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一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法

一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法

IPC分类号 : C07K9/00,C07K1/14,C07K1/16

申请号
CN201811260150.0
可选规格
  • 专利类型: 发明专利
  • 法律状态: 有权
  • 申请日: 2018-10-26
  • 公开号: 109280081B
  • 公开日: 2019-01-29
  • 主分类号: C07K9/00
  • 专利权人: 浙江海洋大学

专利摘要

本发明公开了一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,弥补了我国金枪鱼加工产业在唾液酸糖肽方面的空白。该方法是利用脱脂鱼卵经超声波辅助水提取法获得金枪鱼卵唾液酸糖肽粗品,经葡聚糖凝胶G‑50柱分离和活性炭吸附后,利用甲醇‑水体系进行洗脱后获得金枪鱼卵唾液酸糖肽纯品。该制备方法既简单方便,提取率较高,又提高了产品的安全性。

权利要求

1.一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

(1)将冷冻的金枪鱼鱼卵取出后在温度为4℃的条件下解冻、匀浆后在温度为-20℃的条件下冷冻干燥12h,得到金枪鱼鱼卵粉;

(2)将所述金枪鱼鱼卵粉加入10-15倍体积的无水乙醇中搅拌10h进行脱脂,期间每3h更换一次无水乙醇,脱脂后通过双层滤脂过滤除去乙醇,取滤渣于冷风干燥机中风干6-10h得到脱脂金枪鱼鱼卵粉;

(3)将所述脱脂金枪鱼鱼卵粉按其重量体积比的20-30倍加入去离子水中进行唾液酸糖肽的提取,在温度为4-10℃的条件下提取12-16h,提取期间每小时进行超声波处理10-30min,超声声场强度为200~300W/cm2,超声频率为30kHz,以辅助获取唾液酸糖肽,在获取结束后进行离心,离心转速为8000r/min,离心时间为10-15min,取上清液在40-45℃下进行减压浓缩,获得浓缩液;

(4)将所述浓缩液经葡聚糖凝胶G-50柱进行分离,温度为20-30℃,流速为1.0-1.5ml/min,每7min收集洗脱液,用高效液相色谱法判断洗脱液中的唾液酸糖肽是否流脱,收集含有唾液酸糖肽的洗脱液在40-45℃下进行减压浓缩,冷冻干燥,得到金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品;

(5)将所述金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品利用活性炭吸附,经甲醇-水体系进行洗脱,所述甲醇-水体系进行洗脱为:用质量分数为4-6%的NaCl-甲醇溶液分三次洗脱活性炭中的唾液酸糖肽,收集洗脱液,经分子截留量为200Da的透析袋透析后,减压浓缩后冻干,得金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽纯品,其中,所述甲醇的体积分数为5-8%。

2.根据权利要求1所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于,步骤(5)中所述活性炭吸附为:将所述金枪鱼鱼卵唾液酸糖肽粗品配成浓度为100-150mg/ml的溶液,加入适量活性炭吸附唾液酸糖肽。

3.根据权利要求2所述的一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法,其特征在于:所述活性炭的用量为10mg/ml,吸附时间为60-120min。

一种从金枪鱼卵中制备唾液酸糖肽的方法专利购买费用说明

专利买卖交易资料

Q:办理专利转让的流程及所需资料

A:专利权人变更需要办理著录项目变更手续,有代理机构的,变更手续应当由代理机构办理。

1:专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2:按规定缴纳著录项目变更手续费。

3:同时提交相关证明文件原件。

4:专利权转移的,变更后的专利权人委托新专利代理机构的,应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A:(1)直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,(2)通过代办处缴纳,(3)通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q:专利转让变更,多久能出结果

A:著录项目变更请求书递交后,一般1-2个月左右就会收到通知,国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。

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