专利摘要

本发明涉及式Ⅰ所示5‑(3‑苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其药学上可接受的盐，药物组合物以及其在制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂中的应用。其中，R选自：甲基、乙基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基；R1选自：氢、2‑硝基、3‑硝基、4‑硝基、2‑氨基、3‑氨基、4‑氨基、2‑甲氨基、3‑甲氨基、4‑甲氨基、2‑二甲氨基、3‑二甲氨基、4‑二甲氨基、2‑甲氧基、3‑甲氧基、4‑甲氧基、2‑乙氧基、3‑乙氧基、4‑乙氧基、2‑羟基、3‑羟基、4‑羟基、2,3‑二羟基、2,4‑二羟基、2,5‑二羟基、3,4‑二羟基、3,5‑二羟基、2‑羟基‑3‑甲氧基、3‑羟基‑4‑甲氧基、4‑羟基‑3‑甲氧基、4‑羟基‑3‑乙氧基、3,4,5‑三甲氧基或4‑羟基‑3,5‑二甲氧基；R2选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基、三氟甲基或氯代C1～C4直链烷基。

权利要求

1.一类化学结构式Ⅰ所示的5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其药学上可接受的盐：

其中，R选自：甲基、乙基、C3~C4直链或C3~C4支链烷基；R1选自：氢、2-硝基、3-硝基、4-硝基、2-氨基、3-氨基、4-氨基、2-甲氨基、3-甲氨基、4-甲氨基、2-二甲氨基、3-二甲氨基、4-二甲氨基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基、2-乙氧基、3-乙氧基、4-乙氧基、2-羟基、3-羟基、4-羟基、2,3-二羟基、2,4-二羟基、2,5-二羟基、3,4-二羟基、3,5-二羟基、2-羟基-3-甲氧基、3-羟基-4-甲氧基、4-羟基-3-甲氧基、4-羟基-3-乙氧基、3,4,5-三甲氧基或4-羟基-3,5-二甲氧基；R2选自：氢、C1~C2烷基、C3~C4直链或C3~C4支链烷基、三氟甲基或氯代C1~C4直链烷基。

2.一类5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其药学上可接受的盐，选自下列化合物：

。

3.权利要求1所述的5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物的制备方法，其特征在于，它的制备反应如下：

式中，R、R1和R2的定义如权利要求1所述；CDI 是N,N'-羰基二咪唑缩写；DMF是N,N-二甲基甲酰胺。

4.权利要求1或2所述的5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其在药学上可接受的盐在制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂中的应用。

5.一种药物组合物，包括权利要求1或2中至少一种化合物和制药学上可用的载体。

说明书

技术领域

本发明涉及一类新化合物、其制备方法与应用，具体是5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物、其制备方法及其在制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂的应用。

背景技术

李水师[湖南大学硕士学位论文，2017]描述了4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑1的制备，收率78％；4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑经酰化得到4-甲基-5-乙酰基-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑2，再经取代制备的N-(4-甲基-5-乙酰基噻唑-2-基)-3-[4-(2-甲氧苯基)哌嗪基]丙酰胺4对NA体外抑制活性IC50为37.7±3.5μM。

Tassini等[J Med Chem,2017,60(4):1400-1416]描述了4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑5的制备方法；基于该4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑合成了的噻唑衍生物6具有广谱的抗病毒活性。

Quattropani等[US9150561B2]描述了由4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑合成4-甲基-5-乙酰基-2-甲酰氨基噻唑7(收率77.9％)，4-甲基-5-乙酰基-2-丙酰氨基噻唑8(收率85.4％)，4-甲基-5-乙酰基-2-丁酰氨基噻唑9(收率89.5％)和其衍生物10～12的制备方法；化合物10～12可用于治疗或预防自身免疫性疾病和炎性疾病等。

Bodill等[Bioorgan Med Chem,2013，21(14),4332-4341]描述了4-甲基-5-乙酰基-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑2的制备方法，收率69.1％；4-甲基-5-乙酰基-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑膦酯化得到的化合物13具有良好的抗疟疾作用。

2010年，Dao等[J Nat Prod,2010,73(10):1636-1642]从植物水翁嫩芽中提取得到14个类黄酮类化合物14。其对H1N1和H9N2具有显著的抑制作用。其中，化合物15对H1N1(WT)流感病毒和H1N1(H274Y)流感病毒的NA具有最好的抑制活性，IC50值分别为8.15±1.05μM和3.31±1.34μM。2010年，Ryu等[Bioorg Med Chem Lett,2010,20(3):971-974]从植物灵草根的甲醇提取物中分离得到4个丙烯酮化合物，活性筛选显示化合物16具有最好的NA抑制活性，IC50值为9.0μM。

2011年，Dao等[Bioorg Med Chem Lett,2011,21(1):294-298]从植物胀果甘草的丙酮提取物中分离得到8个丙烯酮衍生物。其中化合物16和17对多种流感病毒的NA均具有较强的抑制活性，对H1N1、H9N2、H1N1(WT)和H1N1(H274Y)四种流感病毒的IC50值8.10～37.81μM。2011年，Park等[Bioorg Med Chem Lett,2011,21(18):5602-5604]利用活性追踪分离的方法从Angelica keiskei中分离得到6个具有长链烷基的丙烯酮衍生物，NA抑制活性最好的化合物18的IC50为12.3±1.1μM。

2012年，Jeong等[Biol Pharm Bull,2012,35(5):786-790]从干燥的植物Caesalpinia sappan芯材中分离得到12个化合物，并体外筛选了它们对H1N1(A/PR/8/34)、H3N2(A/Hong Kong/8/68)和H9N2(A/Chicken/Korea/MS96/96)三种流感病毒NA抑制活性；化合物19对三类病毒的NA均具有较好的抑制活性，IC50值分别为15.9μM、18.1μM和17.0μM。2016年，Yaeghoobi等[Med Chem Res,2016,25(10):2133-2142]采用Claisen–Schmidt缩合反应合成了33个查尔酮类化合物。在1000μg/mL检测浓度下，化合物20对NA抑制率大于50％。

Kinger等[Arch Pharm Res,2012,35(4):633-638]利用乙酰基噻吩或乙酰基呋喃与取代苯甲醛反应，得到丙烯酮衍生物21和22。活性筛选发现部分苯环4位取代的化合物具有一定的NA抑制活性，在25μg/mL的检测浓度下，抑制率大于50％。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供一类5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物、其制备方法、药物组合物和用途。

为解决本发明的技术问题，本发明提供如下技术方案：

本发明技术方案的第一方面是提供了一类如结构式Ⅰ所示5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其药学上可接受的盐：

其中，R选自：甲基、乙基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基；R1选自：氢、2-硝基、3-硝基、4-硝基、2-氨基、3-氨基、4-氨基、2-甲氨基、3-甲氨基、4-甲氨基、2-二甲氨基、3-二甲氨基、4-二甲氨基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基、2-乙氧基、3-乙氧基、4-乙氧基、2-羟基、3-羟基、4-羟基、2,3-二羟基、2,4-二羟基、2,5-二羟基、3,4-二羟基、3,5-二羟基、2-羟基-3-甲氧基、3-羟基-4-甲氧基、4-羟基-3-甲氧基、4-羟基-3-乙氧基、3,4,5-三甲氧基或4-羟基-3,5-二甲氧基；R2选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基、三氟甲基或氯代C1～C4直链烷基。

本发明技术方案的第一方面还提供的一类5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物选自下列化合物：

本发明技术方案的第二方面是提供了5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物的制备方法，其特征在于它的制备反应如下：

其中，R选自：甲基、乙基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基；R1选自：氢、2-硝基、3-硝基、4-硝基、2-氨基、3-氨基、4-氨基、2-甲氨基、3-甲氨基、4-甲氨基、2-二甲氨基、3-二甲氨基、4-二甲氨基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基、2-乙氧基、3-乙氧基、4-乙氧基、2-羟基、3-羟基、4-羟基、2,3-二羟基、2,4-二羟基、2,5-二羟基、3,4-二羟基、3,5-二羟基、2-羟基-3-甲氧基、3-羟基-4-甲氧基、4-羟基-3-甲氧基、4-羟基-3-乙氧基、3,4,5-三甲氧基或4-羟基-3,5-二甲氧基；R2选自：氢、C1～C2烷基、C3～C4直链或C3～C4支链烷基、三氟甲基或氯代C1～C4直链烷基。

本发明技术方案的第三方面是提供含有第一方面所述化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物，该药物组合物含有治疗有效量的本发明的5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其药学上可接受的盐，以及任选的含有药用载体。其中所述的药用载体指药学领域常用的药用载体；该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物及其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂组合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物及其药学上可接受的盐在其药物组合物中的含量通常为0.1％～95％重量百分比。

本发明化合物及其药学上可接受的盐或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

本发明化合物及其药学上可接受的盐可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

为了将本发明化合物及其药学上可接受的盐制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。

还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物及其药学上可接受的盐与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物及其药学上可接受的盐先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物及其药学上可接受的盐片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物及其药学上可接受的盐的胶囊剂。

为将本发明化合物及其药学上可接受的盐制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。

为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。

本发明技术方案的第四方面是提供本发明所述5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其药学上可接受的盐以及第三方面所述药物组合物在制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂方面的应用。

有益技术效果：

本发明的5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物是一类具有流感病毒神经氨酸酶抑制活性的化合物。

具体实施方式

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]噻唑(A)的制备

(1)4-甲基-5-乙酰基噻唑的制备

0.450g(10.0mmol)甲酰胺溶于15mL四氢呋喃溶液中，冰浴条件下分批次加入1.300g(6.0mmol)五硫化二磷，加毕继续冰浴搅拌10min后，室温反应2h。抽滤，脱溶得黄色油状液体，不进一步纯化直接投入下一步反应。将所得硫代甲酰胺粗品溶于10mL乙醇溶液中，加入催化量的NEt3，滴加1.790g(10.0mmol)3-溴-2,4-戊二酮，室温搅拌30min，回流2h。反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，脱溶烘干得灰色固体4-甲基-5-乙酰基噻唑，收率73.3％(以甲酰胺计)，m.p.84～86℃。

(2)4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]噻唑(A)的制备

0.141g(1.0mmol)4-甲基-5-乙酰基噻唑、0.122g(1.0mmol)对羟基苯甲醛溶于6mL乙醇溶液中，通入干燥HCl气体至饱和，室温反应6h。反应液中有固体析出，抽滤，乙醇重结晶，烘干得深绿色固体A，收率67.7％，m.p.215～217℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.74(s，3H，CH3)，6.86(d，J＝7.8Hz，2H，C6H4)，7.24(d，J＝15.4Hz，1H，CH)，7.62～7.72(m，3H，C6H4+CH)，9.23(s，1H，thiazole-H)，10.28(s，1H，OH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.51，116.43，121.57，125.60，131.60，132.13，145.08，156.92，158.33，161.02，182.99。

实施例2

4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑的制备

(1)4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑的制备

5.0g(50.0mmol)乙酰丙酮溶于40mL丙酮溶液中，冰浴条件下分批加入8.9g(50.0mmol)NBS，在0℃继续反应3h。反应倒入50mL水中，3×90mL二氯甲烷萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，旋蒸去溶，得黄色油状液体，直接用于下一步反应。

3.8g(50.0mmol)硫脲溶于40mL乙醇溶液中，滴加上步反应得粗品，室温搅拌30min，回流8h。静置冷却，抽滤，滤饼溶于100mL水，氨水调pH＝10，析出大量固体，抽滤，烘干得白色固体4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑，收率80.3％(以乙酰丙酮计)，m.p.247～249℃。

(2)4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑的制备

0.360g(6.0mmol)冰乙酸酸溶于10mL DMF溶液中，分批加入0.972g(6.0mmol)N,N'-羰基二咪唑(CDI)，室温搅拌30min，加入0.624g(4.0mmol)4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑，85℃反应8h。冷至室温，反应液倒入30mL冰水，析出大量固体，抽滤，依次用适量饱和碳酸氢钠溶液、冰水洗涤，烘干，粗品经乙酸乙酯/四氢呋喃重结晶，得白色固体4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑，收率60.5％，m.p.237～239℃。

实施例3

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C1)的制备

0.198g(1.0mmol)4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑、0.122g(1.0mmol)对羟基苯甲醛溶液于6mL乙醇溶液中，通入干燥HCl气体至饱和，室温反应6h。反应液有固体析出，抽滤，乙醇重结晶，烘干得黄色固体C1，收率75.2％，m.p.251～253℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.19(s，3H，CH3CO)，2.64(s，3H，CH3)，6.84(d，J＝8.2Hz，2H，C6H4)，7.19(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.60(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.66(d，J＝8.2Hz，2H，C6H4)，10.10(s，1H，OH)，12.48(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.80，23.08，116.42，121.44，125.65，125.74，131.26，143.75，155.11，159.69，160.80，169.71，182.64。

实施例4

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-氨基噻唑(B)的制备

0.302g(1.0mmol)C1溶于10mL甲醇溶液(V甲醇：V水＝1:1)中，通入干燥HCl气体至饱和，50℃加热反应3h。缓慢加入足量饱和NaHCO3溶液，析出固体，抽滤，甲醇重结晶得黄色固体B，收率82.6％，m.p.211～213℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.62(s，3H，CH3)，5.28(s，2H，NH2)，6.87(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)，7.12(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.62(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.66(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：15.84，116.45，119.61，121.10，125.59，131.57，144.77，161.10，169.20，169.24，181.32。

实施例5

4-甲基-5-[3-(4-甲氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C2)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol对甲氧基苯甲醛反应6h。粗品经乙醇重结晶得黄色固体C2，收率53.1％，m.p.223～225℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.20(s，3H，CH3CO)，2.64(s，3H，CH3)，3.83(s，3H，CH3O)，7.01(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)，7.25(d，J＝15.4Hz，1H，CH)，7.63(d，J＝15.4Hz，1H，CH)，7.77(d，J＝7.9Hz，2H，C6H4)，12.51(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.81，23.07，55.86，114.94，122.64，125.59，127.41，131.06，143.15，155.33，159.83，161.84，169.69，182.66。

实施例6

4-甲基-5-[3-(4-二甲氨基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C3)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol 4-二甲氨基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得橙黄色固体C3，m.p.204～206℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.18(s，3H，CH3CO)，2.63(s，3H，thiazole-CH3)，3.01(s，6H，2×CH3)，6.74(d，J＝8.2Hz，2H，C6H4)，7.11(d，J＝15.1Hz，1H，CH)，7.57～7.65(m，3H，C6H4+CH)。13CNMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.79，23.07，41.67，114.92，121.13，121.21，125.75，130.94，143.54，150.50，154.95，159.61，169.68，182.47。

实施例7

4-甲基-5-[3-(4-硝基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C4)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol 4-硝基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得黄色固体C4，收率71.5％，m.p.255～257℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.20(s，3H，CH3CO)，2.65(s，3H，CH3)，7.54(d，J＝15.5Hz，1H，CH)，7.70(d，J＝15.5Hz，1H，CH)，8.06(d，J＝7.8Hz，2H，C6H4)，8.24(d，J＝7.8Hz，2H，C6H4)，12.54(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.95，23.06，124.38，125.17，128.98，130.15，140.22，141.26，148.43，156.74，160.48，169.78，182.22。

实施例8

4-甲基-5-[3-(4-氨基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C5)的制备

0.331g(1.0mmol)C4溶于10mL乙醇溶液中，加入2.256g(10.0mmol)二水合氯化亚锡，回流5h。反应液倒入水中，稀NaOH溶液调pH至12，抽滤，依次用适量稀NaOH溶液、饱和食盐水洗涤，乙醇重结晶，烘干得红色固体C5，收率89.7％，m.p.244～246℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.18(s，3H，CH3CO)，2.62(s，3H，CH3)，5.93(s，2H，NH2)，6.60(d，J＝7.8Hz，2H，C6H4)，7.04(d，J＝15.1Hz，1H，CH)，7.48(d，J＝7.8Hz，2H，C6H4)，7.54(d，J＝15.1Hz，1H，CH)，12.41(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.71，23.06，114.15，118.31，121.95，125.93，131.43，144.88，152.56，154.43，159.33，169.71，182.52。

实施例9

4-甲基-5-[3-(4-甲氨基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑C6的制备

按实施例3的方法，制备4-甲基-5-[3-(4-甲氨基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑。

实施例10

4-甲基-5-[3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑C7的制备

按实施例3的方法，制备4-甲基-5-[3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑。

实施例11

4-甲基-5-[3-(4-羟基-3-乙氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑C8的制备

按实施例3的方法，制备4-甲基-5-[3-(4-羟基-3-乙氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑。

实施例12

4-甲基-5-[3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C9)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol 3,4-二羟基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得黄色固体C9，收率65.1％，m.p.270～272℃。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.19(s，3H，CH3CO)，2.63(s，3H，CH3)，6.83～7.21(m，4H，C6H3+CH)，7.51(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，12.53(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.78，23.08，115.20，116.43，121.29，122.81，125.58，126.21，144.06，146.18，149.38，155.10，159.57，169.72，182.42。

实施例13

4-甲基-5-[3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C10)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol 4-羟基-3-甲氧基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得绿色固体C10，收率54.7％，m.p.264～266℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.19(s，3H，CH3CO)，2.63(s，3H，CH3)，3.83(s，3H，CH3O)，6.98～7.00,7.19～7.26(m，3H，C6H3)，7.14(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.55(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，12.53(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.80，23.08，56.26，112.54，116.20，121.85，123.94，125.55，126.31，144.19，148.41，150.23，155.16，159.68，169.68，182.77。

实施例14

4-甲基-5-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C11)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol 3-羟基-4-甲氧基苯甲醛反应6h。粗品乙醇重结晶，得黄绿色固体C11，m.p.271～273℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.19(s，3H，CH3CO)，2.64(s，3H，CH3)，3.83(s，3H，CH3O)，6.98～7.00，7.19～7.25(m，3H，C6H3)，7.14(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.55(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，12.52(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.80，23.08，56.12，112.50，114.47，122.38，122.69，125.52，127.61，143.61，147.28，150.90，155.36，159.72，169.74，182.48。

实施例15

4-甲基-5-[3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)丙烯酰基]-2-乙酰氨基噻唑(C12)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-乙酰氨基噻唑与1.0mmol 4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得绿色固体C12，收率52.2％，m.p.259～261℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.20(s，3H，CH3CO)，2.64(s，3H，CH3)，3.85(s，6H，2×CH3O)，7.09～7.13(m，2H，C6H2)，7.26(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.60(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，9.07(s，1H，OH)，12.51(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.80，23.08，56.67，107.27，122.34，125.19，125.48，139.26，144.58，148.56，155.23，159.70，169.68，182.85。

实施例16

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-甲酰氨基噻唑(C13)的制备

(1)4-甲基-5-乙酰基-2-甲酰氨基噻唑的制备

按实施例2的方法，6.0mmol甲酸与4.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑反应8h，粗品经乙酸乙酯/四氢呋喃重结晶得灰白色固体4-甲基-5-乙酰基-2-甲酰氨基噻唑，收率64.4％，m.p.228～230℃。

(2)4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-甲酰氨基噻唑(C13)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-甲酰氨基噻唑与1.0mmol对羟基苯甲醛反应6h。粗品经乙醇重结晶得黄色固体C13，收率53.2％，m.p.241～243℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.64(s，3H，CH3)，6.84(d，J＝7.5Hz，2H，C6H4)，7.20(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.61(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.67(d，J＝7.5Hz，2H，C6H4)，8.60(s，1H，CHO)，10.12(s，1H，OH)，12.60(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：18.73，116.39，121.43，125.81，126.02，131.40，144.01，155.15，157.93，160.74，160.90，182.64。

实施例17

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-丙酰氨基噻唑(C14)的制备

(1)4-甲基-5-乙酰基-2-丙酰氨基噻唑的制备

按实施例2的方法，6.0mmol丙酸与4.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑反应8h，粗品经乙酸乙酯/四氢呋喃重结晶得灰白色固体4-甲基-5-乙酰基-2-丙酰氨基噻唑，收率66.7％，m.p.238～240℃。

(2)4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-丙酰氨基噻唑(C14)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-丙酰氨基噻唑与1.0mmol对羟基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得黄色固体C14，收率66.9％，m.p.236～238℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：1.11(t，J＝7.3Hz，3H，CH3)，2.48(q，J＝7.3Hz，2H，CH2)，2.64(s，3H，thiazole-CH3)，6.88(d，J＝7.7Hz，2H，C6H4)，7.19(d，J＝15.2Hz，1H，CH)，7.59(d，J＝15.6Hz，1H，CH)，7.65(d，J＝7.7Hz，2H，C6H4)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：9.46，18.82，28.91，121.49，125.49，125.69，130.79，131.23，143.63，155.20，160.09，160.91，173.53，182.60。

实施例18

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-丁酰氨基噻唑(C15)的制备

(1)4-甲基-5-乙酰基-2-丁酰氨基噻唑的制备

按实施例2的方法，6.0mmol丁酸与4.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑反应8h，粗品经乙酸乙酯/四氢呋喃重结晶得灰白色固体4-甲基-5-乙酰基-2-丁酰氨基噻唑，收率78.7％，m.p.245～247℃。

(2)4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-丁酰氨基噻唑(C15)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-丁酰氨基噻唑与1.0mmol对羟基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得黄色固体C15，收率54.5％，m.p.229～231℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：0.91(t，J＝7.4Hz，3H，CH3)，1.57～1.69(m，2H，CH2)，2.45(t，J＝7.3Hz，2H，CH2CO)，2.64(s，3H，thiazole-CH3)，6.84(d，J＝8.1Hz，2H，C6H4)，7.19(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.60(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.66(d，J＝8.1Hz，2H，C6H4)，10.11(s，1H，OH)，12.47(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：13.93，18.51，18.77，37.31，116.37，121.58，125.56，125.86，131.29，143.66，155.20，159.65，160.64，172.46，182.60。

实施例19

4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑(C16)的制备

(1)4-甲基-5-乙酰基-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑的制备

按实施例2的方法，6.0mmol 3-氯丙酸与4.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-氨基噻唑反应8h，粗品经乙酸乙酯/四氢呋喃重结晶得灰色固体4-甲基-5-乙酰基-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑，收率77.5％，m.p.168～170℃。

(2)4-甲基-5-[3-(4-羟基苯基)丙烯酰基]-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑(C16)的制备

按实施例3的方法，1.0mmol 4-甲基-5-乙酰基-2-(3-氯丙酰氨基)噻唑与1.0mmol对羟基苯甲醛反应6h，粗品经乙醇重结晶得黄色固体C16，收率73.2％，m.p.235～237℃。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：2.63(s，3H，CH3)，3.21(t，J＝6.4Hz，2H，CH2)，4.55(t，J＝6.4Hz，2H，CH2)，6.88(d，J＝8.3Hz，2H，C6H4)，7.19(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.60(d，J＝15.3Hz，1H，CH)，7.68(d，J＝8.3Hz，2H，C6H4)，9.23(s，1H，OH)，12.78(s，1H，NH)。13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δ：16.72，36.57，39.87，116.16，122.51，124.14，127.54，130.57，138.30，144.27，159.16，164.58，176.24，187.65。

实施例20

5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物的抗流感病毒神经氨酸酶活性

1.实验原理

化合物MUNANA是神经氨酸酶的特异性底物，在神经氨酸酶作用下产生的代谢产物在360nm照射激发下，可以产生450nm荧光，荧光强度的变化可以灵敏地反应神经氨酸酶活性。酶都来自A/PR/8/34(H1N1)病毒毒株。

2.实验方法

在酶反应体系中，一定浓度样品与流感病毒神NA悬浮于反应缓冲液中(pH 6.5)，加入荧光底物MUNANA启动反应体系，37℃孵育40分钟后，加反应终止液终止反应。在激发波长360nm和发射波长为450nm的参数条件下，测定荧光强度值。反应体系的荧光强度可以反映酶的活性。根据荧光强度的减少量可以计算化合物对NA活性的抑制率。

3.检测样品：实施例化合物

4.活性结果

化合物在反应系统中检测浓度40.0μg/mL时对神经氨酸酶的抑制率和IC50值列入表1。

表1 5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物对神经氨酸酶H1N1的抑制活性和IC50

化合物1]]>2]]>40.0μg/mL,抑制率/％50(μg/mL)]]>50(μM)]]>C14-OH3]]>92.32±0.108.2±0.527.1±1.6C23]]>3]]>65.60±2.5825.6±0.981.0±2.8C33)₂]]>3]]>76.52±1.8716.5±1.150.1±3.4C42]]>3]]>61.33±4.7527.3±3.382.5±9.8C52]]>3]]>64.57±1.6624.3±1.180.7±3.8C92]]>3]]>82.80±1.8512.9±1.740.5±5.3C103-4-OH]]>3]]>70.16±3.2523.0±1.169.3±3.4C113]]>3]]>76.63±2.9120.1±1.460.4±4.1C123)₂-4-OH]]>3]]>84.14±1.7914.6±1.440.3±3.8C134-OHH92.78±0.2514.0±1.128.6±2.7C144-OHEt89.52±3.428.7±0.727.6±2.1C154-OHn-Pr91.06±1.2216.4±0.349.6±1.0C164-OH2)₂Cl]]>74.12±4.1620.7±1.758.9±4.8

5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物具有抗流感病毒神经氨酸酶活性，可用于制备流感病毒神经氨酸酶抑制剂。

实施例21

抗流感病毒神经氨酸酶活性对比实验

按实施例20方法做抗流感病毒神经氨酸酶活性对比实验：中国医学科学院药物研究所国家药物筛选中心选取化合物22a[Kinger等,Arch Pharm Res,2012,35(4):633-638]和本发明结构相近的化合物C3做抗流感病毒神经氨酸酶活性对比实验，活性结果如下：

在同系列化合物中，化合物22a具有较好的NA抑制活性水平，IC50＝1.5±0.28μM。由于不同作者或申请人的活性实验测试方法与NA来源不同，活性值可能存在一定差异。选取化合物22a和化合物C3在等同的活性测试条件下测定了其对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)NA的抑制活性，在40μg/mL的检测浓度下，22a的抑制率为11.89％；与其结构部分相似的化合物C3的抑制率76.52±1.87％。化合物C3的抑制率的高于22a的抑制率。

实施例22

抗流感病毒神经氨酸酶活性对比实验

按实施例20方法做抗流感病毒神经氨酸酶活性对比实验：中国医学科学院药物研究所国家药物筛选中心选取化合物A、化合物B和化合物C1做抗流感病毒神经氨酸酶活性对比实验，活性结果如表2所示：

表2化合物A,B和C1(40.0μg/mL)对神经氨酸酶H1N1的抑制活性和IC50

化合物C1的活性的高于化合物A和化合物B。

5-(3-苯基丙烯酰基)噻唑衍生物及其制备方法与应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。