果，得出标准曲线，再通过测定各豚鼠血清LTE4的OD值，算出各豚鼠的血清LTE4抗体浓度。

(2)血清免疫球蛋白E(IgE)测定方法同上，用ELISA法于波长450nm的酶标仪上检测。血清IgE抗体浓度计算方法同上。

鼻黏膜组织病理形态学和免疫组化观察豚鼠断头采集血处死后，取其鼻甲和中隔粘膜于10％福尔马林中固定，石蜡包埋，每标本切两片，分别作光镜观察和免疫组化检查。光镜下每张切片观察5个(10×40)视野，计嗜酸性细胞平均数。NF-kB免疫组化检查采用二步法，具体操作按试剂盒说明书进行。

3)实验结果

行为学指标的改变表1结果表明，模型组动物在第1次给OVA溶液滴鼻激发后，就出现喷嚏、搔鼻和流涕的症状，随着激发次数的增加，症状逐渐加剧，第4次激发时，出现了典型的变应性鼻炎症状。而低、高二个剂量的凝胶滴剂对豚鼠的喷嚏、搔鼻、流涕等变应性鼻炎行为学症状均有明显的抑制作用，改善AR症状。

表1本发明凝胶滴剂对AR豚鼠行为学指标的影响

上述数据采用组间比较用F检验，采用SPSS 13.0统计软件包分析(进行Compare Means的One-Way ANOVA过程操作)。A组与B组比较，①P＜0.01；C、D、E组与B组比较，②P＜0.01；治疗组C、D、E组间两两比较无显著差异，P＞0.05。

血清LTE₄、IgE指标的变化表2结果表明，模型组血清中LTE₄、IgE含量显著升高。与模型组比较，治疗组干预治疗后血清LTE₄、IgE含量低于模型组，凝胶滴剂高剂量组疗效优于低剂量组。

表2本发明凝胶滴剂对AR豚鼠血清中IgE、LTE₄含量的影响

上述数据采用组间比较用F检验，采用SPSS 13.0统计软件包分析(进行Compare Means的One-Way ANOVA过程操作)。A组与B组比较，P＜0.01；C、D、E组分别与B组比较，P＜0.01。C、D、E组两组之间采用Compare Means的Independent-Sample T Test过程操作：C组与D组比较，P＜0.01；C组与E组比较，P＜0.01；D组与E组比较，P＜0.05。

鼻粘膜病理形态学的改变表3结果表明，模型组豚鼠鼻粘膜嗜酸性细胞计数显著升高，治疗组豚鼠嗜酸性细胞计数显著降低。各组豚鼠鼻粘膜组织嗜酸性细胞光镜图片见附图1-5。

表3本发明药物凝胶滴剂对AR豚鼠鼻粘膜嗜酸性细胞计数的影响

上述数据采用组间比较用F检验，采用SPSS 13.0统计软件包分析(进行Compare Means的One-Way ANOVA过程操作)。A组与B组比较，①P＜0.01；C、D、E组与B组比较，②P＜0.01；各治疗组间两两比较无显著差异，P＞0.05。

免疫组化的改变表4结果表明，A、B、C、D、E各组的豚鼠NF-kB免疫组化无显著差异。

表4对AR豚鼠NF-kB免疫组化的影响

本发明药物具有疏风清热、开窍醒鼻的功效，临床疗效显著，制备成凝胶剂为均一乳胶稠厚液体，能够较长时间与作用部位紧密粘附，药物作用时间延长，并有较好的生物相容性，使用舒适；将药物直接投到鼻粘膜上，可把全身作用降到最小，药物集中到鼻部而产生最佳疗效。上述药效试验表明，本发明药物凝胶滴剂通过降低AR豚鼠血LTE₄、IgE浓度，抑制炎性介质的释放，减少炎症细胞在鼻粘膜的聚集，从而减轻鼻道的变态反应。

一种治疗变应性鼻炎的药物组合物及其制备方法和用途专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。